中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位： 国家中医药管理局
- 主办单位： 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子： 1.62
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-9903
- 国内刊号： 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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柴胡不同炮制品对虚热证大鼠的干预作用
目的:综合评价柴胡的不同炮制品对于热性中药致虚热大鼠的干预作用.方法:SD健康雄性大鼠46只,随机分为正常组(6只),模型组(40只),模型组采用灌胃热性中药附子、干姜、肉桂(20 g·kg -1 方法建立虚热动物模型,成功造模后,随机将其分为正常组,模型组,知柏地黄丸组(知柏地黄丸,0.5 g·kg -1),生品柴胡组,鳖血炒柴胡组,鳖血润柴胡组,酒柴胡组,醋柴胡组.各炮制品给药量均为3.15 g·kg - 1,正常组灌以等量的双蒸水,治疗11 d,每日1次,观测大鼠的一般情况及代谢笼指标,通过测定并比较血清中D-木糖,血清三碘甲状腺原酸(T3),甲状腺素(T4),血浆环磷酸腺苷(cAMP),环磷酸鸟苷(cGMP)含量,乳酸(LD),乳酸脱氢酶(LDH),三磷酸腺苷(ATP)酶活力等的含量及大鼠各脏器指数.结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量增长缓慢,肛温、饮水量、尿液量、体液消耗量增高,饮食量,D-木糖含量下降,血浆cAMP含量,cGMP含量,血清LD含量,LDH活力,肝组织中Na+-K + -ATP酶活力,Ca2 + -Mg2+-ATP酶活力,血清T3和T4含量均上升(P＜0.05),说明成功复制虚热模型;与模型组比较,柴胡不同炮制品及知柏地黄丸组的木糖均上升(P＜0.05),血浆cAMP含量和cGMP含量均降低(p＜0.05),LD和LDH含量均上升(P＜0.05),各组中的ATP,T3,T4含量均降低(P ＜ 0.05 ).结论:柴胡的不同炮制品对于热性中药致虚热大鼠的各个生理指标均有趋于正常水平回转的趋势,对于大鼠的虚热证具有治疗作用,而不同的炮制品对于各个生理指标的影响效果不同,由此可见,不同的炮制品对于虚热大鼠具有不同程度地干预作用.
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断藤益母汤对破骨细胞RANKL信号通路及MMP-9的影响
目的:探讨断藤益母汤(DTYMD)对破骨细胞(OC)核转录因子-κB(NF-κB)受体活化因子配体(RANKL)信号通路及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响及其骨保护的作用机制.方法:通过诱导RAW264.7巨噬细胞建立体外破骨细胞培养体系;设空白组,模型组,DTYMD(400,600,800,1 000 mg· L-1)组和甲氨蝶呤(2 mg· L-1 )组,然后通过抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色对破骨细胞进行鉴定;细胞增殖检测(CCK-8)各组细胞生存率;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测RANKL信号通路关键蛋白表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测各组细胞MMP-9表达水平的变化.结果:TRAP染色显示,与模型组相比, DTYMD 400,600 mg·L - 1组融合细胞数量有所减少,但差异无统计学差异;DTYMD 800,1 000 mg· L-1组融合细胞数目显著减少(P＜0.01).CCK-8结果显示,与模型组比较,DTYMD 600,800,1 000 mg· L -1组和甲氨蝶呤2 mg· L-1组生存率明显下降(P＜0.05,P＜0.01). Western blot结果显示,与模型组相比,DTYMD 1000 mg· L-1组、甲氨蝶呤2 mg· L 组中RANKL蛋白表达有所下降(P＜0.05).DTYMD各组中的OPG蛋白表达水平无明显变化.ELISA结果显示,与模型组相比,DTYMD各组及甲氨蝶呤组中的MMP-9表达水平均有所下降,且DTYMD质量浓度越高,下降越明显(P＜0.05,P＜0.01).结论:断藤益母汤可能是通过下调RANKL和MMP-9的表达以及抑制破骨细胞的分化和增殖而起到骨保护作用.
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基于UPLC-Q-TOF-MS分析雷公藤配伍甘草治疗肾病综合征大鼠的尿液代谢组学
目的:考察雷公藤配伍甘草对肾病综合征大鼠尿液中内源性代谢产物的影响,通过尿液代谢组学技术探讨该药对的作用机制.方法:大鼠随机分为4组,分别为空白组、模型组、雷公藤单独给药组(TPW组)和雷公藤配伍甘草给药组(TPW-GLY组).采用UPLC-Q-TOF-MS,结合主成分分析(PCA)和正交偏小二乘法-判别分析(OPLS-DA),对尿液样品的代谢物图谱进行模式识别及生物标记物的筛选与鉴定.结果:空白组,模型组,TPW组及TPW-GLY组的代谢轮廓有明显差异,筛选并鉴定出空白组与模型组间具有显著性差异的生物标记物29个,其中受TPW-GLY组回调的生物标记物14个,受TPW组回调的生物标记物11个;TPW-GLY组和TPW组显著差异物7个,分别为/V-乙酰谷氨酸,二羟基粪甾烷酸,烟尿酸,12-酮脱氧胆酸,甘油三酯(16:0/16:0/20:4),泛醌Q2和1,3,7-三甲基尿酸.结论:雷公藤与甘草配伍给药后,可能通过改善肾病综合征大鼠体内的氨基酸代谢、胆汁酸代谢、脂肪及脂肪酸代谢、能量代谢及嘌呤代谢等过程,改善了疾病状态,进而起到减毒增效的作用.
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阿魏酸钠对乙醛诱导的肝星状细胞增殖、活化和胶原合成的影响
目的:研究阿魏酸钠(SF)对体外乙醛诱导的大鼠肝星状细胞(HSC-T6)增殖、活化、胶原合成的影响及其作用机制.方法:体外培养HSC-T6细胞,建立乙醛诱导的HSC-T6增殖模型,设空白组、乙醛组、秋水仙碱组(2.5 μmol· L-1)及SF组(1,10,25,50,100,200,400 μmol·L-1),通过细胞增殖和毒性检测(MTS)比色法检测细胞增殖,筛选合适的SF浓度.蛋白免疫印迹法(Western blot)检测SF(400,200,100 μmol· L-1 )对乙醛诱导的HSC-T6细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测I型,Ⅲ型胶原浓度,酸水解法检测羟脯氨酸(Hyp)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测转化生长因子1-β1(TGF-β1),信号转导蛋白Smad2,Smad3,Smad4,Smad7,基质金属蛋白酶-l(MMP-l)和金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)基因mRNA表达变化.结果:与空白组比较,200 μmol · L -1的乙醛能显著诱导HSC-T6体外增殖(P ＜0.01);与空白组比较,模型组HSC-T6增殖显著增加(P ＜0.01),α-SMA和I型,Ⅲ型胶原和Hyp含量显著增加(P ＜ 0.01), TGF-β1,Smad2,Smad3,Smad4,Smad7 mRNA的表达显著上调(P ＜ 0.01 ),MMP-1和 TIMP-1 mRNA表达显著上调(P ＜ 0.01 ).与模型组比较,400,200,100 μmol.L-1浓度的SF能明显抑制乙醛诱导的HSC-T6增殖(P ＜ 0.05,P ＜0.01),显著降低a-SMA和 I型,Ⅲ型胶原和 Hyp 含量(P＜0.01),下调 TGF-β, Smad2, Smad3,Smad4基因 mRNA的表达(P ＜ 0.05,P ＜ 0.01 ),上调 Smad7基因 mRNA表达(P ＜ 0.01 ),并明显上调 MMP-1 mRNA表达(P ＜ 0.05,P ＜ 0.01 )和下调 TIMP-1 mRNA表达(P ＜0.01).结论:SF能通过调控TGF-β1/Smad 和 MMP-1/TIMP-1信号通路,抑制乙醛诱导的体外HSC-T6细胞的增殖,活化和胶原分泌.
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柴胡疏肝散体外抗氧化活性成分与调控抑郁症相关酶的关联性分析
目的:研究柴胡疏肝散(CSGS)体外抗氧化活性能力,识别抗氧化活性成分并评价其对CSGS治疗抑郁症的调控能力.方法:将CSGS进行拆方研究,采用1,l-diphenyl-2-piCryl-hydraZyl (DPPH)法测定各配伍方自由基清除能力,以半数抑制浓度(IC50)(清除率为50％时的质量浓度)为评价指标;高效液相色谱法(HPLC)建立特征图谱,利用正交投影偏小二乘法 (orthogonal partial least squares, OPLS)研究特征峰与药效的相关性,根据变异权重系数(variable importance of projection,VIP)来辨识显著活性成分.运用SYBYL 2.0软件对CSGS中的抗氧化活性成分与CSGS治疗抑郁症所调控的相关酶进行分子对接研究,根据Total score值判断小分子与大分子的结合能力.结果:CSGS组方药材对抗氧化药效贡献的大小依次为枳壳 ＞陈皮 ＞川芎 ＞柴胡 ＞香附 ＞ 白芍 ＞甘草,鉴定出3个具有显著抗氧化活性的成分,分别为橙皮苷、新橙皮苷和芸香柚皮苷.3个抗氧化活性成分与CSGS治疗抑郁症所调控的相关酶的分子对接打分结果均显示了良好的结合能力,其中橙皮苷与色氨酸酶(TPH),新橙皮苷与超氧化物歧化酶(SOD),芸香柚皮苷与色氨酸2,3-加二氧酶(TPHD)的结合能分别是9.088 7,8. 0,9.271 8.结论:橙皮苷,新橙皮苷和芸香柚皮苷是CSGS体外抗氧化活性的主要有效成分且在CSGS治疗抑郁症中可能发挥了一定的调控作用.
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α-常春藤皂苷对黑色素瘤B16细胞增殖和凋亡的影响及机制
目的:探讨α-常春藤皂苷(α-HN)对黑色素瘤B16细胞增殖和凋亡的影响及潜在机制.方法:常规培养B16细胞至对数生长期,给予不同浓度α-HN(50,100,200 μrnol·L-1)处理,设未经α-HN处理的B16细胞为空白组;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测α-HN处理24,48,72 h后各组细胞的增殖情况,采用膜联蛋白V/碘化丙啶(Annexin V-FITC/PI)凋亡试剂盒检测α-HN处理48 h后的细胞凋亡率,半胱天冬蛋白酶(Caspase)活性检测试剂盒检测Caspase-3和Caspase-9的活性,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),磷酸化磷脂酰肌醇-3-羟激酶(p-PI3K),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)及磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)的表达情况.结果:与空白组相比,经50,100,200 μmol·L-1 α-HN处理24,48,72 h后,B16细胞增殖抑制率显著增加(P＜0.01),且随着观察时间的延长,增殖抑制率有逐渐增加趋势,该抑制作用呈时间依赖性和浓度依赖性;与空白组相比,α-HN处理48 h后B16细胞的凋亡率升高,Caspase-3和Caspase-9活性增强,且Bcl-2水平降低而Bax水平升高(P＜0.01);α-HN处理48 h 后的p-PI3K,p-Akt,p-mTOR蛋白表达较空白组降低(P＜0.05, P ＜0.01).结论:α-HN具有抑制B16细胞增殖及诱导凋亡作用,其可能通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路来发挥细胞毒及诱导凋亡作用,在黑色素瘤治疗中有较好的应用前景.
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补肾降浊饮对非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗的影响
目的:研究补肾降浊饮对非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠胰岛素抵抗(IR)的干预作用,探讨其对胰岛素信号通路中细胞因子及激酶等的影响.方法:将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、补肾降浊饮低、中、高剂量组(10,15,20 g·kg -1)及水飞蓟宾葡甲胺组(19 g·kg-1),正常组予普通饲料喂养,其余各组予高脂饲料喂养并同时灌胃生理盐水或相应剂量药物干预.12周后检测各组大鼠血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转氨酶(AST),空腹血糖(FBG),胰岛素(INS)水平,胰岛素抵抗指数(IRI),胰岛素敏感指数(ISI)及肝组织中脂联素(ADP),游离脂肪酸(FFA),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)含量;苏木素-伊红(HE)染色、油红O染色检测肝组织脂肪变性程度;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠肝组织中c-Jun氨基端激酶1 (JNK1 ),磷酸化c-Jun氨基端激酶(P-JNK)及胰岛素受体α(Irα),磷酸化胰岛素受体底物1丝氨酸307位点(p-IRS-1)表达水平.结果:与正常组比较,模型组大鼠 TG,TC, ALT, AST, FBG, INS, IRI,TNF-α,FFA, MDA水平及 JNKl,p-JNK及 p-IRS-1蛋白表达显著升高,ISI,ADP, SOD水平显著降低(P＜0.01);与模型组比较,补肾降浊饮低、中、高剂量组可不同程度降低大鼠血清中TG,TC,ALT,AST,FBG,INS, IRI,TNF-a,FFA,MDA水平及 JNK1,p-JNK及 p-IRS-1蛋白表达(P ＜ 0.05,P ＜ 0.01),升高 ISI,ADP,SOD水平(P ＜0.05,P ＜0.01);相较于水飞蓟宾葡甲胺组,补肾降浊饮高剂量组疗效显著(P＜0.01).结论:补肾降浊饮可改善非酒精性脂肪肝大鼠胰岛素抵抗,其机制可能与提高ADP含量,减轻氧化应激,抑制JNK信号通路进而增强胰岛素受体底物活性有关.
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清热化痰解毒方对脑缺血再灌注大鼠肺组织TXNIP/NLRP3炎性通路的影响
目的:探究清热化痰解毒方对脑缺血再灌注大鼠肺组织的影响,并初步探讨相关分子机制.方法:将SD大鼠分为假手术组、模型组、阳性药组(灌胃尼莫地平200 mg·kg -1)、清热化痰解毒方低、高剂量组(100,200 mg·kg -1 ),每组10只,除假手术组外,采用改良4动脉阻断法制备大鼠全脑缺血再灌注损伤模型,造模后,给药3 d.肺湿/干重(W/D)分析,采用苏木素-伊红(HE)染色进行组织病理学分析;酶联免疫吸附法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素(interleukin,IL)-lβ和 IL-18水平;肺髓过氧化物酶试剂盒检测髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性;免疫组化分析核苷酸结合域样受体蛋白3 (nucleotide-binding domain-like receptor 3, NLRP3 )阳性细胞数;半胱氨酸天冬氨酸酶-1(Caspase-1 )比色测定试剂盒检测 Caspase-1活性;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3, ASC, Caspase-1 mRNA和蛋白表达,免疫共沉淀检测硫氧还蛋白相互作用蛋白(TXNIP)-NLRP3蛋白表达.结果:与假手术组比较,模型组肺损伤评分,肺W/D,BALF中IL-1β和IL-18水平、总细胞和多形核白细胞数量,MPO活性均明显增加(P ＜ 0.05 );与模型组比较,尼莫地平组、清热化痰解毒方低、高剂量组肺损伤评分,肺W/D,BALF中IL-lβ和IL-18水平、总细胞和多形核白细胞数量及MPO活性均明显降低(P＜0.05).与假手术组比较,模型组肺组织中NLRP3阳性细胞数,Caspase-1活性,NLRP3,ASC, Caspase-1蛋白和mRNA相对表达明显增加(P ＜ 0.05 );与模型组比较,尼莫地平组、清热化痰解毒方低、高剂量组肺组织中 NLRP3阳性细胞数,Caspase-1活性,NLRP3,ASC,Caspase-l蛋白和mRNA相对表达均明显降低(P ＜ 0.05 ).与假手术组比较,模型组肺组织中ROS产生,TXNIP蛋白表达均明显增加(P＜0.05);与模型组比较,尼莫地平组、清热化痰解毒方低、高剂量组肺组织中ROS产生,TXNIP蛋白表达均明显降低(P＜0.05).与假手术组比较,模型组肺组织中TXNIP-NLRP3蛋白共沉淀增加.与模型组比较,尼莫地平组、清热化痰解毒方低、高剂量组肺组织中TXNIP-NLRP3蛋白共沉淀减少.结论:清热化痰解毒方对全脑缺血再灌注大鼠的炎症性肺损伤具有保护作用,且这种作用可能通过抑制ROS产生,从而抑制TXNIP-NLRP3炎症通路介导的促炎介质IL-1β和IL-18的分泌,终抑制肺组织中炎性细胞浸润,缓解肺组织损伤.
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左金方及其主要成分小檗碱对人胃癌细胞SGC7901上皮间质转化的影响
目的:研究左金方及其主要成分小檗碱对人胃癌细胞SGC7901上皮间质转化的影响.方法:制备左金方冻干粉,采用高效液相色谱法(HPLC),对比小檗碱对照品,明确左金方冻干粉的纯度和小檗碱含量;采用噻唑蓝(MTT)比色法检测左金方及小檗碱对SGC7901细胞生长影响,并确定后续实验给药浓度;划痕实验检测左金方及小檗碱对SGC7901细胞迁移能力的影响;细胞侵袭实验(transwell小室)检测左金方及小檗碱对SGC7901细胞侵袭能力的影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测左金方及小檗碱作用SGC7901细胞24 h后对上皮间质转化(EMT)标志性蛋白上皮型钙黏蛋白(E-cadherin),神经型钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达的影响.结果:制备的左金方冻干粉含9.85％的小檗碱;左金方、小檗碱对 SGC7901细胞作用24 h的半数抑制浓度(IC50)分别为165,51.8 mg·L-1,选用165 mg·L -1左金方(含小檗碱16.3 mg·L-1)与16.3 mg·L-1小檗碱进行后续实验;左金方及小檗碱均能抑制SGC7901细胞划痕愈合及侵袭能力;Western blot结果显示,与空白组比较,左金方及小檗碱能明显上调E-cadherin表达,下调N-cadherin表达(P＜0.05).结论:左金方及其主要成分小檗碱能抑制人胃癌细胞SGC7901的生长、侵袭及迁移,能抑制SGC7901细胞上皮间质转化,且小檗碱在复方中为其主要药效成分.
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当归红芪超滤物对辐射后心肌成纤维细胞的增殖和胶原分泌的影响
目的:研究当归红芪超滤物对辐射后心肌成纤维细胞增殖和胶原分泌的影响.方法:采用差速贴壁法原代分离培养大鼠心肌成纤维细胞;当归红芪超滤物干预或射线辐射心肌成纤维细胞后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞的增殖,酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞分泌I型胶原(COL-I )的含量;心肌成纤维细胞通过2', 7'-二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)染色在流式细胞仪下检测活性氧(ROS)的含量;采用实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测心肌成纤维细胞中COL-I和转化生长因子-β(TGF-β)的mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测相关蛋白的表达.结果:低剂量射线(0.5 Gy)辐射心肌成纤维细胞后,细胞内ROS的升高促进细胞增殖和胶原分泌的作用;当归红芪超滤物可以促进细胞中转录因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白的核转位来清除ROS,终抑制辐射诱导的心肌成纤维细胞的增殖和胶原分泌;并且当归红芪超滤物明显抑制心肌成纤维细胞中COL-I和TGF-βmRNA表达.结论:当归红芪超滤物可以抑制低剂量辐射诱导的心肌成纤维细胞增殖和胶原分泌.
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补肾活血方对血管性痴呆大鼠脑海马细胞凋亡及ERK2,CREB表达的影响
目的:探讨补肾活血方治疗血管性痴呆(vascular dementia,VD)模型大鼠脑海马细胞凋亡的作用与机制.方法:75只SD雄性大鼠经水迷宫筛选后,随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组,补肾活血方高、低剂量(10.14,5.07 g·kg-1·d-1)组,共5组,除假手术组外,其余各组采用两血管阻断法制备VD大鼠模型.补肾活血方高、低剂量组和尼莫地平组分别予补肾活血方药及尼莫地平片治疗30 d,各组大鼠进行Morris水迷宫测试,并采用原位细胞凋亡检测法(TUNEL)测定脑海马细胞凋亡情况,免疫组化法及蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠脑海马细胞外信号调节激酶2(ERK2),环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)表达水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠逃避潜伏期延长(P＜0.05),穿越平台次数及原平台停留时间均减少(P＜0.01),脑海马细胞凋亡积分吸光度(1A)显著升高,平均灰度值显著下降(P＜0.01),脑海马ERK2,CREB(免疫组化)表达的IA明显下降,平均灰度值明显升高(P＜0.05),蛋白表达量(Western blot)显著下降(P ＜ 0.01 );与模型组比较,补肾活血方高、低剂量组能提高大鼠水迷宫学习记忆能力,降低细胞凋亡IA(P＜0.01),升高平均灰度值(P＜0.01),提高脑海马组织 ERK2,CREB的IA和蛋白表达量 ( P ＜ 0.05,P ＜ 0.01).结论:补肾活血方药可能通过调控大鼠海马ERK/CREB信号通路,抑制海马细胞凋亡,从而改善VD大鼠学习记忆能力.
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2种黄檀属植物粗提物的抑菌抗炎作用分析
目的:研究斜叶黄檀和两粤黄檀2种植物粗提物的抑菌和抗炎作用.方法:通过二倍稀释法,考察2种植物粗提物对表皮葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌作用;将小鼠随机分为空白组、阳性组、斜叶黄檀和两粤黄檀低、中、高剂量组(0.85,1.7,2.6 g·kg-1),共8组,每组8只,采用二甲苯致耳肿胀、鸡蛋清致足肿胀和小鼠痤疮模型研究2种黄檀属植物粗提物的抗炎作用.结果:2种黄檀属植物对表皮葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑菌作用,两粤黄檀的小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)分别为5,10,40 g·L-1,斜叶黄檀的MIC分别为2.5,2.5,20 g·L-1.2种黄檀属植物的中、高剂量组均能显著减轻二甲苯所致的小鼠耳肿胀度(P＜0.05,P＜0.01);斜叶黄檀高剂量组和两粤黄檀中、高剂量组可明显抑制由鸡蛋清致炎3,4,6 h后的足肿胀度(P＜0.01);斜叶黄檀中剂量组和两粤黄檀中、高剂量组可明显减轻混合菌液引起的耳肿胀度(P＜0.01).结论:斜叶黄檀和两粤黄檀均具有显著的抑菌和抗炎作用.
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沉香超微粉与山沉香超微粉药效学对比分析
目的:研究沉香超微粉、原粉抗心肌缺血、耐缺氧、镇痛与镇静的药理学作用,并与山沉香超微粉作对比研究.方法:冠脉结扎方法制造大鼠心肌缺血模型,并观察沉香与山沉香各给药组大鼠心梗面积,心电图,血清肌酸激酶(CK),超氧化物歧化酶(SOD),乳酸脱氢酶(LDH);钠石灰法观察沉香与山沉香各给药组小鼠存活时间;乙酸扭体法和戊巴比妥钠协同法观察沉香与山沉香各给药组对小鼠的镇痛、镇静作用.结果:沉香超微粉、原粉和山沉香超微粉均有不同程度抗大鼠心肌缺血作用:可降低大鼠血清CK,LDH的活性,提高血清SOD的活性,并能降低心肌缺血的面积,明显改善心电图(P＜0.05, P＜0.01),且沉香超微粉0.75,0.375 g.kg -1剂量组明显优于沉香原粉(P ＜0.05);相同剂量沉香超微粉与山沉香超微粉作用相当;沉香、山沉香各给药组对小鼠缺氧状态下存活时间均有延长作用(P＜0.05),相同剂量下山沉香超微粉作用优于沉香超微粉(P＜0.05);沉香和山沉香超微粉组可明显延长小鼠扭体潜伏期(P＜0.05),并减少扭体次数(P＜0.05),同剂量下山沉香超微粉与沉香超微粉组作用相当;山沉香和沉香超微粉对阈剂量戊巴比妥钠致小鼠睡眠时间均有明显延长作用(P ＜0.05).山沉香超微粉与对应剂量沉香超微粉组作用相当.结论:沉香超微粉、原粉与山沉香超微粉均有抗心肌缺血、耐缺氧、镇痛、镇静等作用,且同剂量下沉香超微粉作用优于其原粉,山沉香超微粉作用相当于对应剂量的沉香超微粉.
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基于生物热动力学的拳参对大肠埃希菌抑制作用
目的:测定不同产地、不同颜色拳参对大肠埃希菌生长代谢的影响,从生物热力学角度研究拳参对大肠埃希菌的抑制作用.方法:用微量热法测定18批拳参作用于大肠埃希菌生长代谢的热谱曲线,取得达峰时间(t1,t2),大产热功率(Pmaz1,Pmax2),生长速率常数(k1,k2),抑制率(I)4个主要参数.结果:河北、山东、安徽产拳参可延长大肠埃希菌第二指数生长期达峰时间(t2),降低大产热功率(Pmax2)及生长速率(k2),湖北产拳参与其他产地样品趋势不同;各产地拳参对第一指数生长期的峰时间(t1),降低大产热功率(pmax1)及生长速率(k1)均无影响.不同产地拳参样品对大肠埃希菌抑制率不同(I),河北、山东、安徽产拳参抑制率在20％ ～50％,湖北拳参样品抑制率较低.同一批次不同颜色拳参样品抑制率有差异,9个批号样品中,7批棕红色饮片抑制率高于紫红色饮片.结论:不同产地棕红色及紫红色拳参对大肠埃希菌的生长代谢曲线均有不同程度的抑制作用,其差异原因有待进一步研究.
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新疆4种动物骨质和骨髓蛋白中常量微量元素比较分析
目的:测定新疆特色羊、牛、马、骆驼4种动物腿骨骨髓粉末,骨髓油,骨髓蛋白及骨质蛋白中常量微量元素含量及骨髓蛋白相对分子质量,为传统动物药质量标准完善提供参考.方法:用电感耦合等离子发射光谱法(ICP-OES)测定Ca, K,Na,B,P,Ba,Cr,Cu,Fe,Mg,Mn,Ni,Sr,Zn,Si 15种元素含量,并用一位电泳查看骨髓蛋白相对分子质量.结果:4种骨髓蛋白条带均显示在66 kDa处,各元素线性关系良好,检出限在0.13 ～3.99 μg·L -1,精密度RSD在0.2％ ～2.7％,回收率在92.5％ ～101.4％,大量常量、微量元素均富集在骨质和骨髓蛋白中,其中马骨髓蛋白有益元素丰富,其中Ca,P质量分数分别高达92,10.83 mg·g -1.Na,K,Ca,P,Mg等5种元素含量为骨质蛋白 ＞骨髓蛋白 ＞ 骨髓粉末 ＞ 骨髓油;Fe,Cu,Zn, Mn等其他元素含量为骨髓蛋白 ＞骨质蛋白 ＞ 骨髓粉末 ＞骨髓油.结论:建立的ICP-OES适用于各类动物骨质和骨髓样品中常量微量元素比较分析,灵敏度高.建议以蛋白、多肽为重点对动物药骨髓和骨质进行开发利用,既能够提高其综合利用率,也为相关功能食品、药品的研发提供理论依据.
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景东山橙中生物碱类化学成分
目的:夹竹桃科(Apocynaceae)山橙属(Melodinus)植物在我国民间应用的历史悠久,其生物碱类化学成分具有抗肿瘤、抗菌、抗生育等生物活性.该文对夹竹桃科山橙属植物景东山橙(Melodinus Khasianus)中生物碱类化学成分进行系统研究.方法:运用硅胶柱色谱、反相硅胶柱色谱及高效液相制备色谱对景东山橙中生物碱类化学成分进行分离和纯化,并通过其理化性质及波谱数据确证生物碱类化合物的结构.通过噻唑蓝(MTT)比色法,对分离得到的化合物进行前列腺癌细胞(PC-3),肺癌细胞(A549),胃癌细胞(HGC-27)和人白血病细胞(HL-60)的细胞增殖抑制筛选.结果:从景东山橙乙醇提取物的三氯甲烷部位分离得到12个化合物,分别鉴定为(+ ) epi-16α-hydro-14, 15vincamine (1), 16β, 21β-epoxy-vincadine (2 ), melodinines G(3),melodinines P (4 ),melodinines N (5 ), 16β-hydroxy-19S-vindolinine (6), 16β-hydroxy-19R-vindolinine (7 ),15α-hydroxy-14,15-dihydrovindolinine(8),melodinines T(9),19-epimeloscandonine(10),门洛斯坎刀尼(11),攀援山橙碱(12).结论:其中化合物1～10为首次从景东山橙中分离得到的生物碱.采用MTT比色法对化合物进行体外抗肿瘤活性筛选,发现化合物4,5对前列腺癌细胞(PC-3),肺癌细胞(A549),胃癌细胞(HGC-27)和人白血病细胞(HL-60)等肿瘤细胞具有一定的细胞增殖抑制作用.
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UPLC波长切换法测定复方大青叶合剂中10种成分
目的:建立同时测定复方大青叶合剂中没食子酸,新绿原酸,绿原酸,隐绿原酸,异绿原酸A,异绿原酸B,紫花前胡苷,异绿原酸C,大黄酚和大黄素的含量测定方法.方法:采用Waters CORTECS-C18色谱柱(4.6 mm × 150 mm,2.7 μm),甲醇(A)-0.4％ 甲酸溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0 ～10 min, 10％ ～3％A;10 -25 min, 3％ -35％ A;25 ～ 35 min, 35％ ～36％ A;35 ～55 min,36％ ～80％ A),柱温和流速分别为30 ℃ 和0.3 mL.min-1,波长切换,0 ～ 10 min,290 nm;10 ～38 min,330 nm;38 ～55 min,250 nm.结果:10种成分实现完全分离,并与其他成分均能达到良好的分离;没食子酸,新绿原酸,绿原酸,隐绿原酸,异绿原酸A,异绿原酸B,紫花前胡苷,异绿原酸C,大黄酚和大黄素分别在0.47 ～47.02,1.00 ～ 100.14,1.40 ～ 140.18,1.15 ～115.11,0.41 ～41.17,0.32 ～32.11,0.70 ～70.48,0.67 ～67.22,0.11 ～ 10.53,0.12 ～ 12.29 ng 与色谱峰峰面积呈良好线性关系;平均回收率(n =6)分别为99.4％,99.7％,99.8％,99.7％,99.4％,99.3％,99.8％,99.4％,99.4％,99.3％; RSD分别为1.0％,0.6％,0.6％,0.6％,1.0％,0.9％,0.8％,0.9％,1.2％,1.0％.结论:该方法多种成分同时测定,操作简便,准确、重复性好,可用于复方大青叶合剂的质量控制.
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IgA肾病中医证候分布及血清microRNA在疾病中的预测作用
目的:探讨IgA肾病(IgA nephropathy)的中医证候分布规律及模拟mRNA(microRNA)对IgA肾病的预测价值.方法:收集109例经肾脏穿刺符合IgA肾病病理诊断的临床病例,遵循中医证候诊断标准,分为肺肾气虚、脾肾气虚、肝肾阴虚、气阴两虚、脾肾阳虚5型.分析中医证候分布情况与临床指标之间的关系.从出现率高证型的患者中,随机抽取10例标本,健康人10例标本对照,运用实时荧光定量PCR技术对其血清中microRNA的表达水平进行检测.结果:109例患者的5种证型中,肺肾气虚型临床表现轻,病理分级低;脾肾阳虚型临床表现重,病理分级高;脾肾阳虚型肾小球滤过率较其余4型低,且该型24 h尿蛋白定量、血肌酐较其余4型高.其中气阴两虚证在IgA患者中出现频率高,共49例,其血清中 microRNA(miR)141,miR146a 高于正常组(P ＜0. 05),miR205,miR155,miR192低于正常组(P ＜ 0.05).结论:IgA肾病病理与临床理化指标改变加重的过程一定程度上反映了中医证型其病机演变规律为肺肾气虚-脾肾气虚-肝肾气虚-气阴两虚-脾肾阳虚;microRNA表达的差异与IgA肾病的严重程度及病情的进展密切相关,为IgA肾病的发病机制和诊断提供新的依据.
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基于中医证候特征的缺血性中风复发风险的横断面分析
目的:探讨缺血性中风复发风险的中医学证候学特征.方法:以长春中医药大学附属医院中风病及冠心病慢病防治管理信息协作平台为依托,调取2014年1月1日至2015年12月31日期间录入的中风病患者人群为研究对象并开展横断面研究.应用广义Boosted模型,Wilcoxon秩和检验及Logistic多元回归探讨多因素条件下证候及证候要素对中风病复发的影响情况.结果:本次研究共纳入病例3 322例,其中新发缺血性中风病例1 542例,复发缺血性中风病例1 780例.通过广义Boosted模型分析发现,证候学特征成为了影响缺血性中风复发的重要因素;采用Wilcoxon秩和检验进行对新发及复发缺血性中风的证候诊断比较,发现气虚血瘀、阴虚风动、风火上扰、痰热腑实证候构成比有统计学差异(P＜0.05,P＜0.01);复发缺血性中风病的证候要素痰、瘀、气虚的构成比高于新发缺血性中风病同样的证候要素的构成比(P＜0.01).应用Logistic多元回归分析后发现风痰阻络、气虚血瘀、痰热腑实、痰蒙清窍、痰热内闭证候类型表现可能是缺血性中风复发的危险因素(P＜0.05,P＜0.01);全部的风、火、痰、瘀、气虚、阴虚证候要素表现也可能是缺血性中风复发的危险因素(P＜0.05,P＜0.01).结论:缺血性中风复发人群显示出了特定的中医证候特征,提示在开展中风病二级预防的研究中应重视证候学特征的因素,有必要通过更多的循证医学手段和临床实践加以验证.
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地贞颗粒对围绝经期综合征患者阴虚内热证神经-内分泌的影响
目的:观察地贞颗粒对阴虚内热型围绝经期综合征(MPS)患者的疗效,探讨其对神经-内分泌的作用影响.方法:将收治的MPS 130例患者,按数字表法随机分为对照组和治疗组各65例.对照组口服谷维素片,2片/次,3次/d.治疗组在对照组治疗的基础上采取地贞颗粒治疗,1袋/次,3次/d.两组患者均连续治疗3个月.比较两组患者Kupperman指数(KI)评分、围绝经期生存质量量表(MENQOL)评分及临床疗效.检测两组患者血清中白细胞介素(IL-6),5-羟色胺(HT),促肾上腺皮质激素释放激素(CRH),促肾上腺皮质激素(ACTH),皮质酮(CORT),促性腺激素释放激素(GnRH),去甲肾上腺素(NE)以及雌二醇(E2),卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)水平.测定两组患者治疗前后血浆β-内啡肽(β-EP)水平.结果:治疗后,治疗组KI评分和MENQOL各指标评分均明显低于对照组(P ＜0.01).治疗组患者临床疗效总有效率为98.46％,优于对照组总有效率87.69％ (χ2 = 4.298 ＜0.05 ).治疗后,治疗组患者血清,CRH, ACTH,CORT,GnRH, NE水平均明显低于对照组,5-HT高于对照组(P ＜0.01).治疗后,治疗组患者血浆)β-EP水平显著高于对照组(P ＜ 0.01).治疗后,治疗组血清E2水平显著高于对照组,FSH,LH水平均明显低于对照组(P＜0.01).结论:在常规西医治疗的基础上,加服地贞颗粒可以使MPS患者阴虚内热证疗效明显,其调节患者的神经-内分泌途径可能与其疗效有关.
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加味参附汤合黄连阿胶汤对骨科手术后谵妄患者认知功能的影响
目的:探讨加味参附汤合黄连阿胶汤治疗骨科手术后谵妄(POD)患者认识功能障碍(POCD)的改善,及对血清神经元特异性烯醇化酶(NSE),S-100β蛋白、炎症反应和氧化应激损伤的影响.方法:采用区组随机法,将104例患者按以1:1比例分为对照组和观察组各52例.对照组口服氟哌啶醇片,4 ～20 mg·d-1,分3次服用.观察组在对照组治疗的基础上给予加味参附汤合黄连阿胶汤内服,1剂/d.两组疗程均连续治疗10 d.评价两组简易精神状态评价量表(MMSE),谵妄量表(DRS),谵妄消失时间、谵妄分级量表(DRS-R-98);检测治疗后NSE,S-100β蛋白,白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)等水平;采用临床疗效总评量表(CGI-GI)评价临床疗效.结果:观察组显效率为88.64％,高于对照组的69.23％,差异有统计学意义= 5.765,P ＜0.05);在治疗后第5天和第10天,观察组CAM和 DRS-R-98评分均低于对照组,MMSE高于对照组(P ＜0.05,P ＜0.01).观察组在治疗后CAM和DRS-R-98评分下降幅度多于对照组,MMSE升高幅度多于对照组(P＜0.01);治疗后观察组患者ADL和中医证候评分均低于对照组(P＜0.01);观察组平均谵妄消失时间短于对照组(P＜0.01);观察组患者NSE,S-100β,IL-6,TNF-α和MDA水平均低于对照组,SOD水平高于对照组(P＜0.01).结论:在西医治疗的基础上服用加味参附汤合黄连阿胶汤治疗POD,可加快POD的康复,改善认知功能,减轻症状,提高术后患者的日常生活能力,并能具有减轻氧化应激和炎症反应损伤,保护脑神经细胞效应,值得临床使用.
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大柴胡汤对冠心病不稳定型心绞痛血清Ghrelin和Obestatin的表达及肠道菌群构成的影响
目的:考察大柴胡汤对冠心病不稳定型心绞痛(UA)患者的治疗靶点,预测其对心绞痛治疗作用的通路.方法:进行前瞻性研究,患者共计110例,均为辽宁中医药大学附属医院心内一科2016年9月至2017年9月收治的患者,将人选的患者按照入院先后顺序排序,采用随机数字表达法分为治疗组与对照组,各55例,分别采用基础西药加大柴胡汤(治疗组)及基础西药(对照组)进行治疗.通过对纳入本研究患者的胃饥饿素(Ghrelin)及肥胖抑制素(Obestatin)表达水平及肠道菌构成进行分析.结果:经过基础治疗配合大柴胡汤,UA患者的总有效率大幅提高(P＜0.05);结果提示,大柴胡汤可以明显的改善 UA患者的临床症状,同时,进一步对患者的Ghrelin,Obestatin表达情况进行测定发现,大柴胡汤治疗组对UA患者Ghrelin的上升和Obestatin的下调均起到了加速的作用;肠道菌群构成的结果提示,大柴胡汤可使UA患者的拟杆菌门(Bαcteroidetes)和厚壁菌门(Firmicutes)两种细菌的构成会发生了变化.结论:大柴胡汤可以显著的影响UA患者的血清Ghrelin,ObeStatin表达,可调节UA患者的肠道菌群,并增加患者有益菌的种类与丰度.
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蒺藜科驼蹄瓣属植物化学成分
全球约有蒺藜科驼蹄瓣属植物150种,主要分布在亚洲、非洲、澳洲及地中海地区该属植物具有耐旱、抗风沙和耐盐碱特性,种子所到之处皆容易生根发芽,适应性极强.对该属植物的研究主要集中在提取物或组分的药理活性及化学成分的分离鉴定方面,文献记载该属的 Zygophyllum aegγptium,Z. album,Z. atriplicoides,Z. berenicense,Z. coccineum, Z. cornutum,Z. decumbens, Z. ducembens, Z. dumosum,Z. eichwaldii,Z. eurypterum, 驼蹄瓣 (Z. fabago),Z. gaetulum,Z. geslini, Z. melongena,Z. oxianum,Z.propinquum和Z. simplex等植物在民间用做草药或已被证明有生物活性,有的植物在亚洲、非洲地区民间被用于治疗糖尿病、高血脂、高血压、肥胖、腹泻和痉挛等;有的植物具有降糖、降压、降血脂、解痉、解热、抗腹泻、抑酶、抗氧化、抗炎、抗菌、抗癌等药理活性.驼蹄瓣属植物可以被用作防治代谢综合征,该属许多植物具有多种生物活性.对该属植物还有待于在以下几方面的进一步研究,①生物活性成分的活性导向分离;②分子机制的明确;③通过HPLC,GC,LC-MS等方法对生物活性成分的含量进行分析.该文综述了驼蹄瓣属植物中已分离和鉴定出的皂苷类、黄酮类、生物碱类和其他类化合物及其已知的药理活性.
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加味二妙颗粒剂与传统汤剂指纹图谱及指标成分含量的比较
目的:比较加味二妙颗粒剂与传统汤剂中7个化学成分的含量,建立该颗粒剂与汤剂的指纹图谱并进行物质基础一致性评价.方法:在前期研究基础上,通过已建立的含量测定与指纹图谱方法对加味二妙颗粒剂与传统汤剂中黄柏碱,盐酸小檗碱,盐酸药根碱,(R,S)-告依春,落新妇苷,橙皮苷和白术内酯Ⅲ的含量进行测定,以盐酸小檗碱为参照峰,利用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2012版)对加味二妙颗粒剂与传统汤剂进行相似度分析,采用主成分分析(PCA)对颗粒剂与汤剂的相对峰面积进行差异性分析并进行拆方煎煮,从定性角度考察拆方对加味二妙传统汤剂指纹图谱的影响.结果:加味二妙颗粒剂与传统汤剂中落新妇苷、盐酸药根碱、白术内酯Ⅲ的含量相差不大,且颗粒剂中黄柏碱、盐酸小檗碱、橙皮苷和(R,S)-告依春的含量高于传统汤剂.加味二妙颗粒剂确定了20个共有峰,传统汤剂确定了19个共有峰,颗粒剂与汤剂整体物质基础无明显变化,PCA结果表明加味二妙颗粒剂与传统汤剂的相对峰面积有一定差异,各拆方煎煮色谱图无新化合物产生.结论:建立的指纹图谱体现了加味二妙颗粒剂和传统汤剂的整体物质基础,颗粒剂与汤剂的物质基础基本一致,7个指标成分的含量结合指纹图谱能较为全面地体现加味二妙传统颗粒剂与汤剂的内在质量,可为二者的临床应用提供参考依据.
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基于超微粉碎工艺的残黄片质量稳定性提升
目的:改进残黄片的粉碎工艺,提升其质量稳定性.方法:借鉴中药复合粒子制备方法,设计3种超微粉碎工艺制备残黄片超微粉,利用扫描电镜观察粉体形态,差示扫描量热法评价各粉体的热稳定性,考察所得超微粉的粉体特性;通过高温、高湿、强光试验评价不同工艺所得残黄片的质量稳定性.结果:工艺1为残黄片中4味药材粗粉按比例混合后超微粉碎20 min.工艺2为将黄连与郁金一同超微粉碎25 min,青黛与白矾一同超微粉碎10 min,再将2种粉体混合均匀.工艺3为将黄连与郁金一同超微粉碎25 min,加入青黛继续粉碎10 min,再加入白矾粉碎5 min. 3种工艺所得超微粉形态及粉体学性质差异明显,各粉体比热容依次为1,242.7, 295.9 J·g-1.高温、高湿、强光试验结果显示只有工艺3所得残黄片各项检测指标均合格,稳定性较好.结论:粒子设计理念下的超微粉碎工艺3提升了残黄片的粉体特性和压片可塑性,所得残黄片质量稳定性有较大改善.
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近红外光谱结合主成分分析和聚类分析鉴别炉甘石生品、伪品和炮制品
目的:利用主成分判别分析和聚类分析建立炉甘石生品、伪品和炮制品的近红外光谱鉴别模型.方法:采集炉甘石生品、伪品和炮制品的近红外光谱,每类样品随机划分为训练集和测试集.对光谱预处理方法和建模谱段进行筛选,分别建立主成分判别分析模型及聚类分析模型.结果:光谱经一阶导数预处理,主成分判别分析模型的特征谱段为4 800 ～4 000 cm-1,聚类模型的特征谱段为7 300～7 000,4 800～4 000 cm-1.在主成分判别分析模型中,预测准确率94.34％;在聚类模型中,模型的预测准确率96.23％.结论:所建立的近红外主成分判别分析模型和聚类分析模型均可用于炉甘石生品、伪品和炮制品的鉴别.
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基于系统药理学的葛根芩连汤治疗2型糖尿病作用机制探讨
目的:通过系统药理学方法探讨葛根芩连汤治疗2型糖尿病的作用机制及原理.方法:利用中药系统药理学分析平台(traditional Chinese medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)数据库筛选葛根芩连汤有效成分和相关靶标蛋白;运用网络可视化软件Cytoscape 3.5.1构建葛根芩连汤"有效成分-靶标"相互作用网络进行拓扑学分析;借助STRING 10.5在线数据库进行蛋白质与蛋白质相互作用(protein-protein interaction netWorkS,PPI)网络的构建与分析;通过 Uniprot数据库获取靶标蛋白的基因名称,借助David数据库进行基因通路功能富集分析京都基因和基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG),研究葛根芩连汤治疗2型糖尿病的作用机制及原理.结果:葛根芩连汤的核心化合物有槲皮素(quercetin),山柰酚(kaempferol),β-谷甾醇(beta-sitosteroll)等,核心靶标前列腺素G/H合成酶2 (prostaglandin G/H synthase 2)等;PPI网络图显示葛根芩连汤有效成分中关键蛋白主要有c-Jun氨基末端激酶(JUN),肿瘤坏死因子(TNF),fos蛋白(FOS),丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)等;KEGG结果表明葛根芩连汤主要作用与肿瘤坏死因子信号通路(TNF signaling pathway),丝裂原活化蛋白激酶信号通路(MAPK signaling pathway)等信号通路有关.结论:葛根芩连汤主要通过多种途径,多种信号通路作用于多种靶点发挥其药物功效,起到抗炎功效,治疗2型糖尿病的作用.
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中医药治疗肠道菌群失调症的方剂用药规律分析
目的:基于中医传承辅助系统软件,分析和总结1995-2016年中医药治疗肠道菌群失调症的用药规律,并根据用药规律对新方做出预测.方法:收集中国全文期刊数据库(CNKI)中治疗肠道菌群失调症有效的中医药方剂相关文献,运用中医传承辅助系统软件建立方剂数据库,对用药规律进行统计分析.结果:筛选治疗肠道菌群失调症的方剂148篇,分析得到治疗肠道菌群失调症的32味常用药物,7种常用药对用药模式,16个新方核心组合以及8个新处方.结论:分析显示治疗肠道菌群失调症的药物主要以补气健脾、渗湿利水类药物为常见.通过聚类分析得到的新方,与临床上治疗肠道菌群失调症常用方剂参苓白术散、补中益气汤和健脾渗湿汤等有相似的治疗作用,但同时又参以理气疏肝之药物,以达到舒达肝气、健补脾胃的作用.配伍组合符合补气健脾、渗湿止泻等临床主要治疗思路,有利于指导临床实践,为临床新药的开发和利用奠定的一定的基础.
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基于Illumina MiSeq高通量测序分析黄芪内生真菌的多样性
目的:分析黄芪内生真菌群落多样性,为筛选菌种进行发酵炮制转化黄芪中活性成分的定向炮制工艺研究提供参考依据.方法:应用Illumina MiSeq高通量测序技术测定黄芪内生真菌的18S rDNA NSl-Fung区域序列并进行物种丰度等生物信息分析.结果:获得有效序列29 677条,操作分类单元188个,测序数量接近于饱和,测序数据量合理.黄芪内生真菌主要分布于驼孢锈菌属(Hemileía),赤霉菌属(Cibberella),粪盘菌属(Ascobolus ),假裸囊菌属(Pseudogymnoascus)和曲霉属(Aspergillus)共5个属.结论:黄芪内生真菌群落多样性较低,hemileia和Gibberella是黄芪内生真菌的优势种群.
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基于DNA条形码技术的知母种子基原鉴定
目的:建立基于中药材DNA条形码技术的知母种子基原鉴定方法,保障知母种子基原的真实性.方法:收集知母的30份基原植物样品和9份生药材样品,获取其参考DNA条形码序列,采用克隆测序方法验证参考序列的准确性.收集51份待检测知母种子样品,获取其DNA条形码序列,基于BLAST法、遗传距离法和邻接(NJ)系统发育树法进行物种鉴定.结果:对于基原植物和生药材样品,由于基因组内存在异质性,核糖体DNA第2内部转录间隔区(ITS2)序列无法稳定获得,但可成功获得psbA-trnH序列.知母序列分为6个单倍型,有3个变异位点,2处插入/缺失,种内变异大值0.003 5,种间变异小值0.1,在NJ系统发育树上聚为独立的支.共获得153条知母种子的psbA-trnH序列,经BLAST法、遗传距离法和NJ系统发育树法鉴定均为百合科植物知母Anemarrhena asphodeloides.结论:psbA-trnH是知母种子鉴定的适合条形码序列,可用于知母种子的真实性鉴定.所收集51份知母种子样品的基原均符合2015年版《中国药典》(一部)相关项下规定,未发现伪品.
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丹参SmCPS1基因启动子区甲基化特征分析及其与SmCPS1组织差异性表达的关系
目的:分析不同组织中丹参(Salvia miltiorrhiza)柯巴基焦磷酸合酶1基因(SmCPS1)启动子区甲基化分布特征及其与SmCPS1组织差异性表达的关系.方法:采用重亚硫酸盐转化法检测不同组织中SmCPS1启动子区-1 021 bp (转录起始位点+1)内的甲基化率;实时荧光定量聚合酶链式反应Real-time PCR检测不同组织中SmCPS1表达量.结果:SmCPS1启动子区甲基化主要集中在转录起始位点上游-750 ～ -500 bp, -450 bp以内的启动子区几乎无甲基化.300个甲基化检测位点中,组织差异性甲基化位点共72个,占总检测甲基化位点数的发生甲基化的转录因子结合区域共18个,其中有10个区域的甲基化存在组织差异.与SmCPS1表达量显著相关(P＜0.01)者21个,其中7个负相关者集中在-632 ～ -450 bp,14个正相关者分布在-632 bp之外及-450 bp以内的启动子区.结论:SmCPS1启动子区甲基化差异可能是影响其组织差异性表达的原因.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
