中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位： 国家中医药管理局
- 主办单位： 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子： 1.62
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-9903
- 国内刊号： 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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夏枯草硫酸多糖对CCl4致大鼠肝纤维化及TGF-β1诱导的大鼠肝星状细胞活化的影响
目的:观察夏枯草硫酸多糖(PSSP)对四氯化碳(CCl4)所致的大鼠肝纤维化及转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导活化大鼠肝星状细胞-T6(HSC-T6)的影响,从而初步探讨PSSP抗纤维化的机制.方法:采用CCl4-橄榄油溶液腹腔注射诱导大鼠肝纤维化造模,随机分为5组,分别为正常组,模型组,秋水仙碱组(0.25 mg·kg-1),PSSP高剂量组(300 mg· kg-1)和PSSP低剂量组(100 mg· kg-1).分别测定各组大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(AST),层粘连蛋白(LN),透明质酸(HA),Ⅲ型前胶原(PCⅢ)和Ⅳ胶原(C-Ⅳ)的含量;采用苏木素-伊红(HE)及天狼猩红染色观察大鼠肝组织病理学改变;体外培养HSC-T6细胞;采用细胞增殖与活性法(CCK-8)测定PSSP对TGF-β1诱导的HSC-T6细胞增殖的影响;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HSC-T6细胞中Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ),α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) mRNA和蛋白的表达.结果:与模型组比较,PSSP可明显降低大鼠ALT,AST,HA,LN,PC-Ⅲ和C-Ⅳ的含量,并减轻大鼠肝纤维化程度(P＜0.01);PSSP可抑制TGF-β1诱导的HSC-T6细胞的增殖,减少HSC-T6细胞Col-Ⅰ,α-SMA mRNA和蛋白的相对表达量(P＜0.01).结论:PSSP具有很好的抗纤维化作用,其机制可能与抑制肝星状细胞活化及抑制胶原合成与沉积,减少细胞外基质(ECM)的生成并促进其降解有关.
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甘草附子汤对佐剂性关节炎小鼠的治疗作用
目的:研究甘草附子汤对佐剂性关节炎(AA)小鼠的作用研究.方法:雄性Balb/c小鼠随机分为6组,为正常组、模型组、雷公藤多苷组、甘草附子汤高、中、低剂量组(3.9,7.8,15.6 g·kg-1),每组12只.除正常组外,采用AA小鼠模型,造模第12天,灌胃给予相应药物,1次/d,连续18d,观察药物对AA小鼠足肿胀的影响;苏木素-伊红(HE)染色观察踝关节组织病理学改变;通过酶联免疫吸附法(ELISA)检测AA小鼠血清中的细胞因子白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TN F-α)的水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测滑膜组织基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶-3(MMP-3)蛋白表达.结果:与模型组比较,甘草附子汤可抑制AA小鼠足肿胀,改变炎细胞浸润,减轻滑膜增生和骨侵蚀,减少AA小鼠血清中炎症因子TNF-α,IL-1 β和IL-6水平(P＜0.05),降低AA小鼠滑膜中MMP-1和MMP-3蛋白表达(P＜0.05).结论:甘草附子汤AA小鼠具有明显治疗作用,其机制可能与降低炎症因子的产生和降低滑膜组织的MMP-1及MMP-3表达有关.
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基于Nrf2/ARE信号通路探讨清热化瘀方对大鼠脑缺血再灌注损伤氧化应激反应的影响
目的:从核转录因子E2相关因子2/抗氧化反应元件(Nrf2/ARE)信号通路探讨清热化瘀方对脑缺血再灌注损伤大鼠氧化应激的影响及可能的作用机制.方法:采用Longa线栓法制备局灶性脑缺血再灌注大鼠(MCAO)模型,将160只SD大鼠随机分为4组,分别为假手术组(SO),模型组(MCAO),清开灵组(QKL),清热化瘀方组(QRHY).每组大鼠40只,根据取材时间点12h,1d,2d,3d可以分为每组分为4个亚组,每个亚组10只大鼠.分别采用氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测量脑梗死体积,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和免疫组化检测Nrf2/ARE信号通路蛋白Nrf2和血红素加氧酶1 (HO-1) mRNA及其蛋白表达变化.结果:与SO组比较,大鼠脑缺血再灌注后1d,MCAO组梗死体积显著升高(P＜0.01),QKL组较MCAO组梗死体积明显减小(P＜0.05);QRHY组脑梗死体积较QKL组进一步缩小(P ＜0.05);MCAO组Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达均于缺血再灌注后12 h开始明显上升,24 h达高峰(P ＜0.05,P＜0.01),随再灌注时间延长其表达逐渐下降,但仍保持较高表达水平(P ＜0.05);QKL组较MCAO组Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达明显升高(P＜0.05),QRHY组较QKL组进一步升高Nrf2和HO-1 mRNA及其蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:清热化瘀方治疗脑缺血再灌注损伤可能通过激活Nrf2/ARE信号通路而降低细胞氧化损伤的程度,从而达到保护神经元的作用.
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强心活力方对阿霉素引起心脏毒性的保护作用
目的:研究强心活力方对抗肿瘤药物阿霉素(ADR)化疗后心脏毒性作用的干预.方法:96只健康Wistar大鼠随机分为6组,正常组,ADR模型组(16 mg·kg-1),参附组(3g·kg-1),强心活力方高、中、低剂量(3.6,1.8,0.9 g·kg-1)组.观察各组大鼠的精神状态、进食、粪便及皮毛情况.末次灌胃给药24 h后,检测大鼠血浆脑钠肽(BNP)水平、心电图、全心质量指数(HW/BW),苏木精-伊红(HE)染色,马松(Masson)染色和透射电镜(TEM)观察心肌形态学和超微结构改变.结果:与正常组大鼠比较,ADR模型组大鼠精神状态差,体质量减轻,心电图异常改变严重,血浆BNP及HW/BW升高明显(P ＜0.05,P＜0.01),光镜及电镜观察发现心肌及超微结构损伤严重.而强心活力方对大鼠一般状态及体质量改善明显,并可降低血浆BNP含量和全心质量指数,扭转异常心电,抑制心肌纤维化、细胞水肿及超微结构异常改变,尤以强心活力方高剂量组作用明显,与ADR组比较有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01).结论:强心活力方对阿霉素所致的大鼠心脏毒性具有保护作用.
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桂枝汤含药血清对不同比例Poly(I∶C)-LPS组合刺激肺巨噬细胞的干预效应
目的:基于方证相应原理,旨在探索建立一种模拟病毒-细菌共感染的桂枝汤汤证体外细胞模型,为进一步桂枝汤汤证动物模型的建立积累数据.方法:研究桂枝汤含药血清对不同浓度比例的聚肌胞苷酸[polyinosinic polycytidylic acid,Poly(I∶C)]与脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)混合物刺激的大鼠肺的巨噬细胞(NR8383) Toll样受体(Toll-like receptors,TLRs)及其下游信号转导通路的影响.采用大鼠肺巨噬细胞株NR8383,分别用25,50,100 mg· L-1的Poly(I∶C)与1,5,10 mg·L-1 LPS刺激NR8383细胞,前者于3,6,12,24 h后取细胞上清,后者于6,12,24,48 h后取细胞培养上清液,酶联免疫吸附测定方法(ELISA)测定炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,通过上述2个指标选择Poly(I∶C)与LPS合适的浓度区间与反应的适时间.利用其Poly与LPS配比为10∶1,20∶1,30∶1,40∶1,50∶1来探讨其对NR8383细胞的TNF-α,IL-1β的含量和TLR-2,3,4,6 mRNA表达的影响,以及桂枝汤含药血清的干预作用,通过上述TNF-α,IL-1β,TLR-2,TLR-3,TLR4,TLR-6 6个指标对实验结果进行综合评价,筛选刺激效应和桂枝汤干预效应为明显的Poly(I∶C)-LPS比例.结果:选择刺激时间为6h,Poly(I∶C)在50 mg·L-1以下,LPS在1 mg·L-1时作为合适的刺激浓度.在所用Poly(I∶C)-LPS(10∶1,20∶1,30∶1,40∶1,50∶1)中,与正常组比较,Poly(I∶C)-LPS 50∶1组合刺激效应显著(P＜0.01),与相对应的模型组比较,桂枝汤含药血清对Poly(I∶C)-LPS 10∶1组合干预效果为显著(P＜0.01).结论:Poly(I∶C)-LPS 10∶1刺激NR8383巨噬细胞株NR8383可以作为一种桂枝汤汤证细胞模型,用于桂枝汤及其类方的基础研究.
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芳香新塔花总黄酮对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制
目的:探讨芳香新塔花总黄酮(Ziziphora clinopodioides flavonoids,ZCF)对大鼠心肌缺血再灌注损伤中氧自由基、一氧化氮(NO)和细胞凋亡的影响及其机制.方法:60只大鼠随机分为假手术组,缺血再灌注模型组,复方丹参滴丸组(130 mg·kg-1),ZCF低、中、高剂量组(75,150,300 mg· kg-1).通过结扎大鼠心脏冠状动脉左前降支30 min,再灌注3h建立缺血再灌注损伤模型,测定大鼠血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB),乳酸脱氢酶(LDH),超氧化物歧化酶(SOD),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),丙二醛(MDA),NO和一氧化氮合酶(NOS)等相关指标的变化.2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法评价心肌梗死程度,苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠心肌组织病理学改变,原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测细胞凋亡.实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA的表达.结果:与假手术组比较,模型组大鼠血清中CK-MB,LDH,MDA的含量显著升高,SOD,GSH-Px,NO和NOS的活性显著降低,心肌梗死程度严重,出现明显的细胞凋亡,显著下调Bcl-2 mRNA表达,上调Bax mRNA表达(P＜0.01).与模型组比较,ZCF给药组能明显降低大鼠血清中CK-MB,LDH,MDA的含量,提高SOD,GSH-Px,NO和NOS的活性,同时可降低心肌梗死面积,改善缺血心肌的病理变化,抑制细胞凋亡,显著上调Bcl-2 mRNA表达,下调Bax mRNA表达,提高Bcl-2/Bax水平(P＜0.05,P＜0.01).结论:ZCF可减轻大鼠缺血心肌的损伤作用,其机制可能与减少氧自由基的产生,促进NO合成,上调Bcl-2mRNA的表达,下调Bax mRNA的表达,抑制细胞凋亡有关.
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半夏泻心汤人含药血清对HP感染GES-1细胞TGF-β/Smad信号通路的影响
目的:探讨半夏泻心汤人含药血清对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,HP)感染人胃黏膜上皮GES-1细胞转化生长因子-β(TGF-β)/信号转导蛋白(Smad)信号通路的影响,以揭示该方治疗消化性溃疡可能的作用机制.方法:GES-1细胞分为空白组,HP感染模型组,健康人血清组,雷贝拉唑血清组,用药前血清组,10％半夏泻心汤血清组,20％半夏泻心汤血清组.除空白组外,其余各组均接种HP造成幽门螺杆菌感染模型,采用雷贝拉唑、半夏泻心汤含药血清及用药前、健康人血清进行干预,24 h后收集细胞及其上清液,噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测Smad2/3,Smad7,TGF-β1及磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3),磷酸化Smad7(p-Smad7)蛋白的表达.结果:与空白组比较,HP可明显抑制GES-1细胞的增殖,降低GES-1细胞内Smad2/3,TGF-β1及p-Smad2/3蛋白表达,增加Smad7及p-Smad7蛋白表达(P ＜0.05,P＜0.01);与HP感染模型组比较,雷贝拉唑血清组及10％,20％半夏泻心汤血清组可明显降低HP对GES-1细胞增殖的抑制,增加GES-1细胞内Smad2/3,TGF-β1,p-Smad2/3蛋白表达,并明显降低Smad7,p-Smad7蛋白表达(P ＜0.05,P＜0.01);与用药前血清组比较,加入雷贝拉唑、半夏泻心汤含药血清后均可降低HP对GES-1细胞增殖的抑制,其中雷贝拉唑血清组及20％半夏泻心汤血清组可增加GES-1细胞内Smad2/3,TGF-β1,p-Smad2/3蛋白表达,降低Smad7,p-Smad7蛋白表达(P＜0.05,P＜0.01).结论:半夏泻心汤能够减轻HP诱导GES-1细胞的损伤,促进GES-1细胞增殖,治疗HP相关性消化性溃疡,提高溃疡愈合质量,其机制可能与其调控TGF-β/Smad信号通路有关.
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槲皮素自微乳的抗肿瘤作用及其机制分析
目的:研究槲皮素自微乳(quercetin self-nanoemulsifying drug delivery system,Q-SNEDDS)抑制小鼠肉瘤细胞S180的分子机制.方法:制备槲皮素自微乳和空白自微乳,对其粒径和Zeta电位分别进行检测.体内实验分6组:空白组、环磷酰胺(20 mg·kg-1)组、槲皮素自微乳高、中、低剂量(50,25,12.5 mg·kg-1)组、槲皮素组(50 mg· kg-1).采用肿瘤细胞移植法建立S180移植瘤模型,用药10 d后,检测各组抑瘤率、肝指数、脾指数和胸腺指数等指标;采用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测各组S180细胞的B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),蛋白激酶B(Akt) mRNA表达的情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞Bax,Bcl-2,Akt,磷酸化-Akt(p-Akt)的蛋白表达.结果:与空白组比较,槲皮素自微乳、环磷酰胺及槲皮素组均能抑制肿瘤细胞生长,槲皮素自微乳组抑瘤率高于槲皮素组(P＜0.05);环磷酰胺组脏器指数低于空白组(P＜0.05),槲皮素自微乳组脏器指数高于环磷酰胺组(P＜0.05).与空白组比较,槲皮素自微乳上调S180细胞BaxmRNA和蛋白表达(P＜0.05),下调S180细胞Bcl-2 mRNA和蛋白的表达(P＜0.05),对Akt蛋白表达影响不明显,但是可以下调Akt mRNA和p-Akt蛋白的表达(P＜0.05).结论:槲皮素自微乳具有体内抑制S180细胞的作用,槲皮素自微乳抑瘤作用高于槲皮素组.槲皮素自微乳可能通过抑制Akt信号通路,发挥其抗肿瘤的作用.
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二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病细支气管壁细胞外基质重塑的影响
目的:观察二陈汤加味对慢性阻塞性肺疾病(COPD)模型大鼠细支气管结构重塑的作用及其机制.方法:50只SD大鼠随机分为正常组、模型组、二陈汤加味低、中、高剂量组(5,10,20 g·kg-1),共5组,每组10只.以香烟烟熏加内毒素脂多糖(LPS)制备大鼠COPD模型.造模成功后,各观察组灌胃给药,检测肺功能,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肺组织中基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinases,MMP-1),MMP-9及金属蛋白酶组织抑制剂-1(tissueinhibitor of metalloproteinase,TIMP-1) mRNA表达,免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测MMP-1,MMP-9,TIMP-1以及Ⅰ型和Ⅲ型胶原在细支气管中的表达.结果:与正常组比较,模型组肺组织匀浆MMP-1,MMP-9,TIMP-1 mRNA表达均显著增强(P＜0.01),细支气管壁MMP-1,MMP-9,TIMP-1,Ⅰ型及Ⅲ型胶原蛋白的表达均显著增强(P＜0.05).与模型组比较,中、高剂量组肺组织匀浆MMP-1,MMP-9,TIMP-1 mRNA表达显著减弱(P＜0.01),细支气管壁中、高剂量组Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白的表达明显减弱(P＜0.05).结论:二陈汤加味对细支气管管壁细胞外基质(extracellular matrix,ECM)中的胶原有抑制作用.其机制可能与抑制MMP-1,MMP-9,并协调性抑制TIMP-1的表达,阻止细支气管ECM胶原的沉积有关.
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叶下珠复方Ⅱ号对肝癌细胞增殖和胰岛素样生长因子-1受体信号通路转录的作用
目的:观察叶下珠复方Ⅱ号(CPUⅡ)对肝癌Huh7细胞增殖以及叶下珠复方Ⅱ号对胰岛素样生长因子-1受体(IGF-1R)信号通路转录的影响,探讨叶下珠复方Ⅱ号抗肝癌作用机制.方法:采用小分子干扰RNA技术(siRNA)转染肝癌Huh7细胞,构建抑制IGF-1R的肝癌Huh7细胞(anti-IGF-1R Huh7),选择稳定表达的抑制IGF-1R的肝癌Huh7细胞,将肝癌Huh7细胞以及抑制IGF-1R的肝癌Huh7细胞分别分为4组:空白组,叶下珠复方Ⅱ号高、低质量浓度组(3.0,1.5 g·L-1)以及5-氟尿嘧啶(5-FU)组(0.03 g·L-1),采用噻唑蓝(MTT)比色法测定药物对各组细胞增殖的影响,通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)以及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测IGF-1R以及其下游相关指标mRNA及蛋白表达.结果:与空白组比较,转染(SASI_Hs01_00126196及SASI_Hs01_00126196_AS)序列肝癌Huh7 IGF-1R mRNA及蛋白表达量低,选择该细胞进行实验.MTT比色实验结果表明,与空白组比较,叶下珠复方Ⅱ号能够抑制Huh7细胞以及抑制IGF-1R的肝癌Huh7细胞增殖,并且siRNA抑制IGF-1R基因表达后,叶下珠复方Ⅱ号还能继续抑制Huh 7细胞增殖,且IGF-1R,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)和丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶3(Akt3) mRNA表达量进一步下降(P＜0.05).结论:叶下珠复方Ⅱ号能够抑制Huh7细胞增殖,作用机制可能是抑制IGF-1R及其下游mRNA转录有关.
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人参多糖对LPS诱导小鼠巨噬细胞炎症因子生成的抑制作用及其机制
目的:研究人参多糖对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞RAW264.7炎症反应的抑制作用及机制.方法:细胞以2×104个/mL的密度接种于6孔培养板,将细胞分为空白组,LPS组,LPS+地塞米松组,LPS加人参多糖组(质量浓度分别为31.25,62.6,125,250,500 mg·L-1).用LPS(1 mg·L-1)刺激生长良好的RAW264.7细胞24 h建立体外细胞炎症模型,Griess试剂法检测—氧化氮(NO)含量,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(TN F-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测—氧化氮(NO),TNF-α和IL-6 mRNA的表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞K基因结合核因子抗体核转录因子-κB(NF-κB) p65蛋白的表达.结果:与空白组比较,LPS模型组细胞因子NO,TNF-α,IL-6表达量显著升高(P＜0.01),炎症模型建立成功.给予人参多糖干预后,与LPS组比较,31.25 ～500 mg·L-1的人参多糖可以明显降低LPS诱导的RAW264.7细胞释放炎症因子NO,TNF-α和IL-6水平(P＜0.05,P＜0.01),抑制iNOS,TNF-α和IL-6 mRNA的转录(P＜0.05,P＜0.01),与LPS组比较,125 ～ 500μmol·L-可以显著抑制细胞核内NF-KB p65的表达(P ＜0.05,P＜0.01).结论:人参多糖能明显抑制巨噬细胞炎症因子NO,TNF-α和IL-6过度表达,从而抑制炎症反应,其机制可能与抑制相关炎症因子和mRNA的表达和抑制NF-κB信号通路相关.
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白及化学成分分离鉴定
目的:基于白及提取物具有广泛的生物活性,本研究对白及95％乙醇提取物乙酸乙酯部位的化学成分进行研究,为白及的质量控制和开发利用提供一定的理论依据.方法:采用反复硅胶LH-20羟丙基葡聚糖(Sephadex LH-20)凝胶、制备薄层色谱、制备高效液相色谱等多种方法对白及的乙酸乙酯部位进行分离纯化,应用TLC,HPLC跟踪监测,分离得到纯度较高的单体化合物.根据理化性质及质谱(MS),1H-NMR和”C-NMR等波谱数据鉴定化合物结构.结果:从白及的乙酸乙酯萃取部位分离得到12个化合物,分别鉴定为大黄素甲醚(1),红灰青素(2),8-C-对羟基苄基山柰酚(3),N-苯甲酰-L-苯丙氨酸-N-苯甲酰-L-苯丙氨酸酯(4),松脂醇(5),(E)-4'''-羟基苯乙基3-(4′-羟基苯基)丙烯酸酯(6),对甲氧基二氢肉桂酸(7),对羟基苯甲醛(8),对羟基苯甲酸(9),香草酸(10),邻苯二甲酸二丁酯(11),棕榈酸乙酯(12).化合物类型包括蒽醌类(1和2),黄酮类(3),氨基酸衍生物(4),木脂素(5),苯丙素(6和7),以及其他小分子芳香族化合物(8～11)和脂肪族(12).结论:化合物2,3,4,6,7,11和12均为首次从白及植物中分离得到.
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狗牙根全草的化学成分分离鉴定
目的:研究狗牙根Cynodon dactylon全草的化学成分,丰富狗牙根的化学成分,为狗牙根后续深入研究奠定基础.方法:取狗牙根的干燥全草(20 kg),用95％乙醇加热回流提取3次,合并提取液通过减压浓缩成浸膏.将浸膏用水溶解分散,依次用石油醚,乙酸乙酯,正丁醇3种不同极性的溶剂萃取,减压回收溶剂,得石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水4个不同极性部分的浸膏.采用各种分离技术(包括正向硅胶,反向RP-18,反向小孔树脂(MCI)柱色谱,LH-20羟醛葡聚糖凝胶(sexphadex LH-20),制备薄层色谱和制备HPLC等),对狗牙根乙酸乙酯萃取部位的化学成分进行分离纯化,根据理化性质和波谱分析(1D和2D NMR,UV,MS,CD,ORD)对分离得到的化合物进行结构鉴定.结果:从狗牙根95％乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位中得到8个化合物,分别鉴定为7-oxoarctigenin(1),香草乙酮(2),对羟基苯甲酸(3),(4-hydroxy-3,5-diethoxyphenyl)(3-hydroxy-4-methoxy-phenyl)methanone(4),邻羟基苯甲酸(5),丁香脂素(6),(5S,6S)-5,6-dihydro-3,8,10-trihydroxy-5-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-6-hydroxymethyl-2,4-dimethoxy-7H-benzo[c]xanthen-7-one(7),木犀草素(8).结论:该研究从狗牙根全草中分离得到的化合物1～8均为首次从该属植物中分离得到.
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基于多元统计分析的鹿茸品质评价
目的:采用多元统计分析技术,探讨不同品种不同规格鹿茸的质量评价方法.方法:采用高效液相色谱法测定17种氨基酸、核苷组分、磷脂组分、胆固醇及多胺的含量;采用紫外分光光度法测定水溶性蛋白质及总磷脂含量;以测定的这些营养成分含量作为分析数据源,采用SPSS 19.0统计软件进行方差分析和聚类分析.结果:方差分析表明,不同规格及不同品种鹿茸之间氨基酸总量、总磷脂、磷脂组分、多胺无显著差异(P＜0.05),马鹿三岔中必需氨基酸的含量显著低于马鹿其他规格及梅花鹿所有样品的含量(P＜0.05),梅花鹿二杠侧枝二茬中核苷含量高于马鹿及梅花鹿二杠主枝头茬、三岔头茬,有显著性差异(P＜0.05),马鹿四岔中水溶性蛋白含量与其他规格马鹿、梅花鹿二杠主侧枝头茬及三茬有显著性差异(P＜0.05),马鹿单门及四岔胆固醇含量与梅花鹿二杠侧枝二茬、三岔有显著性差异(P＜0.05);聚类分析不能将马鹿茸和梅花鹿茸分为两大类,有交叉聚类现象,评价指标不同,聚类分析结果也不同.结论:应用方差分析技术及聚类分析法评价鹿茸的质量,具有可靠性,为鹿茸的开发和应用提供了重要的依据.
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金边土鳖HPLC指纹图谱及氨基酸含量测定
目的:建立金边土鳖氨基酸HPLC指纹图谱分析方法,并同时定量分析了6种氨基酸成分,为制订金边土鳖的质量标准提供参考.方法:采用异硫氰酸苯酯(PITC)-高效液相色谱(HPLC)柱前衍生化法,以Waters XBridge C18(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱;流动相A为0.1 mol·L-1乙酸钠(pH 6.5)-乙腈(95∶5),B为乙腈-水(4∶1);检测波长254 nm;流速0.8 mL·min-梯度洗脱;柱温40℃.采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)”和SPSS 22.0软件分别对其进行相似度评价和聚类分析.结果:初步建立了金边土鳖游离氨基酸HPLC指纹图谱共有模式,确定了21个共有峰,并指认了13种氨基酸成分;综合14批金边土鳖相似度分析、聚类分析和定量分析,结果显示相似度分析和聚类分析基本一致,且发现精氨酸含量的高低可能与产地有一定的关系.结论:建立了金边土鳖HPLC指纹图谱分析方法,可较全面反映该药材中氨基酸成分的信息,为金边土鳖药材鉴定和质量标准的制订提供参考.
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娑罗子药材HPLC指纹图谱的建立及其在药材鉴定中的应用
目的:建立娑罗子药材的高效液相色谱指纹图谱分析方法,检测不同产地娑罗子药材的化学成分,并进行聚类分析,为娑罗子药材的真伪鉴别和质量研究提供依据.方法:采用Agilent ZORBAX SB-C1s色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2％磷酸水溶液,梯度洗脱;流速1.0 mL· min-1,检测波长220 nm,柱温30℃,进样量为10 μL;采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A)”,对采集的36批娑罗子药材进行指纹图谱分析及相似度评价,并结合药材性状特征探讨品种鉴别方法;运用SPSS 19.0统计学软件对36批药材进行聚类分析.结果:建立了36批不同产地七叶树属植物药材的化学成分指纹图谱,相似度为0.657 ～0.994;将药材分为4大类,其中包括天师栗、七叶树、浙江七叶树以及混淆品种云南七叶树,用对照品指认了2个主要化学成分,分别为七叶皂苷A和七叶皂苷B;聚类分析将36批药材分为4类,与相似度分类结果完全一致.结论:该研究建立了娑罗子药材的HPLC指纹图谱分析方法,为其进一步质量研究提供理论依据.
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参附注射液联合痰热清注射液对老年晚期肺癌脾虚痰湿证化疗的减毒增效作用
目的:研究参附注射液联合痰热清注射液益气温阳、化痰解毒改善老年Ⅳ期表皮生长因子受体(EGFR)野生型非小细胞肺癌患者经多西他赛化疗后的减毒增效作用.方法:符合条件的64例患者分为对照组(采用多西他赛单药化疗方案)和治疗组(在对照组基础上加用益气温阳化痰解毒的中医方案),各32例.两组患者均在每周期d1静脉滴注多西他赛注射液75 mg·m-2,治疗组在此基础上,加用中医方案(益气温阳、化痰解毒),即参附注射液60～ 80 mL加入5％葡糖糖注射液250 mL中静脉滴注,1次/d(qd),痰热清注射液20～ 30 mL加入5％葡糖糖注射液250 mL中静脉滴注,qd,治疗10d.每21 d为1个周期,治疗2周期后分别对两组患者进行中医证候,免疫功能,Ⅲ～Ⅳ度骨髓抑制及安全性评价.结果:治疗后,治疗组乏力少气、咯血、咳嗽、咳痰、胸痛、胸闷等中医证候改善情况优于对照组(P＜0.05).治疗组治疗后外周血CD3+,CD4+,白细胞介素(IL)-27高于对照组(P＜0.05),CD8+,细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(sCTLA-4)水平低于对照组(P＜0.05).与对照组治疗后相比,治疗组的Ⅲ/Ⅳ度血液学毒性降低(P＜0.05).结论:益气温阳、化痰解毒的参附注射液联合痰热清注射液能改善晚期老年非小细胞肺癌的中医证候,增加化疗后患者的免疫功能,减轻血液学毒性,安全性高,具有减毒增效的作用,值得临床推广应用.
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消斑饮加减治疗面部激素依赖性皮炎的疗效及对Th1/Th2细胞水平的影响
目的:探讨消斑饮加减治疗面部激素依赖性皮炎(HDD)的疗效及对辅助性T细胞免疫炎症和皮肤屏障功能的影响.方法:将119例HDD患者采用分层区组,随机按数字表法分为对照组59例和观察组60例.对照组口服氯雷他定片,10 mg/次,1次/d;和硫酸羟氯喹片,0.2g/次,2次/d.观察组在对照组治疗的基础上加服消斑饮加减,1剂/d.两组疗程均为连续治疗8周.记录治疗前后主观症状和客观皮损症状评分;进行治疗前后皮肤屏障功能检测;检测治疗前后干扰素-γ(IFN-γ),白细胞介素-2(IL-2),IL-4,IL-6,IL-10,IL-1,IL-13和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;进行治疗前后皮肤病生活质量指数(DLQI)评价.结果:观察组临床疗效总有效率为93.33％,高于对照组的79.66％(x2=4.778,P＜0.05);观察组患者症状积分低于对照组(P＜0.01);观察组患者的角质层含水量和皮脂含量均高于对照组,经皮水分丢失少于对照组(P＜0.01);观察组血清IFN-γ,IL-2水平均高于对照组,IL-4,IL-6,IL-10水平均低于对照组(P＜0.01);观察组血清IL-1,IL-13和TNF-α水平均低于对照组(P＜0.01);观察组患者的DLQI量表各维度评分及总分均低于对照组(P＜0.01).结论:消斑饮加减在西医治疗的基础上,可明显缓解HDD症状,提高临床疗效和生活质量,并具有调节Th1/Th2细胞因子,减轻炎症损伤,促进皮肤屏障功能修复的作用.
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丹芪益肾方对糖尿病肾病气阴两虚夹瘀证患者血管内皮功能和尿胰岛素样生长因子的影响
目的:观察丹芪益肾方对气阴两虚夹瘀型糖尿病肾病(DN)患者的疗效及对血清凝血酶调节蛋白(TM),血管性假性血友病因子(vWF),内皮素(ET)及尿中胰岛素样生长因子(IGF)-1和IGF-2水平的影响.方法:筛选收治的DN患者150例,按数字表法随机分为对照组和治疗组各75例.两组患者参照《糖尿病肾病防治专家共识(2014年版)》给予常规治疗.对照组采用还原型谷胱甘肽静脉滴注,1次/d.治疗组注射西药同对照组,并加服丹芪益肾方,1剂/d,常规水煎煮2次内服.两组患者均连续治疗3个月.比较两组患者血糖和血脂水平、气阴两虚夹瘀证症状评分、肾功能及临床疗效.检测两组患者血清凝血酶调节蛋白(TM),血管性假性血友病因子(vWF),内皮素(ET)及尿中胰岛素样生长因子(IGF)-1和IGF-2水平.结果:治疗后,治疗组患者空腹血糖(FPG),餐后2h血糖(PPG),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)水平及气阴两虚夹瘀证症状评分均明显低于对照组(P＜0.01).治疗后,治疗组患者的肾功能指标血清肌酐(SCr),血尿素氮(BUN),24 h尿总蛋白,24 h尿清蛋白及尿β2微球蛋白(β2-MG)水平均明显低于对照组(P＜0.01).治疗组患者临床总有效率为88％,优于对照组有效率73.33％ (P ＜0.05).治疗后,治疗组患者血清TM,vWF,ET水平及尿中IGF-1,IGF-2水平均明显低于对照组(P＜0.01).结论:丹芪益肾方配合还原型谷胱甘肽静脉滴注治疗糖尿病肾病,可促进气阴两虚夹瘀证症状及肾功能的改善,提高临床疗效,且可调节患者体内血清和肾功能指标水平,其机制可能是通过抑制TM,vWF,ET,IGF-1和IGF-2释放有关.
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肿瘤细胞诱导的血小板聚集在肿瘤转移中的作用及鸡血藤治疗的应用展望
肿瘤转移是肿瘤患者的首要死因.抗转移治疗药物匮乏是肿瘤治疗的瓶颈问题.研究表明,肿瘤细胞诱导的血小板聚集(TCIPA)是肿瘤-血小板相互作用的基础,其密切调节着肿瘤血行转移的各个进程,具有平衡双向调控的特色:一方面,肿瘤能够诱导血小板向其聚集从而保护肿瘤细胞的生存以及免疫逃逸;另一方面,激活的血小板反向促进着肿瘤细胞的血行运输及远隔转移灶的形成等过程.鸡血藤为一味经典的活血化瘀中药,多部中医药古籍中都记载了其具有显著的“去瘀血、生新血”等作用,且该药物大多作用于血液,以改善血凝状态为特征.近年来,有更多的报道研究发现其可通过调节血液微环境,发挥抗肿瘤转移的药效作用.在此背景下,本综述总结归纳了血小板-肿瘤相互作用的病理特点和调控机制,并探讨了以鸡血藤为代表的活血化瘀中药在抗TCIPA治疗中的潜在价值,旨在引起人们对这一治疗思路的高度重视,对TCIPA研究进展形成体系化的认识,并对未来抗肿瘤药物研发提供策略和方向.
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三七皂苷合成及调控机制的研究进展
三七是我国传统的名贵药材,在活血祛瘀、通脉活络、改善心肌缺血等方面具有重要的临床效果.三七主要活性成分为三七皂苷,包括人参皂苷Rb1,人参皂苷Rg1和三七皂苷R1,均属于达玛烷型四环三萜化合物.本文对三七皂苷的生物合成途径及分子调控机制的新研究进行了分析、整理和归纳,基于其他植物的研究结果,认为达玛烷型四环三萜皂苷主要通过乙酸/甲羟戊酸途径合成,包括异戊烯基焦磷酸、二甲基烯丙基焦磷酸的合成,2,3-氧化鲨烯的合成及环化、羟基化、糖基修饰等过程,涉及鲨烯合成酶、法呢基焦磷酸合成酶、鲨烯环氧酶、达玛烯二醇合成酶、糖基转移酶等关键合成酶,分析了关键合成酶的作用、表达特性、不同物种来源关键酶氨基酸序列的同源性及其对皂苷积累的影响;同时分析了三七皂苷对重金属、植物激素、内生真菌、温度、营养因子等环境因素刺激的响应方面,二者之间关系复杂,但皂苷类成分含量与各因子在一定范围或特定因子刺激下呈正相关.目前,相关研究主要集中在各个独立的关键酶基因的表达特性和对外界因子的响应,对于具体的催化过程、结构修饰和转录水平的调控仍处于初级阶段,缺乏系统性和完整性的认知.
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镇肝熄风汤治疗原发性高血压的临床及机制研究进展
对近年来镇肝熄风汤治疗原发性高血压的临床应用及机制研究进行综述.镇肝熄风汤为清代医家张锡纯治疗中风的经典名方,也是现今临床治疗原发性高血压的常用方.据《医学衷中参西录》记载镇肝熄风汤具有镇肝熄风,滋阴潜阳之功效,临床对阴虚阳亢型高血压有一定疗效.高血压的作用机制复杂,虽然用于治疗原发性高血压的药物种类繁多,但是现代西药存在作用靶点单一,不良反应多等问题,中药复方由于多靶点、多途径的治疗特点,在减轻高血压患者的不良反应及改善症状方面发挥着独特的优势.目前对镇肝熄风汤治疗高血压的研究较多,从中医临床实践到实验研究都取得了一定的进展,尤其是胃肠激素等新观点的提出,丰富了高血压机制学说,但是对其治疗原发性高血压作用途径、作用靶点的研究有待深入.基于此,通过收集整理近年来国内外镇肝熄风汤治疗原发性高血压的临床及作用机制的相关文献,发现镇肝熄风汤降压作用的机制主要涉及调节胃肠激素、改善血管内皮功能、改善血管重构、阻断肾素-血管紧张素-醛固酮(RAAS)系统、调控血脂、抑制交感神经活动、改善胰岛素抵抗、干预细胞膜离子通道等方面.基于镇肝熄风汤多途径、多靶点的降压作用,立足于原发性高血压的发病机制及病理生理变化,为中医药治疗原发性高血压提供新策略.
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天然产物抗肝纤维化作用及其机制研究进展
肝纤维化(liver fibrosis/hepatic fibrosis,LF/HF)是多数慢性肝病所共有的病理特征,其持续恶化会逐步发展形成肝硬化,终导致肝癌.目前临床用于治疗肝纤维化的药物种类众多,但西药靶点单一、不良反应多,中药大多作用机制、活性成分不明确,缺乏统一的诊疗标准.因此,寻找物质基础明确的抗肝纤维化有效药物至关重要.天然产物具有结构多样性、毒性较低、来源广泛等特点,在抗肝纤维化方面有着独特的优势和巨大的潜力.本文主要通过CNKI,Sciencedirect,百度学术等数据库对近年来国内外有抗肝纤维化作用的天然产物进行综述,归纳为生物碱类、多糖类、黄酮类、多肽类、萜类、多酚类,并总结其抗肝纤维化的作用机制,包括抑制肝脏炎症反应,抗脂质过氧化损伤,抑制肝星状细胞的活化和增殖,影响促纤维化因子的合成与分泌,调节细胞外基质合成与降解等,以期为抗肝纤维化药物的研制提供参考.
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款冬花不同炮制品的HPLC指纹图谱比较
目的:采用HPLC指纹图谱技术,综合运用相似度评价、聚类分析(CA)及主成分分析(PCA)对款冬花炮制前后化学成分变化进行研究.方法:采用HPLC-DAD建立10个产地款冬花不同炮制品的指纹图谱,流动相乙腈-0.03％三氟乙酸水溶液梯度洗脱,检测波长240 nm;运用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”(2004A版)软件,CA及PCA综合探索款冬花不同炮制品的质量及成分变化规律.结果:建立了不同炮制品的HPLC共有模式,款冬花生品、蜜炙品、甘草炙品指纹图谱的相似度分别为0.867 ～0.991,0.785～0.979,0.785 ～0.980.CA将不同炮制品均分为4类,与相似度评价结果基本一致,表明不同产地间款冬花炮制品具有一定的相似性和稳定性.PCA筛选出方差累计值达74.230％的2个主成分,并得到与之相关的成分群,不同产地炮制品的综合得分情况表明该成分群在生品、蜜炙品及甘草炙品中稳定存在.结论:指纹图谱技术结合相似度评价,CA,PCA能对款冬花炮制品的质量进行系统评价,可为其他中药炮制品的评价提供参考.
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黄芩提取物制备过程中化学成分及药效的变化规律分析
目的:分析黄芩提取物制备过程中化学成分及药效的动态变化规律,探寻确定合理提取工艺的研究思路.方法:根据2015年版《中国药典》收载的黄芩提取物制备工艺制备4个中间产物,分别记为水提物(样1),第1次酸沉产物(样2),醇沉精制后产物(样3)和第2次酸沉产物(样4),分别测定以上4个样品中各成分的含量及其解热、抗炎作用,采用灰色关联度分析和双变量相关分析考察成分与药效的相关性.结果:酸沉精制能明显提高黄芩提取物中5种黄酮类成分的含量,但醇沉精制对提高这5种黄酮类成分含量的作用不明显.样1对干酵母致大鼠发热试验的解热效应强,样2对二甲苯致小鼠耳肿胀和角叉菜胶致大鼠足肿胀的抑制作用明显,样3和样4的解热抗炎作用有所减弱,即进一步的纯化精制存在功效损失.黄芩苷与体温升高值、耳肿胀率和足肿胀率的灰色关联系数分别为0.78,0.81和0.70,双变量相关系数分别为0.957,0.848和0.819,均为5种成分中的大值,说明黄芩苷对药效的影响大;此外,除黄芩苷外,其他4种成分与体温升高值、耳及足肿胀率的双变量相关系数为负值(解热效应中的黄芩素除外),提示提高其他4种成分的含量有利于增强提取物的解热抗炎效果.结论:虽然黄芩苷对黄芩提取物药效的影响大,但也不是该成分含量越高越好,且增加除黄芩苷外的其他成分的含量有利于提高该提取物的整体解热抗炎效果.黄芩提取物解热抗炎作用是多种成分的综合效应,在确定制备工艺时应综合考虑多种成分对药效的影响,避免过度纯化造成功效损失.
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基于外翻肠囊模型分析玉簪花总黄酮提取物及其复合粒子的肠吸收特性
目的:考察玉簪花总黄酮提取物及其复合粒子中有效成分的肠吸收特性.方法:采用离体外翻肠囊模型,选择十二指肠、空肠、回肠、结肠为研究肠段,以表观渗透系数为评价参数,考察玉簪花总黄酮提取物及其复合粒子中有效成分山柰酚-3-O-槐糖苷和山柰酚-3-O-芸香糖苷在不同肠段、不同浓度下的肠吸收特性.结果:在不同药物质量浓度下,山柰酚-3-O-槐糖苷及山柰酚-3-O-芸香糖苷在各肠段均有吸收;在同一质量浓度条件下,二者均以空肠的肠吸收优.结论:玉簪花总黄酮复合粒子改变了山柰酚-3-O-槐糖苷及山柰酚-3-O-芸香糖苷的肠吸收特性,二者在结肠的吸收显著增加.玉簪花总黄酮复合粒子可显著提高该有效部位在结肠部位的吸收.
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基于Apriori算法与网络关联的大黄-甘草药对数据挖掘分析
目的:研究大黄-甘草药对的中医方剂用量、配比与方剂功效的关系.方法:从中医方剂数据库中检索组成含甘草、大黄的方剂共2 361首,利用计算机算法将方剂文本信息整理为表格形式,统计方剂中甘草和大黄的用药量、配伍比例及方剂功效,用Apriori算法及网络图对三者间关系进行挖掘分析.结果:大黄常用剂量在25.16～35.16 g,甘草常用剂量在0～5.16g,15.16 ～35.16 g;常用配伍比例为1/1,占总数的37.85％;方剂功效以止痛、清热、利水渗湿、消肿散结、解毒为主,且剂量、配比与功效存在相关关系.结论:应用Apriori算法及网络关联分析等数据分析方法可发现药对组成规律,为方剂配伍应用研究提供新的方法,为临床组方用药及新药研发提供理论依据.
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淫羊藿治疗股骨头坏死的分子机制分析
目的:基于网络药理学和生物信息学研究淫羊藿治疗股骨头坏死可能的分子机制.方法:通过中药系统药理学数据库和分析平台对淫羊藿可能的活性成分和靶点进行筛选和预测,针对TTD,DrugBank,OMIM,GAD,PharmGKB等数据库与股骨头坏死相关的作用靶点进行挖掘,结合生物信息学手段,明确淫羊藿防治股骨头坏死的特异性靶点,采用ClueGO进行信号通路富集分析,以进一步分析其可能的分子机制.结果:在中药系统药理学数据库和分析平台中共检索出与淫羊藿相关成分130个,根据口服生物利用度(OB)和药物相似性(DL)参数筛选获得入血活性成分23个,利用相关靶点预测技术预测可能的靶点102个;通过上述疾病基因相关数据库共检索到与股骨头坏死发生,发展密切相关的已知靶点72个.利用Cytoscape 软件构建活性成分及疾病的蛋白质-蛋白质相互作用关系网络图,合并网络图并行拓扑分析筛选出关键基因135个;采用ClueGO信号通路富集分析显示,淫羊藿作用于股骨头坏死的关键节点涉及的信号通路主要被富集在细胞增殖、细胞凋亡、炎症、应激及癌症相关等80条信号通路.结论:淫羊藿治疗股骨头坏死具有多成分,多靶点的特点;其主要通路不仅直接参与骨重建的细胞增殖、凋亡及分化,调节成骨、破骨代谢平衡,还通过调节免疫、炎症及应激反应等干预和影响骨微环境以达到控制疾病发生发展的目的,与目前治疗股骨头坏死的作用机制相符合.
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铁线蕨总黄酮提取物对哮喘模型大鼠血清代谢物的影响
目的:探讨铁线蕨总黄酮提取物(TXJF)对哮喘大鼠血清代谢物的影响.方法:在建立哮喘大鼠模型的基础上,哮喘模型大鼠灌胃给予TXJF,观测肺泡灌洗液(BALF)中白细胞总数及淋巴细胞(Ly),中性粒细胞(Neu),嗜酸性粒细胞(Eos)的百分比;检测肺组织病理变化;测定大鼠血清中免疫球蛋白E(IgE),白细胞介素-4(IL-4),IL-5的浓度.利用核磁共振氢谱技术(1H-NMR)检测,建立大鼠血清代谢物的指纹图谱,运用偏小二乘法-判别分析(PLS-DA)和正交偏小二乘法-辨别分析(OPLS-DA)观察各组血清中代谢产物的差异性.结果:与哮喘模型组比较,TXJF给药组BALF中白细胞总数及炎症细胞百分比均明显下降、肺组织病理情况有明显改善.TXJF高、中剂量组血清IgE,IL4,IL-5浓度较哮喘模型组明显下降.PLS-DA结果显示,哮喘模型组与正常组,TXJF给药组轮廓区分明显分开.与正常组比较,哮喘模型组血清中亮氨酸、糖蛋白、甘氨酸、丙氨酸等代谢产物含量均显著下降;乳酸、极低密度脂蛋白(VLDL)和丙酮等含量显著升高.TXJF高剂量组血清中的亮氨酸、丙氨酸、糖蛋白、甘氨酸等化合物含量较哮喘模型组均出现升高;丙酮、乳酸、不饱和脂肪酸及VLDL等化合物含量减少.结论:TXJF具有改善哮喘大鼠模型肺组织病理学变化,降低血清IgE,IL-4,IL-5浓度且能影响血清代谢物的作用;作用机制可能与其参与哮喘模型大鼠体内的氨基酸代谢、能量代谢、脂肪代谢和糖代谢等途径有关.
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辽宁省白头翁属植物分类与基于ITS2的DNA条形码分子鉴定
目的:进一步总结辽宁省白头翁属植物种类,为合理开发保护白头翁属植物资源提供依据.方法:从植物形态、花粉粒、基于内转录间隔区(ITS2)序列的DNA条形码分子鉴定三方面对辽宁省白头翁属植物进行分类与鉴定研究.结果:在全国第四次中药资源普查中,笔者经实地调查白头翁属植物的形态特征、花粉粒微观形态、基于ITS2序列的DNA条形码分子鉴定等,确证了一新种白头翁-岩生白头翁(Pulsatilla saxatilis)的存在;确证了兴安白头翁(P.dahurica),白花白头翁(P.chinensis)两种辽宁省新记录;确证了在大连市大黑山、鞍山市千山有金县白头翁(P.chinensis var.kissii)的存在.结论:辽宁地区为白头翁的主产区之一,白头翁药材基本都为野生,价格逐年上涨,加之开荒种地等原因,辽宁地区白头翁属资源正在逐年锐减,更加造成了白头翁属植物资源的匮乏,急需加快栽培技术研究,保护白头翁属植物野生资源的多样性和保证白头翁药材的可持续利用.
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威灵仙一种新伪品的生药学和分子生药学鉴别
目的:运用生药学和分子生药学研究思路和方法,对市场上一种威灵仙新伪品进行鉴别,为保障威灵仙药材的安全使用提供实验依据.方法:对威灵仙及其伪品进行性状、显微等生药学研究,描述威灵仙及其伪品的生药学鉴别特征.对威灵仙及其伪品的分子生药学研究,通过试剂盒提取样品的DNA,聚合酶链式反应(PCR)扩增及双向测序获得其内转录间隔区(ITS)序列,根据美国国家生物技术信息中心(NCBI)数据库中已收录的ITS序列进行相似度分析及DNA条形码溯源.结果:威灵仙及伪品的生药学鉴别特征主要有外皮颜色以及有无茎节等;横切面显微特征区别主要为有无髓.分子生药学研究表明,该伪品的基原植物为紫金牛科紫金牛Ardisia japonica.结论:该威灵仙伪品为綮金牛的茎及根茎,该伪品与威灵仙在成分、功能主治方面差别较大,在临床应用上应严格区分.
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冬凌草IrCYP71基因的克隆和功能
目的:克隆冬凌草二萜类化合物生物合成途径下游关键酶基因IrCYP71,进行序列特征分析,对此基因编码的蛋白进行原核表达分析以及亚细胞定位,并对蛋白在宿主细胞表达的条件进行了优化.方法:根据转录组测序所得的IrCYP71基因片段,克隆出全长cDNA序列;构建pET28a(+)-IrCYP71重组质粒,转化到Rosetta感受态细胞,小量表达和大量表达蛋白并鉴定,进行包涵体蛋白的纯化与复性,再对复性蛋白纯化鉴定分析.基于gateway克隆技术构建出PCR8/GW/TOPO-IrCYP71载体之后与改造Pearleygate104载体重组,之后与农杆菌GV3101重组,转入烟草中瞬时表达,从而进行蛋白亚细胞定位.结果:克隆得到的IrCYP71基因全长cDNA为1 593 bp,编码530个氨基酸,并在GenBank注册(登录号MG800628).经大肠埃希菌表达系统表达的重组蛋白相对分子质量正确,在62 kDa左右,纯化后的重组蛋白总量有1 mg,蛋白纯度为85％.此蛋白亚细胞定位在细胞核.结论:对冬凌草IrCYP71基因进行了初步验证,并对基因表达的蛋白进行原核表达和亚细胞定位,使该基因在冬凌草二萜成分的生物合成过程中的作用得到了进一步的阐述.
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白及内生真菌的分离鉴定及其胞外多糖的抗氧化活性分析
目的:缓解白及药用资源压力,分离鉴定白及内生真菌并进行内生真菌胞外多糖活性强弱研究.方法:分离鉴定白及内生真菌,进行液体发酵培养获得胞外多糖,通过建立铁氰化钾法,2,2-联苯基-1-苦基肼基(DPPH)法,水杨酸法,2-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)法4种体外模型研究白及内生真菌胞外多糖的抗氧化活性.结果:从白及新鲜根中分离得到10株内生真菌,鉴定合并菌株后得到6株不同的菌株,其中10号菌株胞外多糖(0.1 9·L-1)总还原力强,其维生素C(VC)当量高达12.01 mg·L-1,其次为6号菌株;清除DPPH自由基活性强的为1号和6号菌株为16.6％;6号菌株清除羟基自由基活性强为21.6％,弱的为10号菌株仅为11.0％;测定其清除ABTS自由基活性时则发现,10号菌株活性强为13.6％,其次为6号菌株,弱的为5号仅为1.8％.结论:白及内生真菌胞外多糖具有一定的抗氧化活性,其中6号菌株胞外多糖总还原力,清除DPPH自由基活性,清除羟基自由基活性、清除ABTS自由基均较好,可以加以开发和利用.
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苦芺的本草考证
目的:通过对中药苦芺的植物形态、生境、分布、使用进行考证,为苦芺正本清源.方法:查阅汉至明清时期的辞书及历代中草药书籍,对苦芺进行植物形态、生境、分布、使用溯源考证.结果:我国中草药书籍中苦芺的基源植物较混乱,分别有为地胆草、绿蓟、蒙山莴苣、白花败酱草之说.结论:通过查阅《中国植物志》及《浙江植物志》中绿蓟地域分布和植物形态特征及其化学成分及药理作用,并结合上述古籍文献及历代中草药书籍中苦芺的本草学内容进行比对分析,苦芺的基源植物应该为绿蓟较妥.
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互联网+模式下从产业价值链视角分析山东平邑金银花产业链的整合策略
以往对山东平邑金银花的研究更多聚焦在传统工业时代的专业领域,为该区域金银花产业的资源开发、质量控制、进一步应用提供了丰富的科研积累.对比河北巨鹿、河南封丘两大产地,对比其他中药材品种宁夏枸杞产业,对比农业产业链的互联网技术深度嵌入,山东平邑金银花产业由于种植组织化与规范化不足、深加工产品附加值不高、销售产品与渠道单一等产业痛点,无法突破原有上游产业资源优势.移动互联网时代带来了全球化与区域竞争模式的变化,运用产业经济学、管理学相关理论研究发现,互联网+模式与产业价值链理论在产业链整合方面有三大共性,即回归顾客价值的商业逻辑、产业升级转型的路径、产业运营管理的目标,这正好可以解决以往用传统商业思维很难克服的产业顽疾.运用这两者系统分析山东平邑金银花产业,确定其在产业链上的定位,通过整合原有上游优质资源为产业链上各经营主体搭建六大独特价值平台,同时带来大数据与资本价值.
| 年 | 期数 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2017 | 01 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2015 | 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 13 14 15 16 17 18 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 |
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