中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae 중국실험방제학잡지
- 主管单位： 国家中医药管理局
- 主办单位： 中国中医科学院中药研究所 中华中医药学会
- 影响因子： 1.62
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1005-9903
- 国内刊号： 11-3495/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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二至丸对去卵巢所致AD小鼠海马蛋白质组学的影响
目的:应用蛋白质组学方法探究二至丸对去卵巢所致阿尔茨海默病 (Alzheimer's disease, AD) 小鼠的生物学基础的影响.方法:小鼠去卵巢后随机分为4组, 分别为模型组、阳性药组、二至丸高、低剂量组, 每组14只小鼠, 另设14只为假手术组, 术后6周开始给药, 二至丸高、低剂量组分别用对应药物灌胃给药 (2, 1 g·kg-1);阳性药组隔天皮下注射苯甲酸雌二醇0.02 mg;假手术组与模型组灌胃等容量的蒸馏水, 每日1次, 持续给药32 d.取小鼠海马组织, 提取蛋白, Nanol-ESI液相-质谱联用系统检测蛋白, Protein Discovery软件鉴定蛋白, SIEVE软件对海马蛋白进行相对定量定性分析.PANTHER Classification System对差异蛋白进行基因本体 (GO) 分析, 京都基因与基因组百科全书 (KEGG) 富集信号通路.结果:与模型组相比较, 正常组、二至丸高、低剂量组小鼠共有80多个差异表达蛋白, 通过GO分析分析发现这些蛋白可分为微管蛋白、热休克蛋白、能量代谢相关蛋白和脑保护相关蛋白等与AD相关的蛋白;KEGG分析发现以上差异蛋白共涉及20条信号通路, 以上差异蛋白可能是二至丸防治AD的靶点蛋白.结论:二至丸可能通过促进能量代谢与囊泡运输, 同时减少Aβ的生成与神经细胞的氧化损伤来达到治疗AD的作用.
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定心方通过上调CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞表达对PM2.5所致动脉粥样硬化的影响
目的:观察定心方 (DXR) 在小鼠吸入PM2.5所致动脉粥样硬化 (AS) 过程中对CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞 (CD4+CD25+Foxp3+Tregs) 表达调控的影响.方法:50只载脂蛋白E基因敲除 (Apo E-/-) 小鼠喂食高脂饲料并吸入严重污染的自然空气, 随机分为5组, DXR低、中、高剂量组分别灌胃DXR 9.29, 18.59, 37.18 g·kg-1·d-1;辛伐他汀组灌胃辛伐他汀5 mg·kg-1·d-1;模型组灌胃等剂量生理盐水;10只C57BL/6J小鼠喂食普通饲料吸入过滤空气设为正常组.16周后检测小鼠血清脂质、酶联免疫吸附测定测定 (ELISA) 检测白细胞介素-6 (IL-6), 肿瘤坏死因子-α (TNF-α), 白细胞介素-10 (IL-10) 及转化生长因子-β (TGF-β) 水平;流式细胞法检测脾脏CD4+CD25+Foxp3+Tregs数量;苏木素-伊红 (HE) 染色观察主动脉AS斑块形态学变化;蛋白免疫印迹法 (Western blot) 检测主动脉AS斑块Foxp3蛋白表达.结果:与正常组比较, 模型组小鼠主动脉AS斑块形成, 血清脂质, IL-6及TNF-α水平明显升高, IL-10及TGF-β水平明显降低, CD4+CD25+Foxp3+Tregs数量明显减少, Foxp3蛋白表达明显降低 (P＜0.05);与模型组比较, 辛伐他汀组, DXR中、高剂量组小鼠AS斑块面积明显减小, 血清脂质, IL-6及TNF-α水平明显降低, IL-10及TGF-β水平明显升高, CD4+CD25+Foxp3+Tregs数量明显增加, Foxp3蛋白表达明显增加 (P＜0.05) .结论:DXR可通过上调CD4+CD25+Foxp3+Tregs表达发挥抗PM2.5所致AS功效.
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自噬对双去甲氧基姜黄素诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用的影响
目的:探讨自噬对双去甲氧基姜黄素诱导肝癌HepG2细胞凋亡作用的影响.方法:以24 mg·L-1双去甲氧基姜黄素或联合5 mol·L-1自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤 (3-methyladenine, 3-MA) 对HepG2细胞作用24, 48 h, 以四甲基偶氮唑盐 (methye thiazolye telrazlium, MTT) 比色法检测细胞活力;以24 mg·L-1双去甲氧基姜黄素单用或联合3-MA对HepG2细胞作用48 h, Hoechst 33342染色倒置荧光显微镜观察细胞凋亡形态, 磷脂结合蛋白V/碘化丙啶 (Annxin V/propidium iodide, PI) 双染检测细胞凋亡率, 罗丹明123 (Rhodamine 123, Rh123) 染色检测线粒体膜电位, 蛋白免疫印迹法 (Western blot) 检测自噬相关蛋白Beclin-1, LC3, 半胱氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3), 活化型Caspase-3 (cleaved Caspase-3), B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2), Bcl-2相关X蛋白 (Bax) 的活性表达.结果:与空白组比较, 双去甲氧基姜黄素可抑制HepG2细胞增殖, 诱导细胞凋亡, 降低线粒体膜电位, 使pro-Caspase-3, Bcl-2, LC3-Ⅰ蛋白表达降低 (P＜0.01), 升高cleaved Caspase-3, Bax, Beclin-1, LC3-Ⅱ蛋白的表达 (P＜0.01);3-MA可增强双去甲氧基姜黄素所诱导的HepG2细胞凋亡, 提高凋亡率 (P＜0.01), 增加其降低线粒体膜电位作用 (P＜0.01), 明显下调pro-Caspase-3, Bcl-2蛋白的表达 (P＜0.01), 并上调Beclin-1, LC3, cleaved Caspase-3蛋白的表达 (P＜0.01) .结论:双去甲氧基姜黄素可经线粒体机制诱导HepG2细胞凋亡, 并诱导细胞自噬, 自噬对凋亡有抑制作用.
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基于肠道尿酸转运体ABCG2的芒果苷降尿酸作用机制分析
目的:探讨芒果苷对尿酸诱导的高尿酸血症小鼠血尿酸、肠道尿酸转运体三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2[ATP-binding cassette superfamily G (White) member 2, ABCG2]mRNA及蛋白表达的影响, 初步探讨芒果苷降尿酸的作用机制.方法:昆明种小鼠60只, 随机分为6组, 每组10只, 分为正常组, 模型组组, 芒果苷 (1.5, 3.0, 6.0 mg·kg-1) 组和阳性药苯溴马隆 (25.0 mg·kg-1) 组, 除正常组外, 以腹腔注射的方式给予小鼠尿酸, 诱导形成高尿酸血症模型, 同时灌胃给予芒果苷及苯溴马隆, 2周后磷钨酸法检测小鼠血尿酸, 逆转录聚合酶链式反应 (RT-PCR) 及蛋白免疫印迹法 (Western blot) 检测小鼠空肠、回肠部ABCG2 mRNA和蛋白的表达, 并采用苏木素-伊红 (HE) 染色观察小鼠回肠病理学变化.结果:与正常组比较, 模型组小鼠血尿酸显著升高, 小鼠的空部、回肠部ABCG2 mRNA明显降低, 小鼠的空部、回肠部ABCG2蛋白明显升高 (P＜0.05, P＜0.01), 病理变化不明显;灌胃给药2周后, 与模型组比较, 芒果苷 (3.0, 6.0 mg·kg-1) 组小鼠血尿酸明显下降 (P＜0.05, P＜0.01), 芒果苷 (1.5, 3.0, 6.0 mg·kg-1) 组小鼠的空部、回肠部ABCG2 mRNA表达均明显的上调, 芒果苷 (6.0 mg·kg-1) 组小鼠空肠部ABCG2蛋白明显下调, 而在小鼠回肠部, 芒果苷 (3.0, 6.0 mg·kg-1) 组的ABCG2蛋白表达明显下调 (P＜0.05) .结论:芒果苷可明显降低高尿酸血症小鼠的血尿酸水平, 并能使小鼠肠道ABCG2 mRNA和蛋白表达改变恢复至正常水平.
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白花蛇舌草-半枝莲药对组分诱导三阴性乳腺癌细胞凋亡的机制
目的:考察白花蛇舌草-半枝莲药对的活性组分诱导三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡及其作用机制.方法:超高效液相色谱法对药对活性组分中化学成分进行测定, 噻唑蓝 (MTT) 比色法检测细胞体外增殖力, 克隆形成实验考察克隆形成的数量变化, 流式细胞仪检测凋亡细胞的比例, 蛋白质免疫印迹法检测蛋白及信号通路的变化.结果:制备药对以3种配比 (1∶1, 1∶2, 2∶1) 进行水煎后脱脂浸膏的乙酸乙酯组分 (YDW11, YDW12, YDW21) .YDW11含有对羟基苯乙酮、野黄芩苷、木犀草素和芹菜素4种成分.通过比对这3个组分对乳腺正常上皮细胞10A1和三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的体外增殖的影响, 发现YDW11在2550 mg·L-1对10A1细胞无细胞毒性, 且抑制MDA-MB-231的体外增殖 (P＜0.01), 其抑制活性强于YDW12, YDW21.YDW11呈质量浓度和时间依赖性抑制三阴性乳腺癌细胞株MDA-MB-231, HS578T, BT549的体外增殖 (P＜0.05, P＜0.01), 但对MCF-7体外增殖影响不大.YDW11呈浓度依赖性抑制MDA-MB-231的克隆形成 (P＜0.01), 并诱导其凋亡 (P＜0.01) .YDW11提高p21 mRNA和蛋白表达的同时, 抑制增殖细胞核抗原 (PCNA)的表达 (P＜0.05, P＜0.01), 抑制丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 信号通路中p38, c-Jun氨基末端激酶 (JNK), 细胞外调节蛋白激酶 (ERK) 的磷酸化 (P＜0.05) .YDW11处理MDA-MB-231后, VASP在Ser157位点和Ser239位点的磷酸化水平提高 (P＜0.05, P＜0.01), 提示激活环状核苷酸 (c AMP) 和环磷酸鸟苷 (c GMP) 信号通路的活化.结论:白花蛇舌草-半枝莲药对等比配伍的乙酸乙酯组分 (YDW11) 在对乳腺正常上皮细胞10A1无毒的剂量25, 50 mg·L-1, 呈剂量和时间依赖性显著抑制三阴性乳腺癌细胞MDAMB-231的体外增殖、克隆形成并诱导凋亡.呈浓度依赖性提高周期抑制蛋白p21在mRNA和蛋白的表达水平, 抑制PCNA的表达, 抑制p38, JNK, ERK的磷酸化水平, 提高VASP在Ser157和Ser239位点的磷酸化, 部分通过c AMP/c GMP和抑制MAPK信号通路而诱导MDA-MB-231的凋亡.
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补肾抑瘤汤含药血清对PC-3细胞Notch1/Jagged1信号通路的影响
目的:通过体外细胞实验研究补肾抑瘤汤对前列腺癌细胞增殖的干预作用及其机制.方法:首先按照血清药理学方法, 给予SD大鼠连续灌胃用药7 d, 取血制备空白血清和补肾抑瘤汤含药血清;然后以人前列腺癌细胞PC-3为模型研究补肾抑瘤汤含药血清对前列腺癌细胞增殖及Notch1/Jagged1信号通路的影响, 噻唑蓝 (MTT) 比色法检测补肾抑瘤汤含药血清 (2.5％, 5％, 10％, 15％) 处理PC-3细胞后不同时间点 (12, 24, 36 h) 的细胞增殖情况, 分别应用逆转录-聚合酶链式反应 (RTPCR) 及蛋白免疫印迹法 (Western blot) 分析补肾抑瘤汤含药血清对PC-3细胞Notch1, Jagged1 mRNA和蛋白表达的影响.结果:与空白组比较, 经补肾抑瘤汤含药血清处理12, 24, 36 h后, PC-3细胞增殖受到了不同程度的抑制, 其中以36 h的抑制作用为显著 (P＜0.01);补肾抑瘤汤含药血清对PC-3细胞Notch1, Jagged1 mRNA和蛋白表达均有抑制作用, 尤其是补肾抑瘤汤10％, 15％含药血清组抑制效果明显 (P＜0.05, P＜0.01) .结论:补肾抑瘤汤含药血清能明显抑制PC-3细胞增殖, 作用可能与调控Notch1/Jagged1表达有一定相关性.
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逍遥散对非酒精性脂肪性肝炎肝郁脾虚证大鼠TLR-4/TRIF信号转导通路的影响
目的:观察逍遥散对非酒精性脂肪性肝炎 (NASH) 肝郁脾虚证大鼠肝细胞Toll样受体-4 (TLR-4) /β干扰素TIR结构域衔接蛋白 (TRIF) 信号转导通路活性的影响.方法:选取32只SPF级SD雄性大鼠, 随机分为正常组、模型组、逍遥散治疗组和甘氨酸治疗组 (n=8) .除正常组大鼠给与基础饲料常规饲养外, 其余实验组均按"高糖高脂饲料+饥饱失常+慢性束缚应激"法饲养14周以建立NASH肝郁脾虚证大鼠模型, 并分别给与生理盐水2 mL·kg-1·d-1灌胃, 1 g·mL～ (-1) 逍遥散溶液按3.24 mL·kg-1·d-1剂量灌胃, 2.5 g·mL～ (-1) 甘氨酸溶液按2 mL·kg-1·d-1剂量灌胃, 给药4周后处死.大鼠处死前均计算其肝郁脾虚证证侯积分和检测尿D-木糖排泄率, 无菌低温条件下提取肝脏及脑组织.采用酶联免疫吸附测定 (ELISA) 法检测大鼠脑组织内去甲肾上腺素 (NE), 5羟色胺 (5-HT) 的含量, 苏木素-伊红 (HE) 染色检测肝细胞脂肪变性及炎细胞浸润程度, 实时荧光定量聚合酶链式反应 (Real-time PCR) 和蛋白免疫印迹法 (Western blot) 技术检测大鼠肝组织TLR-4, TRIF蛋白的表达.结果:与正常组比较, 模型大鼠肝郁脾虚证证侯积分明显升高, 而尿D-木糖排泄率和脑组织内5-HT, NE含量明显降低, 肝组织HE染色可见肝细胞胞质内出现大量脂肪空泡及肝小叶内可见散在的点状坏死和炎细胞浸润, TLR-4和TRIF mRNA表达以及TLR-4和TRIF蛋白表达量明显升高 (P＜0.05);与模型组比较, 逍遥散治疗组和甘氨酸治疗组明显降低大鼠肝郁脾虚证证侯积分, 明显升高尿D-木糖排泄率和脑组织内5-HT, NE的含量, 明显减轻肝细胞脂肪变性程度及炎细胞浸润程度, 明显降低TLR-4和TRIF mRNA表达以及TLR-4和TRIF蛋白表达量 (P＜0.05) .结论:逍遥散可通过调节TLR-4/TRIF信号转导通路的活性以发挥"疏肝健脾"之功效, 从而参与NASH肝郁脾虚证的治疗.
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痛风宁对急性痛风性关节炎模型大鼠IL-1β,TNF-α及NALP3炎性体的影响
目的:从核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 (NALP3) 炎性体角度探讨痛风宁的抗炎作用机制.方法:将48只SD大鼠随机分为造模大鼠36只、正常大鼠12只.造模大鼠采用踝关节局部注射0.2 mL尿酸钠 (monosodium urate, MSU) 混悬液建立急性痛风性关节炎 (acute gouty arthritis, AGA) 模型, 正常大鼠予相同部位注射生理盐水.造模成功后, 随机分为模型组、痛风宁组、秋水仙碱组, 分别用生理盐水、痛风宁药液、秋水仙碱混悬液灌胃, 每天2次, 共3 d.正常大鼠为正常组, 同时予等量生理盐水灌胃.造模成功后72 h, 行腹腔注射麻醉后取踝关节液及滑膜组织.采用酶联免疫吸附测定法 (ELISA) 检测大鼠踝关节液白细胞介素-1β (IL-1β), 肿瘤坏死因子-α (TNF-α) 含量;蛋白免疫印迹法 (Western blot) 及实时荧光定量PCR (Real-time PCR) 检测滑膜组织NALP3炎性体相关蛋白与mRNA表达.结果:与正常组比较, 模型组大鼠踝关节液IL-1β, TNF-α含量显著升高, 滑膜组织NALP3, 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1 (Caspase-1), 凋亡相关斑点样蛋白 (ASC) 蛋白及mRNA表达均显著增加 (P＜0.01);与模型组比较, 痛风宁组与秋水仙碱组大鼠踝关节液IL-1β, TNF-α含量显著下降, 且滑膜组织中NALP3, Caspase-1, ASC蛋白及mRNA表达均显著降低 (P＜0.01);与秋水仙碱组比较, 痛风宁组大鼠踝关节液IL-1β, TNF-α含量仍较高 (P＜0.05), 但滑膜组织中NALP3, Caspase-1, ASC蛋白及mRNA表达均较低 (P＜0.05, P＜0.01) .结论:痛风宁对AGA的抗炎作用机制可能是通过抑制NALP3炎性体相关蛋白及mRNA表达, 从而减少IL-1β, TNF-α的生成, 减轻关节炎症反应.
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熊果酸对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的保护作用
目的:通过复制糖尿病肾病大鼠模型, 探讨熊果酸 (ursolic acid, UA) 对糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的保护作用及其机制.方法:SPF级大鼠采用链脲霉素 (streptozocin, STZ) 及高糖高脂饲料联合复制糖尿病肾病大鼠模型, 实验分为正常组, 模型组, 阳性药组 (厄贝沙坦, 15 mg·kg-1), UA高剂量组 (UA-H, 60 mg·kg-1) 和UA低剂量组 (UA-L, 30 mg·kg-1);观察大鼠血糖、尿蛋白量、肾指数的变化, 苏木精-伊红 (hematoxylin-eosin, HE) 染色法和过碘酸-希夫 (periodic acid-schiff, PAS) 染色法观察肾脏病理变化, 酶联免疫吸附测定 (ELISA) 检测血清和肾脏中的肿瘤坏死因子-α (tumor necrosis factor-α, TNF-α), 白细胞介素-6 (interleukin-6, IL-6), 白细胞介素-1β (interleukin-1β, IL-1β) 含量, 试剂盒检测肾脏组织超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase, SOD) 活性和丙二醛 (malonaldehyde, MDA) 含量, 蛋白免疫印迹法 (Western blot) 检测大鼠肾组织足细胞裂孔膜CD2相关蛋白 (CD2-associated protein, CD2AP) 和podocin蛋白的表达.结果:与正常组比较, 模型组大鼠的血糖, 24 h尿蛋白量, 血清和肾脏IL-1β, IL-6及TNF-α含量, 肾脏组织中MDA含量, 肾指数均显著增加, 体质量, 肾脏组织SOD活性, 肾脏中podocin, CD2AP蛋白表达量均显著降低 (P＜0.01);与模型组比较, UA明显降低血糖值和尿蛋白量, 肾指数, 肾脏MDA含量, 血清和肾脏IL-1β, IL-6及TNF-α水平, 能够升高模型组大鼠体质量, 肾脏SOD活性, 肾脏中podocin, CD2AP蛋白的表达 (P＜0.05, P＜0.01), 逆转糖尿病所致大鼠肾小球病变.结论:UA可通过保护肾脏足细胞作用及调节裂孔膜蛋白CD2AP和podocin表达而抑制高血糖对肾脏的病理损害、降低尿蛋白和保护肾功能.
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化痰消瘤方对荷Lewis肺癌小鼠nm-23,VEGF表达的影响
目的:观察化痰消瘤方对Lewis肺癌小鼠瘤质量及肺转移灶的影响, 检测瘤组织中血管内皮生长因子 (VEGF), nm-23 mRNA表达的情况, 探究其作用机制.方法:取雄性C57BL/6J小鼠30只, 随机分为空白组, 化痰消瘤方组 (50 g·kg-1·d-1), 环磷酰胺 (CTX) 组[0.06 g·kg-1· (3, 7 d) -1], 共3组, 每组10只.右腋下注射细胞悬液建立荷Lewis肺癌小鼠模型, 造模后观察21 d, 处死, 剥离瘤组织, 计算抑瘤率, 摘取肺组织, 固定后显微镜下观察肺转移灶个数, 计算抗肺转移率, 通过实时荧光定量PCR (Real-time PCR) 检测瘤组织中nm-23, VEGF mRNA表达情况, 蛋白免疫印迹法 (Western blot) 检测瘤组织中nm-23, VEGF蛋白的表达情况.结果:与空白组比较, 化痰消瘤方组及环磷酰胺组瘤质量、肺转移灶个数均显著降低 (P＜0.01) .与空白组比较, 化痰消瘤方及环磷酰胺能显著下调VEGF蛋白和VEGF mRNA的表达水平 (P＜0.01), 能显著上调nm-23蛋白和mRNA的表达水平 (P＜0.01) .结论:化痰消瘤方具有抑制Lewis肺癌瘤体生长及转移的作用, 其作用机制可能是通过降低VEGF的表达水平, 减弱了肿瘤新生血管的生成, 同时上调nm23 mRNA表达水平, 抑制肿瘤生成与转移来实现的.
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八味肾气丸合八正散加减对中老年反复发作性尿路感染的调节作用
目的:观察八味肾气丸合八正散加减治疗中老年反复发作性尿路感染 (RUTI) 的临床疗效及对免疫功能和炎症因子的影响.方法:将140例患者, 按区组随机分为观察组和对照组各70例.对照组口服盐酸左氧氟沙星片, 0.2 g/次, 2次/d.连续治疗2周, 尿培养阴性后采用头孢氨苄甲氧苄啶胶囊, 0.25 g·d-1, 睡前服用.观察组在对照组治疗的基础上加用八味肾气丸合八正散加减内服, 1剂/d.两组疗程均连续治疗12周.进行治疗前后主要临床症状和生活质量评分;记录6个月内的复发情况;检测治疗前后α1-微球蛋白 (α1-MG) 和β2-微球蛋白 (β2-MG), 尿N-乙酰-β-氨基葡萄糖苷酶 (NAG) 水平;检测治疗前后T细胞亚群 (CD3+, CD4+, CD8+, CD4+/CD8+) 和尿液分泌型免疫球蛋白A (SIg A) 水平;检测治疗前后肿瘤坏死因子-α (TNF-α), 白细胞介素-6 (IL-6), IL-8和降钙素原 (PCT) 等炎症因子水平.结果:经秩和检验, 观察组患者临床疗效优于对照组 (P＜0.05);观察组各症状评分和总分均低于对照组 (P＜0.01);治疗后观察组α1-MG, β2-MG和NAG水平均低于对照组 (P＜0.01);观察组CD4+, CD4+/CD8+和SIg A均高于对照组 (P＜0.05), CD8+低于对照组 (P＜0.05);观察组TNF-α, IL-6, IL-8和PCT水平均低于对照组 (P＜0.01);观察组患者生理职能、活力、情感职能和精神健康4个维度评分均高于对照组 (P＜0.05);观察组在6个月随访中平均复发次数少于对照组 (P＜0.01), 观察组复发率为37.74％, 低于对照组的60.98％ (χ2=5.003, P＜0.05) .结论:八味肾气丸合八正散加减治疗肾虚湿热型RUTI中老年患者可减轻临床症状、减少复发, 提高生活质量, 保护肾功能, 并具有调节免疫和抗炎效应, 近期和远期疗效均优于单纯西医治疗.
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肾痹汤加减联合双氯芬酸钠治疗股骨头坏死肾虚血瘀证的临床观察
目的:探讨肾痹汤加减联合双氯芬酸钠缓释片治疗早中期股骨头坏死肾虚血瘀证的临床疗效, 探讨其作用机制.方法:将106例早中期股骨头坏死肾虚血瘀证患者按就诊顺序随机分为对照组和观察组, 每组各53例.对照组患者给予仙灵骨葆胶囊联合双氯芬酸钠缓释片, 观察组患者给予肾痹汤加减联合双氯芬酸钠缓释片, 连续治疗6个月, 随访12个月.治疗前后分别观察患者的Harris量表, 健康调查简表 (SF-36), 中医证候量表和影像学评分;检测血浆黏度 (PV), 红细胞电泳时间 (EPT), 红细胞沉降率 (ESR), 红细胞比容 (HCT) 的变化;比较两组患者的有效率、复发率及安全性指标.结果:研究期间对照组患者脱落2例, 观察组患者脱落4例.观察组总有效率97.9％, 高于对照组的82.4％ (P＜0.05);随访12个月观察组复发率8.1％, 低于对照组的35.5％ (P＜0.05) .与对照组治疗后比较, 观察组患者Harri量表, SF-36量表和髋关节影像学评分明显升高 (P＜0.05), 中医证候量表评分, PV, EPT, ESR, HCT水平明显降低 (P＜0.05) .观察组不良反应发生率12.2％, 低于对照组的35.5％ (P＜0.05) .治疗组血、尿常规异常发生率分别为15.9％, 9.8％, 低于对照组的30.6％, 18.4％ (P＜0.05) .结论:肾痹汤加减联合双氯芬酸钠缓释片治疗早中期股骨头坏死肾虚血瘀证, 患者的临床症状和PV, EPT, ESR, HCT水平明显改善, 复发率和不良反应发生率低.
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四君子汤加味治疗克罗恩病的临床疗效和对炎症因子的调节作用
目的:观察四君子汤加味治疗克罗恩病的临床疗效, 探讨其对炎症指标的调节作用.方法:将88例克罗恩病患者随机分为观察组和对照组, 每组各44例, 对照组给予西药常规治疗, 观察组在西药常规治疗的基础上予以四君子汤加味治疗, 在观察周期8周结束后比较两组临床缓解率和有效率、中医证候疗效、疾病活动评分、炎症程度指标和炎症细胞因子情况并评价安全性.结果:治疗后, 观察组临床缓解数和缓解率较对照组显著升高 (P＜0.01);在中医证候疗效方面, 观察组总有效人数和有效率较对照组显著升高 (P＜0.01);观察组临床缓解数和缓解率较对照组明显升高 (P＜0.05);观察组无效数和无效率较对照组显著降低 (P＜0.01) .与本组治疗前相比, 两组患者简化克罗恩病疾病活动指数 (CDAI) 评分项目, 红细胞沉降率 (ESR), C反应蛋白 (CRP) 均较本组治疗前显著降低 (P＜0.01);治疗后, 观察组以上3个指标均较对照组降低 (P＜0.05) .与本组治疗前相比, 两组患者白细胞介素 (IL) -6, 肿瘤坏死因子 (TNF) -α和单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1) 均较本组治疗前降低 (P＜0.01);治疗后, 观察组3个指标均较对照组低 (P＜0.05) .两组患者不良反应发生较少且轻微, 两组患者不良反应发生率相比差异不明显.结论:中药四君子汤加味联合西药常规药物治疗不仅可以更好地改善疾病症状, 也可以明显改善疾病炎症状态, 且安全性良好, 临床使用可以取得更好的疗效.
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天王补心丹加减治疗心房颤动合并冠心病阴虚火旺证的临床观察
目的:探讨天王补心丹加减治疗心房颤动合并冠心病(阴虚火旺证)的临床疗效及抗炎作用机制.方法:将118例患者随机按数字表法以1∶1比例分为对照组和观察组各59例.对照组口服华法林钠片, 2.55 mg·d-1, 1次/d, 监测国际标准化比值 (INR) 2.03.0;口服琥珀酸美托洛尔缓释片, 23.7547.5 mg, 1次/d;口服阿托伐他汀钙片, 20 mg·d-1, 1次/晚.观察组在对照组治疗的基础加服天王补心丹加减, 1剂/d.两组疗程均为连续治疗8周.进行治疗前后动态心电图和超声心动图检查[记录左室射血分数 (LVEF), 心输出量 (CO), 左室收缩末内径 (LVESD) 和每搏输出量 (SV) ];进行心悸阴虚火旺证评分;检测治疗前后甘油三酯 (TG), 总胆固醇 (TC), 高密度脂蛋白 (HDL-C) 和低密度脂蛋白 (LDL-C) 水平;检测治疗前后N-末端B型利钠肽原 (NT-pro BNP), 白细胞介素-6 (IL-6), 肿瘤坏死因子-α (TNF-α), C-反应蛋白 (CRP) 和单核细胞趋化蛋白-1 (MCP-1);进行治疗前后安全性评价.结果:经秩和检验, 治疗后观察组动态心电图疗效优于对照组 (P＜0.05);治疗后观察组患者心室率少于对照组 (P＜0.05);观察组房颤伴发心电图异常情况少于对照组 (χ2=6.631, P＜0.05);观察组心悸、失眠、烦躁、胸闷、胸痛等主要症状评分和次证评分及阴虚火旺证总分均低于对照组 (P＜0.01);观察组患者血脂异常例数少于对照组 (χ2=4.417, P＜0.05);观察组患者LVEF, CO和SV均高于对照组 (P＜0.05);观察组患者NT-pro BNP, IL-6, TNF-α, CRP和MCP-1水平低于对照组 (P＜0.01) .结论:在西医常规治疗的基础上, 采用天王补心丹加减治疗冠心病合并房颤可控制心室率, 减轻临床症状, 调节脂代谢, 改善心功能和抑制炎症反应, 起到治疗房颤的作用.
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柴胡疏肝汤联合归脾汤加味治疗难治性癫痫肝郁脾虚证的临床观察
目的:探讨柴胡疏肝汤联合归脾汤加味治疗难治性癫痫(intractable epilepsy, IE) 肝郁脾虚证的临床疗效及对抗氧自由基, P-糖蛋白 (P-glycoprotein, P-gp), 胰岛素样生长因子-1 (insulin-like growth factor-1, IGF-1) 表达的影响.方法:将符合IE肝郁脾虚证诊断标准60例患者, 按随机数字表法分为对照组和观察组, 各30例, 对照组给予常规治疗, 观察组在给予常规治疗基础上, 给予柴胡疏肝汤联合归脾汤加味治疗, 连续治疗3个月后, 检测治疗后患者的视频脑电图 (electroencephalogram, EEG) 情况;记录治疗前后癫痫发作频次、发作持续时间、癫痫患者生活量表-31 (quality of life in epilepsy-31, QOLIE-31);检测治疗前后血清总超氧化物歧化酶 (superoxide dismutase, SOD), 丙二醛 (malondialdehyde, MDA), P-gp, IGF-1的水平;计算治疗前后癫痫发作次数、发作持续时间, QOLIE-31各项评分, SOD, MDA, P-gp, IGF-1水平的差值.结果:观察组治疗后癫痫发作频次低于对照组 (P＜0.05), 持续时间显著低于对照组 (P＜0.01), 痫样放电例数少于对照组 (P＜0.05), 各项生活质量评分均显著高于对照组 (P＜0.01), SOD水平显著高于对照组 (P＜0.01), MDA, P-gp水平显著低于对照组 (P＜0.01), IGF-1水平低于对照组 (P＜0.05);与对照组差值比较, 观察组发作频次减少程度较明显 (P＜0.05), 持续时间减少程度显著 (P＜0.01), 各项生活质量评分上升程度较明显 (P＜0.05), SOD增加和P-gp减少程度显著 (P＜0.01), MDA, IGF-1减少程度较明显 (P＜0.05) .结论:柴胡疏肝汤联合归脾汤加味治疗IE肝郁脾虚证患者可减少癫痫的发作频次和发作持续时间、痫样放电, 提高患者生活质量, 作用机制可能与清除氧自由基、提高抗癫痫药 (antiepileptic drugs, AEDs) 敏感性、减少脑损伤有关.
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十枣汤研究进展
十枣汤始载于《伤寒杂病论》, 由芫花 (熬), 甘遂, 大戟和大枣 (擘) 4味药材组成, 是名医张仲景治疗水结悬饮证的经典方剂.十枣汤虽然在泻水逐饮方面效果显著, 但组方中有毒药味的毒性制约了其临床应用, 医者多谨慎使用或不用.本文通过查阅近30年国内外相关文献资料, 从名医方论、用法用量、化学成分、药理毒理、临床应用等方面对十枣汤的研究进展进行综述, 提出为有效开发利用十枣汤这一经典方剂, 应综合运用现代科学研究手段对十枣汤毒效物质基础、量-时-毒-效关系、安全用药范围等进行研究, 探讨炮制对其药理毒理作用的影响, 揭示其临床应用"有故无殒"的科学内涵, 以期为十枣汤的深入开发利用提供依据, 从而更好地为临床服务.
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左归丸治疗骨质疏松症相关机制
左归丸是中医经典方剂之一, 为"阳中求阴"的代表方, 具有滋肾补阴的功效和纯补无泻的特点.骨质疏松症是一种以骨量低, 骨组织结构破坏, 导致骨脆性增加, 骨强度下降及骨折风险增加, 易发生骨折为特征的全身性骨病, 它已成为威胁人类健康的常见疾病之一.中医学有"肾藏精, 主骨生髓"的理论, 左归丸在治疗骨质疏松症方面有着较好的临床疗效, 同时也具有较少的副作用.近年来, 针对左归丸治疗骨质疏松症的实验研究数量与日俱增, 相关分子以及信号通路的机制研究亦取得一定拓展, 特别是左归丸治疗骨质疏松症的相关机制研究陆续涌现.本研究通过整理左归丸治疗骨质疏松症的文献, 对其作用机制及信号通路, 包括环腺苷酸 (c AMP) /蛋白激酶 (PKA) /c AMP应答元件结合蛋白 (CREB) 通路, Notch信号通路, 转化生长因子-β1 (TGF-β1) /Smad信号通路, Wnt/β-链蛋白 (β-catenin) 信号通路和丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK) 信号通路等方面做一综述.这些研究表明左归丸治疗骨质疏松症具有多靶点、多途径的干预特点.虽然左归丸治疗骨质疏松症的疗效明确, 且对于一些基本的机制研究亦取得一定进展, 但仍存在一定的局限性, 尚需结合现代新研究方法和技术对其机制进行更全面更深入的探索.
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淫羊藿苷药理作用研究进展
淫羊藿作为我国传统中药, 具有补肝肾、强筋骨、祛风湿的功效, 是补肾壮阳、强阳起痿方剂的常用中药, 主要用于肾阳不足, 风湿痹痛和骨痿的治疗.现代研究表明, 淫羊藿中的主要化学成分淫羊藿苷具有广泛的生物活性, 如抗炎、抗氧化应激、抗抑郁和抗肿瘤等.分子药理学研究表明, 淫羊藿苷可通过调控多个细胞信号转导通路中的靶点治疗神经系统疾病、骨质疏松症、心血管系统疾病、免疫性疾病和生殖系统疾病等.淫羊藿苷在骨保护方面的作用机制广泛, 主要涉及雌激素受体α (ERα) -分泌型糖蛋白 (Wnt) /β-链蛋白 (β-catenin), 核转录因子-κB (NF-κB), 环磷酸腺苷 (cAMP) 依赖蛋白激酶 (PKA) /cAMP/cAMP应答元件結合蛋白 (CREB), 细胞外信号调节激酶 (ERK) 和p38有丝分裂原活化蛋白激酶 (MAPK), 磷脂酰肌醇3激酶 (PI3K) /蛋白激酶B (protein kinase B, Akt) /内皮型一氧化氮合酶 (e NOS) /NO/环磷鸟苷 (c GMP) /c GMP依赖性蛋白激酶 (PKG), Rho A-TAZ和PI3K/Akt/下调糖原合成激酶3β (GSK3β) /β-catenin等多个信号通路, 显著地成骨作用使其成为治疗骨质疏松症的首选先导化合物.回顾文献, 淫羊藿苷对于调节神经系统, 保护心血管, 调节免疫系统, 改善性功能和抗肿瘤等机制研究方面缺乏详细的总结.为了加快淫羊藿苷药理作用分子机制的探索和发现, 扩大其应用前景, 本文综述近年来淫羊藿苷的药理作用及分子机制研究进展, 为临床合理用药和新药研发提供参考依据.
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不同动物大肠癌造模方法的研究进展
大肠癌是目前临床上常见的消化道恶性肿瘤之一, 迄今全球的发病率仍在持续上升并趋于年轻化, 因此临床上迫切需要提高大肠癌诊断的灵敏性, 充分了解大肠癌的病因和发病机制, 寻求有效的治疗和预防措施.大肠癌动物模型能有效地模拟大肠癌发生、发展和转归, 是研究发病和转移机制的重要方式之一, 用于简化实验步骤和探究实验机制.已有大量的研究表明, 在不同遗传背景的动物上进行大肠癌的复制, 并在人为控制条件下进行各种实验研究, 有利于缩短实验周期, 观察大肠癌发生、发展和转化的全过程.目前实验中常用46周龄的裸鼠、小鼠、大鼠做为模式生物.斑马鱼肿瘤和人类肿瘤在组织学水平上具有高度相似性, 随着显微技术的发展, 斑马鱼作为模式生物在肿瘤学的研究中逐渐兴起.不同模式生物的生物特性不同, 选择的造模方法也存在差异.根据实验目的、实验周期、实验技术等因素, 选择合适的模式生物和对应的造模方法是大肠癌实验成功的关键.近年来, 有关大肠癌模型的研究成果不断涌现, 但多以造模方法为分类依据, 缺乏对不同类别的造模动物的探讨.本文结合国内外相关文献, 对近10年不同动物大肠癌造模方法的研究进展做一综述, 以把握发展动向, 为大肠癌进一步的研究发展提供思路与方法.
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基于QbD理念优选川明参口含片的制备工艺
目的:基于QbD理念研究川明参口含片的制备工艺, 并对其中间体颗粒进行物理质量标准评价.方法:以川明参提取物为主药, 采用湿法制粒压片, 通过单因素试验筛选辅料, 考察口含片的成型率、片重差异、硬度、脆碎度和崩解时限, 从而确定川明参口含片的佳处方.采用粉体学评价方法对川明参颗粒各项物理质量属性指标进行综合表征, 建立由9个指标 (相对均齐度指数、颗粒间空隙率、卡尔指数、松密度、振实密度、干燥失重、吸湿性、豪斯纳比、休止角) 构成的颗粒物理指纹图谱, 评价不同批次颗粒的质量一致性并对其压缩性进行分析, 按照2015年版《中国药典》片剂项下要求对川明参口含片进行质量评价.结果:川明参口含片的佳配方为川明参浸膏30％, 微晶纤维素23％, 乳糖46％, 硬脂酸镁0.7％, 加70％乙醇适量.制备工艺条件为16目筛制粒, 55℃干燥1 h, 18目筛整粒.5批川明参颗粒物理指纹图谱相似度均＞0.944, 可压性评价参数均在可接受范围内, 具有较好的可压性, 川明参口含片的硬度、片重差异等各项指标均符合要求.结论:优选的川明参口含片制备工艺及中间体颗粒物理质量标准科学合理, 为其他中药口含片的研发提供了新思路.
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竹叶提取工艺的综合性评价
目的:建立竹叶的指纹图谱及其多指标成分的含量测定方法, 采用主成分分析(PCA)和聚类分析对6种竹叶提取物的特征图谱进行综合性评价.方法:采用Diamonsil Plus C18色谱柱 (4.6 mm×250 mm, 5μm), 流动相0.025％甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱, 流速1 mL·min-1, 柱温30℃, 检测波长350 nm, 进样量10μL.采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统" (2012版) 和SPSS 22.0软件对6种竹叶提取物样品的监测结果进行分析.结果:6种竹叶提取物样品中4种成分 (绿原酸、异荭草苷、荭草苷、异牡荆素) 的质量浓度分别为0.080.30, 0.241.64, 0.260.79, 0.160.79 g·L-1.HPLC指纹图谱共标定了11个共有峰, 样品S1S6的指纹图谱相似度均＞0.89.聚类分析将6种竹叶提取工艺聚为3类;PCA提取出了2个主成分, 其累计贡献率达98.9％.结论:6种竹叶提取物中绿原酸、异荭草苷、荭草苷和异牡荆素的含量差异性较大.聚类分析和PCA相互补充、互为佐证, 二者与竹叶提取工艺指纹图谱的相似度评价相结合可用于竹叶提取工艺的优化, 可为竹叶的工业开发提供参考.
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光质、光强对远志种子萌发和幼苗生理特性的影响
目的:通过不同光质、光强对种子萌发、幼苗生理特性和总酚、总黄酮含量影响的研究, 为远志的前期育苗提供参考, 为增加远志中总酚、总黄酮的含量提供理论依据.方法:用不同的光质、光强干预远志种子的发芽和幼苗的生长, 测定种子的发芽率、发芽势、发芽指数、活力指数、幼苗的株高、根长、干重、鲜重及总酚、总黄酮含量.结果:红光下远志种子的发芽指标及幼苗的生长指标均显著高于白光, 白光下的幼苗总黄酮含量高, 红光下总酚含量高.不同光照强度对远志种子的发芽率、发芽势、发芽指数无影响, 300, 500μmol·m-2·s-1的光强促进远志幼苗的生长, 100μmol·m-2·s-1光强下总黄酮含量高, 300μmol·m-2·s-1光强下总酚含量高.结论:不同光质、光强对种子发芽和幼苗生长的影响表明, 红光能够促进远志种子的萌发和远志幼苗的生长, 白光促进总黄酮的生成, 红光促进总酚的生成.光照强度对远志种子的萌发无影响, 500μmol·m-2·s-1的光照强度更适宜于远志幼苗的生长, 100μmol·m-2·s-1的光强有利于总黄酮的生成, 300μmol·m-2·s-1的光强有利于总酚的生成.研究表明, 光质光强对远志幼苗生长和总酚总黄酮含量的影响, 可能与远志种子及幼苗内的激素含量有关, 但具体过程还有待进一步验证.
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远志种子质量分级标准考察
目的:研究制定远志种子的质量分级标准.方法:通过对不同产地29个批次远志种子的千粒质量、含水量、发芽率、生活力、单粒大小、净度等指标进行测定和外观形态的观察, 使用Excel 2003, SPSS 20.0等统计分析软件对检测结果进行聚类分析整理, 制订远志种子质量分级标准.结果:Ⅰ级远志种子的发芽率不低于77.00％, 生活力不低于94.00％, 千粒重不低于3.10 g, 净度不低于80.00％, 含水量不高于8.00％;Ⅱ级远志种子的发芽率 (67.00～77.00) ％, 生活力 (88.00～94.00) ％, 千粒质量2.80～3.10 g, 净度 (60.00～80.00) ％, 含水量 (8.00～9.00) ％;Ⅲ级远志种子的发芽率 (55.00～67.00) ％, 生活力低于88.00％, 千粒质量低于2.80 g, 净度 (48.00～60.00) ％, 含水量＞9.00％.结论:发芽率和生活力为质量分级标准的主要指标, 千粒质量为重要指标, 净度和含水量为参考指标.该研究制定的远志种子质量分级标准科学、符合实际情况, 为远志种子的质量评价和人工栽培提供参考依据.
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远志种苗的质量分级标准
目的: 制定远志种苗质量分级标准,为远志优质种苗繁育及规范化生产奠定基础.方法: 通过田间试验,以我国远志主产区征集的27 份远志种苗为研究材料,在测定种苗单株鲜重、单株干重、苗长、苗粗、根长、根粗、叶长和叶宽等质量指标基础上,确定远志种苗分级的主要指标,通过K 均值聚类法划分种苗类别,并制定分级标准.同时,采用高效液相色谱法测定分级后远志种苗中主要有效成分含量.结果: 根长、根粗、苗长、苗粗是评价远志种苗质量分级的主要指标; 单株鲜重是评价远志种苗质量的重要指标; 叶长是评价远志种苗质量的参考指标.结合远志生产实践,将不同产地来源远志种苗划分为3个等级: 一级种苗单株鲜重≥0. 18 g,根长≥12.00cm,根粗≥0.10cm,苗长≥14.00cm; 二级种苗单株鲜重0.10～0.18g,根长9.00～12.00cm,根粗0.07 ～0.10cm,苗长12.00～14.00cm; 三级种苗单株鲜重0.08～0.10g,根长8.00～9.00cm,根粗0.06～0.07cm,苗长10.00～12.00 cm.结论: 考虑到种苗是保证药材质量的基础,建议远志人工栽培中采用一、二级种苗,以保证获得高产量高品质的远志药材.
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远志花粉活力与柱头可授性分析
目的:研究远志花粉活力和柱头可授性, 以期为远志的有性繁殖和杂交育种工作研究提供科学依据.方法:用I2-KI法, 2, 3, 5-三苯基氯化四氮唑 (TTC) 法测定不同开花天数 (开花前一天、第1天、第2天、第3天、第4天、第5天、第6天、第7天、第8天) 的远志花粉活力变化, 并比较2种染色方法对远志花粉活力的染色效果.用I2-KI法分别测定1 d中不同时间段的远志花粉活力、不同贮藏方法 (湿法保存的花朵和干法保存的花朵) 的远志花粉活力及不同贮藏条件 (4, 26, -20, -80℃) 条件下贮藏不同时间 (2, 4, 8, 24, 48, 72 h) 远志花粉活力.用联苯胺-过氧化氢法测定其柱头可授性.结果: (1) 远志的花粉活力随着散粉时间的延长而逐渐降低, 在开花后第4天花粉活力高; (2) 在一天8:0018:00中, 10:0016:00的花粉活力较强; (3) 干燥花粉在-20℃贮藏的条件下能延长花粉的贮藏时间; (4) 开花后第5天柱头可授性强.结论:可以采集花后第4天的花粉对花后第5天的柱头进行人工授粉杂交, 为远志良种选育提供理论依据.
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钠盐胁迫对远志种子萌发特性的影响
目的:通过研究不同钠盐胁迫下远志种子的萌发特性, 为盐碱地中远志的前期育苗提供参考, 提高远志的产量, 促进盐碱地的高效利用.方法:采用单盐NaCl, Na2CO3, Na2SO4和混合盐NaCl+Na2SO4, NaCl+Na2CO3, Na2CO3+Na2SO4, NaCl+Na2CO3+Na2SO4不同钠盐溶液对远志种子的发芽过程进行胁迫, 以蒸馏水为对照, 每天统计并记录发芽数, 计算发芽率, 发芽势, 发芽指数和活力指数, 发芽结束后测量株高, 根长, 鲜重及干重.结果:当NaCl浓度≥150 mmol·L-1, 混合盐Na+ (NaCl+Na2SO4) 浓度≥50 mmol·L-1, 混合盐Na+ (NaCl+Na2CO3) 浓度≥100 mmol·L-1, 混合盐Na+ (Na2CO3+Na2SO4) 浓度≥25 mmol·L-1, 混合盐Na+ (NaCl+Na2CO3+Na2SO4) 浓度≥50 mmol·L-1时, 处理组的发芽率显著低于蒸馏水组 (P＜0.05), 显著抑制远志种子的发芽.当Na2CO3浓度≥5 mmol·L-1时, 种子的发芽率与蒸馏水组相比显著降低 (P＜0.05), 显著抑制远志种子的发芽, 且随着浓度的增大, 抑制作用逐渐增强.结论:低浓度的NaCl, Na2SO4, NaCl+Na2SO4, NaCl+Na2CO3, Na2CO3+Na2SO4, NaCl+Na2CO3+Na2SO4盐溶液对远志种子的萌发无影响, 随着浓度的增大, 对远志种子的发芽有显著的抑制作用.单盐Na2CO3溶液对种子发芽的抑制作用强, Na2CO3≥5 mmol·L-1时对远志种子的萌发具有显著的抑制作用, 且随着胁迫浓度的增大, 抑制作用逐渐增强.
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PEG-6000引发对人工诱导老化的远志种子发芽活力影响
目的:分析不同浓度聚乙二醇6000 (PEG-6000) 溶液对人工诱导老化远志种子4种发芽指标的影响 (发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数), 阐明远志种子在贮存过程中的衰老规律及PEG引发处理对远志老化种子的影响.方法:以远志种子为试验材料, 在高温 (45±1) ℃, 高湿 (100％相对湿度) 和密闭条件下, 人工模拟老化种子条件, 对远志种子进行不同程度的老化处理, 随后用不同浓度PEG-6000溶液 (10％, 20％, 30％PEG-6000) 对已老化的种子进行引发处理.结果:远志老化种子的发芽率、发芽势、发芽指数和活力指数随处理时间的延长呈逐渐降低趋势, 老化60 h以上的远志种子不再发芽;20％PEG-6000溶液对远志老化种子发芽指标具有促进作用, 接近正常种子的发芽指标;10％, 30％PEG-6000溶液对远志老化种子发芽指标也有一定的引发效果, 但引发效果较差.20％PEG-6000溶液引发能促进老化36 h远志幼苗株高、根长、地上部分生物量和地下部分生物量的增加.结论:该研究表明不同浓度PEG-6000溶液处理对远志老化种子有一定修复作用, 可以提高其种子活力, 但适宜浓度因种子老化时间不同而存在差异, 可为种子引发技术在远志种子贮藏上的应用提供基础数据.
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大狼把草的化学成分液质联用快速鉴定分析
目的:建立大狼把草化学成分的液质联用定性表征方法并总结裂解规律.方法:按照化学成分数据库构建-液质数据采集-数据库检索-质谱数据解析的步骤, 采用HALO C18色谱柱 (2.1 mm×150 mm, 2.7μm);0.1％甲酸水溶液 (A) -乙腈 (B) 为流动相, 梯度洗脱 (010 min, 5％25％B;1030 min, 25％45％B;3035 min, 45％70％B;3545 min, 70％90％B;4560 min, 90％100％B;6070 min, 100％B) .柱温25℃, 流速0.2 mL·min-1, 进样量5μL;质谱条件为采用ESI离子源, 在正离子模式下进行检测, 对大狼把草中的橙酮、查尔酮、苯丙素等进行分析.结果:从大狼把草的提取液中, 鉴定出黄酮类22个, 苯丙素类5个, 有机酸2个, 碳烯1个, 发现在正离子模式下, 绿原酸及其衍生物会有规律的断裂产生[奎尼酸+H-H2O]+, [咖啡酰基+H]+, 多羟基酸会脱水裂解.黄酮类化合物, 主要会丢失CO, H2O等碎片, 橙酮类化合物会产生286, 270, 230等碎片离子.结论:采用高效液相-飞行时间液质联用法可以快速有效的对中药中已知化学成分进行定性分析, 为大狼把草的物质基础表征提供质谱依据.
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全国中药资源普查丹参药材农药残留检测
目的:了解全国范围内丹参农药残留现状, 并为制定丹参农残含量标准提供数据基础.方法:建立检测144种农药残留的气相色谱-串联质谱法和85种农药残留的液相色谱-串联质谱法, 测定全国第四次中药资源普查所收集的来源于安徽、山西、河南、河北及四川省的40批丹参样品中农药残留量, 并根据2015年版《中国药典》一部丹参项下含量测定的规定对其丹参酮类和丹酚酸B成分进行含量测定, 应用SAS 8.2软件分析研究丹参农药残留量与丹参酮类、丹酚酸B成分含量的相关性.结果:40批丹参样品中有20批检测出有农药残留, 均为非禁用或限用农药.其中19批检出草克净/嗪草酮, 3批检出氟乐灵, 8批丹参样品丹参酮类和丹酚酸B成分含量不符合2015年版《中国药典》规定;草克净/嗪草酮的残留量与丹参酮类、丹酚酸B均没有相关性.结论:丹参药材栽培过程中存在非常普遍的农药使用情况, 使用地区广泛, 农药的种类趋于一致.草克净/嗪草酮的使用对丹参中丹参酮类、丹酚酸B的生成和代谢没有影响.该研究为全国范围内丹参农药残留现状及为丹参农残含量标准制定提供了数据支撑和科学依据.
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基于5种特征性成分综合评价二至丸的质量
目的:建立二至丸中5种特征性成分特女贞苷、红景天苷、酪醇、木犀草素、蟛蜞菊内酯同时检测的含量测定方法, 并据此评价所收集的11批二至丸样品的质量.方法:采用Phenomenex Gemini C18色谱柱 (4.6 mm×250 mm, 5μm), 流动相乙腈 (A) -0.2％甲酸水溶液 (B) 梯度洗脱 (015 min, 10％30％A;1525 min, 30％33％A;2530 min, 33％A) .流速1 mL·min-1, 检测波长225 nm和349 nm, 柱温30℃.结果:5个成分的分离度良好, 红景天苷、酪醇、特女贞苷、木犀草素和蟛蜞菊内酯的线性范围依次为202.5512 153, 84.555 073, 244.3014 657.72, 2.56153.72, 2.32139.2 ng.加样回收率平均值处于95.61％103.47％, RSD均＜2.0％.结论:建立的含量测定方法简便、准确, 重复性好, 可用于市售二至丸样品的含量测定和质量控制.11批样品中5个特征性成分含量差异较大, 特女贞苷含量差异＞60倍, 低值0.15 mg·g-1, 高值10.22 mg·g-1, 其原因可能与原料质量和执行标准等因素有一定关系.
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基于近红外光谱技术评价不同等级渣驯的质量
目的:采用近红外光谱技术 (NIRS) 结合统计学手段, 探讨渣驯与其代用品的快速鉴别方法以及渣驯质量的评价方法.方法:参考传统外观质量分级将渣驯药材及其代用品分为4个等级, 测定不同等级渣驯及代用品中黄腐酸的含量, 分析其与渣驯质量分级的相关性;采集近红外光谱, 结合主成分分析, 探讨质量等级与近红外光谱的定性关系.采用偏小二乘法 (PLS) 建立近红外定量分析模型, 考察渣驯及其代用品质量快速评价的可行性.结果:黄腐酸含量与渣驯外观质量分级无明确相关性;Ⅳ级 (代用品) 近红外光谱与其他等级渣驯能显著分开, 而Ⅰ, Ⅱ, Ⅲ等级渣驯的近红外光谱辨析度不高, 但具有一定的变化规律;所建立的渣驯中黄腐酸的近红外定量分析模型的决定系数 (R2) =80.13％, 交互验证误差均方根 (RMSECV) =0.047, 表明该模型预测效果较好;验证集R2=11.91％, 预测误差均方根 (RMSEP) =0.12, 相对分析误差 (RPD) =1.12, 说明模型稳健性与分辨力不理想.结论:近红外光谱结合主成分分析能够为渣驯与其代用品的快速鉴别提供参考;黄腐酸不能作为渣驯质量优劣的评价指标, 有必要进一步探索渣驯质量标志物, 用以评价该药材的质量.
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经典名方羌活胜湿汤的古代文献分析
通过系统整理、分析记载羌活胜湿汤的中医古籍文献,梳理羌活胜湿汤的历史发展源流, 为经典名方的临床应用及药物研发提供古代文献证据支持.采用文献计量学的方法, 搜集中医古籍文献中羌活胜湿汤的相关数据, 统计分析方剂组成、主治病证、用药剂量、制法等.共获相关古代文献有效数据206条, 涉及中医古籍101种.分析后发现羌活胜湿汤早见于金代医家李东垣所著《内外伤辨惑论》, 方剂组成为羌活、独活、藁本、防风、甘草、川芎、蔓荆子7味药材, 主要治疗腰痛、项强、头痛、肩背痛等疼痛类病证 (症) .后世记载的羌活胜湿汤大多遵从《内外伤辨惑论》中的方剂组成、用量、主治, 并延伸和扩展了该方的临床应用.
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