中国肿瘤生物治疗杂志
Chinese Journal of Cancer Biotherapy 중국종류생물치료잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中国免疫学会,中国抗癌协会
- 影响因子： 0.69
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 1007-385X
- 国内刊号： 31-1725/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
-
慢病毒介导的RNAi对卵巢癌细胞增殖及间皮素表达的影响
目的:构建间皮素(mesothelin,MSLN)RNAi重组慢病毒质粒,探讨其对卵巢癌OVCAR-3细胞 MSLN的表达及细胞增殖的影响.方法:根据MSLN基因信息,设计了4个小干扰序列和1个阴性对照序列,利用慢病毒质粒载体pRNAT-U6 2/Lenti构建了5个重组质粒并进行了慢病毒包装,分别为LV-MSLN-negative、LV-MSLN-shRNA2、LV-MSLN-shRNA3、LV-MSLN-shRNA4;感染OVCAR-3细胞后,Western blotting和荧光免疫组化检测干扰效率,选择干扰效率高的质粒载体进行慢病毒大量包装;感染卵巢癌细胞OVCAR-3后,用细胞增殖实验和平板克隆形成实验检测细胞增殖的变化.结果:测序结果证明5种质粒载体的插入序列完全正确,鉴定证明慢病毒包装成功.慢病毒感染OVCAR-3细胞后,Western blotting证实重组慢病毒LV-MSLN-shRNA4的干扰效率高,对MSLN蛋白表达的抑制达90%.荧光免疫组化的共聚焦照片显示干扰组(OVC-shRNA)定位于细胞膜的MSLN蛋白表达明显弱于阴性对照组(OVC-neg)和空白对照组(OVC).OVC-shRNA组细胞增殖[(11.2±1.3)×105]显著慢于OVC-neg组[(20.5±2.5)×105]和OVC组[(21.9±2.3)×105] (P＜0.05).OVC-shRNA组克隆形成率为(15.2±2.1)%,明显低于OVC-neg组[(27.9±2.5)%]和OVC组[(28.8±3.1)%](P＜0.05).结论:成功构建MSLN RNAi重组慢病毒质粒LV-MSLN-shRNA4,它能有效抑制卵巢癌OVCAR-3细胞的MSLN表达及细胞增殖,为进一步研究MSLN应用于肿瘤基因治疗奠定了基础.
-
Hedgehog 信号通路对某些消化道肿瘤细胞生长的调节作用
目的:研究Hedgehog信号通路成员Shh、patched(PTCH)、smoothened (Smo)和Gli-1在结肠癌和胰腺癌细胞株以及人结肠腺瘤组织细胞中的表达情况,并探讨Smo受体特异性小分子抑制剂环靶明(cyclopamine)对这些肿瘤细胞生长的影响.方法: 体外培养结肠癌细胞LS174T、HCT116、SW116、CT26和胰腺癌细胞BxPC3,并肠镜下摘取2例结肠腺瘤组织标本,提取细胞株和腺瘤组织总RNA,用RT-PCR扩增Shh, PTCH, Smo, Gli-1基因;使用MTT法检测环靶明在体外对这些肿瘤细胞生长的抑制作用.结果: 在SW116、 CT-26、 BxPC3细胞和2例结肠腺瘤组织中Shh、PTCH、Smo和Gli-1均有不同程度的表达, 而在HCT116和LS174T细胞中未能扩增出PTCH和(或)Smo基因的mRNA; 环靶明对这些肿瘤细胞的生长有一定的抑制作用,且对Smo基因阳性表达细胞株的抑制作用更显著.结论: Hedgehog信号通路成员Shh、PTCH、Smo和Gli-1在结肠癌、胰腺癌及结肠腺瘤细胞中有不同程度的表达,环靶明对Smo高表达细胞的生长有明显抑制作用;提示该信号通路可能在部分消化道肿瘤细胞中被活化.
-
PUMA基因转染胰腺癌AsPC-1细胞增强对5-FU致凋亡的敏感性
目的:探讨PUMA基因转染是否增强胰腺癌AsPC-1细胞对5-FU致凋亡的敏感性.方法: 采用脂质体转染法将PUMA-pCEP4和空载体pCEP4质粒转染入胰腺癌AsPC-1细胞中,G418筛选阳性细胞.将系列浓度(0.01～100 μmol/L)的5-FU 分别作用于AsPC-1、AsPC-1/PUMA和AsPC-1/pCEP4细胞72 h,MTT法测定各组细胞的存活率并计算IC50, FCM、断裂DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL法检测细胞凋亡情况,Western blotting检测各组细胞PUMA蛋白表达的变化.结果: AsPC-1、AsPC-1/PUMA和AsPC-1/pCEP4细胞的5-FU IC50分别为(12±1.9)、(1.6±0 4)和(10.4±1.6)μmol/L,AsPC-1/PUMA细胞对5-FU作用的敏感性增加了7.5倍.5-FU以剂量依赖方式诱导AsPC-1细胞凋亡,但对AsPC-1/PUMA细胞所诱导的凋亡比AsPC-1和AsPC-1/pCEP4 更明显.低浓度5-FU(0.1 μmol/L)轻微引起AsPC-1/pCEP4[(1.14±0.28)%]和AsPC-1细胞凋亡[(0.9±0.23)%],但能诱导AsPC-1/PUMA细胞明显凋亡[(6.47±1.42)%];高浓度5-FU (1μmol/L)诱导各组细胞凋亡,但AsPC-1/PUMA细胞凋亡率[(34.54±9.36)%]明显高于AsPC-1[(12.8±3.74)%]和AsPC-1/pCEP4细胞[(15.8±5.15)%],差异均有统计学意义(P<0.01);FCM、断裂DNA琼脂糖凝胶电泳和TUNEL方法检测显示相同的结果.PUMA蛋白在AsPC-1/PUMA细胞中的表达明显高于AsPC-1和AsPC-1/pCEP4细胞.结论: PUMA基因转染明显地增强了胰腺癌AsPC-1细胞对5-FU致凋亡作用的敏感性.
-
Ag85A和Ag85B DNA疫苗对大鼠膀胱癌免疫治疗的效果
目的:探讨Ag85A和Ag85B DNA疫苗对大鼠膀胱癌免疫治疗的效果.方法: 致癌剂N-甲基亚硝基脲(methyl nitrosourea,MNU)膀胱灌注雌性Wistar大鼠制备膀胱癌模型.将建模成功的48只大鼠随机分为生理盐水组、空白质粒组、卡介苗组、Ag85A DNA疫苗组、Ag85B DNA疫苗组、Ag85A+Ag85B DNA疫苗组(每组各8只),建模后第7、14、21天于大鼠右后肢肌内注射相应药物.第28天处死大鼠,流式细胞仪检测各组大鼠脾脏细胞的CD4+ 和CD8+ T细胞亚群数量并计算CD4+/CD8+ 比值; ELISA法检测大鼠血清中IFN-γ分泌水平;剥离膀胱肿瘤进行组织病理学检查.结果: 成功建立大鼠膀胱癌模型,致瘤率100%.经疫苗治疗后,Ag85A组、Ag85B组和Ag85A+Ag85B组膀胱肿瘤体积均有所减小、病理分级也有所减轻,但效果不及卡介苗组.Ag85A组、Ag85B组、Ag85A+Ag85B组和卡介苗组CD4+T细胞亚群数量分别为(17.27±2 95)%、(23.15±1.56)%、(30.80±1.83)%、(38.05±1.48)%;CD8+ T细胞亚群数量分别为(9.03±1.06)%、(10.28±0 39)、(11 29±0 74)、(13.14±1.24);CD4+/CD8+ 比值分别为(1.90±0.10)、(2.25±0.08)、(2.73±0.19)、(2.97±0 23);血清IFN-γ含量分别为(96.94±12.38)、(131.03±26.68)、(179.20±28.88)、(240.53±32.17)pg/ml;与生理盐水、空白质粒组相比,Ag85A组、Ag85B组、Ag85A+Ag85B组能够显著提高以上4项检测指标(P<0.01),但均低于卡介苗组;Ag85A+Ag85B组效果强于Ag85B组、更强于Ag85A组,差别有统计学意义(P<0.05). 结论: 应用Ag85A和Ag85B DNA疫苗均可提高膀胱癌大鼠的免疫功能,其效果为Ag85A+Ag85B >Ag85B>Ag85A,但总体上都达不到卡介苗的抗癌免疫效果.
-
自体CD3AK细胞治疗晚期恶性肿瘤的近期疗效
目的:探讨抗CD3单克隆抗体激活的杀伤细胞(anti-CD3 monoclonal antibody activated killer cell, CD3AK)对晚期恶性肿瘤的疗效和患者免疫功能的影响.方法: 选取山东大学附属千佛山医院55例实体瘤患者和12例淋巴瘤患者,分离患者外周血单个核细胞,采用抗CD3Ab、IL-2等诱导自体CD3AK细胞,以CD3AK细胞对患者自体回输.并对患者治疗前后的T细胞亚群和NK细胞(CD16+CD56+)水平进行测定.结果: 晚期恶性肿瘤患者输注自体CD3AK细胞1个疗程后,实体瘤组治疗有效率为25.45%,临床获益率为74.54%;淋巴瘤组有效率为83.33%,临床获益率为91.67%;治疗后两组患者T细胞亚群中CD8+ 下降(P<0.05),CD3+、CD4+细胞及CD4+/CD8+比值及NK细胞计数较治疗前显著升高(P<0.05).结论:自体CD3AK细胞能使晚期恶性肿瘤患者T细胞亚群比例失调和功能低下的状况得到不同程度的改善,有效地控制肿瘤,而且安全性好,无明显不良反应.
-
CD133免疫磁珠分选脐血内皮祖细胞的培养及鉴定
目的:建立具备高效增殖、血管生成与迁移能力的脐血内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)分离培养鉴定方法.方法: 应用免疫磁珠分选纯化脐血单个核细胞中的CD133+细胞,体外EGM-2 MV培养液培养扩增,通过形态学、细胞表面标志及细胞功能鉴定EPCs,并与脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)作比较.结果: EPCs分离培养7 d左右开始出现小集落,21 d左右集落扩大、相互融合,并呈现出典型铺路石样改变;培养14 d左右,约90%的细胞免疫荧光Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1双阳性,阳性率达90%.CD133 和CD34 阳性率从86.04%降至2.96%、90.88%降至2 99%,而CD31阳性率从1.12%升至99.88%.在增殖、血管生成与迁移能力上比较,EPCs明显优于HUVECs(P<0.05).结论: 通过CD133免疫磁珠分选脐血单个核细胞,可培养出具有高效增殖、血管生成与迁移能力的EPCs.
-
14株肿瘤细胞P53基因突变的检测
目的:检测14株肿瘤细胞 P53基因的突变情况. 方法:根据 P53基因5～8外显子之间的内含子序列设计引物,分别对人肺癌、脑胶质瘤、肝癌、胃癌、前列腺癌、乳腺癌、结肠癌、脉络膜恶性黑素瘤、视网膜成细胞瘤等9种肿瘤14株细胞的 P53基因5、6、7、8的外显子进行PCR扩增反应.琼脂糖凝胶电泳鉴定PCR产物;DNA测序,并与正常的DNA序列比较;抽提肿瘤细胞蛋白进行Western blotting检测P53蛋白的表达. 结果:14株肿瘤细胞 P53基因热变区5、6、7、8外显子的扩增产物经电泳鉴定与预期相同.DNA测序结果表明,14株肿瘤细胞中8株存在P53基因5～8外显子的突变,其中肺癌细胞H1299、肝癌细胞Hep3B、肝癌细胞SMMC7721、脉络膜恶性黑素瘤细胞OCM-1检测到以前未报道过的突变;突变主要发生在外显子的编码序列,多数为单个碱基替换导致的错义突变,也有部分表现为同义突变;2株正常细胞未检测到突变.Western blotting检测显示,有基因突变的8株肿瘤细胞中仅6株有P53蛋白表达;所有 P53基因未突变的肿瘤细胞株和正常细胞株均未检测到 P53蛋白. 结论: 检测的14株肿瘤细胞中有8株细胞P53基因热变区存在突变, 其中4株检测到以前未报道过的突变;2株正常细胞未发现P53基因突变.
-
重组改构人TNF逆转卵巢癌耐药细胞株SKOV3/DDP的耐药性及其机制
目的:探讨重组改构人肿瘤坏死因子(recombinant mutant human tumor necrosis factor, rmh-TNF)体外逆转人卵巢癌多药耐药细胞株SKOV3/DDP的耐顺铂(cisplatin,又称DDP)效应及其可能存在的作用机制.方法: 体外培养人卵巢癌多药耐药细胞株SKOV3/DDP,以MTT法检测rmh-TNF对此耐药株的细胞毒作用,确定其对此细胞株的无毒剂量;同法测定无毒剂量rmh-TNF干预后SKOV3/DDP对顺铂耐药性的变化,通过流式细胞术检测rmh-TNF干预不同时间段SKOV3/DDP细胞株中GST-π蛋白的表达,RT-PCR方法分析rmh-TNF处理SKOV3/DDP细胞前后MDR1基因的表达水平.结果: (1)50～122 34 U/ml rmh-TNF对SKOV3/DDP细胞增殖无明显抑制作用(细胞存活率均﹥90%),因此选用100 U/ml 作为逆转剂量(无毒剂量);(2)单用DDP 24、48、72 h 的IC50为(23.29±0.43)、(8.97±0.69)、(6.43±0.79)μg/ml,联合100 U/ml rmh-TNF和DDP用药使SKOV3/DDP的IC50分别降至(19.50±0.50)、(4.34±0.43)、(2.44±0.02)μg/ml,逆转倍数分别为1.19、2 06、2.64倍;(3)100 U/ml rmh-TNF干预0、24、48、72 h后SKOV3/DDP细胞内GST-π蛋白的表达随作用时间延长降低,MDR1基因的表达随作用时间延长降低.结论: rmh-TNF对SKOV3/DDP有逆转耐药作用,其机制可能与下调GST-π蛋白及MDR1基因表达有关.
-
Pin1:肿瘤形成的催化分子和潜在的治疗靶点
肽基脯氨酰异构酶1(peptidyl-prolyl isomerase 1,Pin1)能特异性地催化磷酸化的丝/苏-脯氨酸基序发生异构,改变底物蛋白的构象,调节底物蛋白的功能.Pin1含有两个结构功能域:一个是N端的色氨酸-色氨酸中心区WW,另一个是C端的肽基脯氨酰异构酶PPlase活性区.Pin1在非肿瘤组织中呈低表达或无表达,但在多种肿瘤组织中呈过表达,并受到以E2F(腺病毒E2启动子相关细胞转录因子)为主的转录水平的调节.Pin1作用于多种底物如p53、c-Jun、cyclinD1等,通过催化异构改变底物的结构和功能,促进细胞增殖和肿瘤形成,阻断它的表达可以抑制肿瘤细胞的增殖,促进调亡.
-
非清髓性异基因造血干细胞移植在实体瘤治疗中的应用
异基因干细胞移植用于实体瘤的治疗有很大的潜力.传统的清髓性造血干细胞移植采用大剂量化疗药物对受者进行预处理,虽然起到一定的杀伤肿瘤细胞作用,但增加了移植相关死亡率(transplant-related mortality,TRM).随着对非清髓性预处理的深入研究,人们将非清髓性造血干细胞移植用于实体瘤的治疗.与清髓性干细胞移植比较,非清髓性移植减轻了TRM,且拓宽了移植适应证.移植物抗宿主病(graft versus host disease, GVHD)是异基因移植后出现的毒性反应,甚至成为致命性的并发症.移植物抗肿瘤(graft versus tumor, GVT)效应是异基因移植治疗实体瘤的关键,而GVT效应常伴随GVHD的出现.因此,如何在保留GVT效应的同时降低GVHD是我们所面临挑战.目前,通过改变预处理方案、加强对移植物的处理、改变免疫抑制疗法等3种策略使用于GVHD的防治,取得了一定效果,为异基因造血干细胞移植治疗实体瘤带来了广阔前景.
-
CD133在实体肿瘤干细胞研究中的作用
肿瘤干细胞理论的提出使靶向性杀伤肿瘤干细胞成为可能,而肿瘤干细胞的研究关键是寻找特异性表面分子标志物.表面黏附分子CD133是一种跨膜糖蛋白,其表达的一个显著特点就是,随着细胞的分化迅速下调,这使得它成为一个分离和鉴定干细胞和祖细胞的独特分子标志.作为理想的分子标志,CD133在脑肿瘤、前列腺癌、结肠癌、喉癌和肝癌等多种实体肿瘤干细胞分离研究中发挥着重要作用.多种实验证实,CD133+细胞与肿瘤信号转导、肿瘤免疫逃逸、药物耐受和放疗抵抗均有相关性,CD133+细胞可望成为肿瘤治疗的新靶点.
-
肿瘤相关基因NDRG2的研究进展
NDRG2隶属于NDRG家族(N-myc down-stream regulated gene family),是一种与细胞增殖和分化相关的基因,参与了肿瘤的发生、发展和转归 ,目前功能定位于抑癌候选基因.将NDRG2基因转染入U373和U138胶质瘤细胞系后,明显抑制了胶质瘤细胞的增殖;在结肠癌及高危腺瘤中,NDRG2 mRNA表达量明显低于正常组织,同时随着Dukes′分级的增高,NDRG2表达有下降趋势.随着相关研究的不断深入,该基因的其他功能也逐渐被揭示:与组织胚胎的发育和细胞的分化密切相关,与神经系统的发育及其疾病的发生相关,参与了醛固酮对肾远曲小管和集合管的水钠代谢调节作用,以及多种应激反应例如:DNA损伤、缺氧等.目前其转录调控机制及其相互作用分子研究表明,NDRG2受c-Myc负调控且该调控需要Miz-1参与,同时NDRG2还是HIF-1的靶基因.维尔姆斯肿瘤基因(WT1)可以直接或间接诱导NDRG2表达等.但NDRG2生物学功能至今还尚未完全明确,值得进一步探索.
-
CD137介导的共刺激途径在肿瘤免疫治疗中的应用
应用免疫调节分子增强抗肿瘤免疫反应是治疗癌症的新策略.CD137介导的信号通路是一重要的共刺激途径.CD137属于肿瘤坏死因子受体超家族成员,表达在活化的T细胞、自然杀伤细胞、单核细胞表面,通过连接其天然配体CD137L或用CD137激动性单克隆抗体激活CD137,既能提供共刺激信号激活T细胞,使T细胞活化增殖并分泌细胞因子,同时它介导的反向共刺激信号诱导抗原提呈细胞(antigen preseting cell,APC)增殖并分泌细胞因子.动物实验表明,干预CD137共刺激途径可调节T细胞和APC的功能产生抗肿瘤免疫作用,单独干预CD137共刺激途径或与其他治疗方式联用将成为肿瘤免疫治疗的新方式.
-
Jagged-1在肿瘤新生血管形成中的双重作用
Jagged-1是存在于哺乳动物细胞膜上Notch受体的主要配体之一, 在许多组织的生长发育中起着重要作用.研究表明Jagged-1-Notch信号参与肿瘤新生血管化,表现为诱导血管特异性酶活化促进内皮细胞分化,导致内皮-间质细胞移行促进血管发育;上调内皮细胞标志分子如血管内皮钙黏附蛋白、血小板内皮细胞黏附分子-1、血管生成素受体-2、纤维连接蛋白、血小板源生长因子受体和α-平滑肌肌动蛋白等的表达,促进内皮和平滑肌细胞分化;与TGF-α和EGF等生长因子激活的通路共同作用促进血管样结构的形成.但也发现Jagged-1-Notch信号通路下游的HERP1通过阻止myocardin而抑制血管平滑肌细胞标志蛋白SM-MHC和平滑肌22-α的表达,同时通过干扰血清应答因子与SM-MHC中含CArG的启动子结合而抑制血管平滑肌细胞的分化;Jagged-1信号通过p21Cip1抑制cyclinD和cdk4的核定位以及Rb蛋白的磷酸化,从而抑制血管内皮细胞的增殖.Jagged-1所呈现的反向双重作用机制仍有待阐明.
-
骨肉瘤生物治疗基础研究的现状
随着新辅助化疗的广泛应用和手术技术的进展,骨肉瘤患者的5年生存率得到了很大提高,但受肿瘤细胞耐药机制和免疫逃逸的影响,目前骨肉瘤的疗效处于"瓶颈"状态.近期的研究显示,骨肉瘤细胞中存在着一些表达间充质干细胞和胚胎干细胞表面标志和表型的干细胞样肿瘤细胞,它们具有自我更新、广泛增殖的特点;同时,自骨肉瘤细胞分选出表达高水平ABCG2、能在NOD/SCID小鼠成瘤的SP细胞,显示骨肉瘤细胞耐药可能与SP细胞相关.研究针对上述标志物和降低ABCG2表达的治疗方法或药物,将有望进一步提高骨肉瘤的疗效.此外,研究主动和被动免疫疗法,以及针对Src蛋白酪氨酸激酶等靶点的靶向治疗也将为提高骨肉瘤的疗效提供新的途径.
-
载双歧杆菌胞外多糖纳米粒子诱导人胃癌裸鼠移植瘤细胞的凋亡
目的:制备载双歧杆菌胞外多糖纳米粒子(Bifidobacterium exopolysaccharide-loaded nanoparticles,B.EPS-NPs),探讨B.EPS-NPs对人胃癌细胞裸鼠移植瘤增殖和凋亡的影响.方法: 取Fe3O4纳米粒子和B.EPS,采用乳化高温固化法制备B.EPS-NPs.建立人源胃癌细胞(BGC-823)裸鼠移植瘤模型,接种6 d后随机分为5组,分别以生理盐水、NPs、环磷酰胺(cytoxan,CTX)、游离B.EPS及B.EPS-NPs进行灌胃治疗.观察各组瘤体的生长情况,TUNEL法检测细胞凋亡,透射电镜观察细胞超微结构,免疫组化法检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及凋亡调控基因bcl-2、bax蛋白表达水平.结果: 空载NPs和B.EPS-NPs平均粒径分别为(560±21)nm、(960±32)nm,B.EPS-NPs载药率为30%.B.EPS-NPs对移植瘤的抑瘤率为(46.4±2.94)%,高于游离B.EPS组的(32.0±1.62)%和NPs组的(4.9±0.98)%.B.EPS-NPs组移植瘤细胞凋亡指数明显高于B.EPS组[(66.8±5.58)% vs (41.3±4.26)%](P<0 .01).透射电镜观察到B.EPS-NPs治疗后的移植瘤细胞核染色质凝集成块状,出现了典型的凋亡特征.与B.EPS相比,B.EPS-NPs组PCNA及bcl-2的表达水平有所降低(P<0.01),bax的表达水平有所提高(P<0 .01).结论: 纳米粒子运载B.EPS增强了后者对胃癌细胞(BGC-823)移植瘤的增殖抑制作用和促凋亡作用,提高了B.EPS的抗肿瘤活性.
-
肿瘤特异增殖腺病毒CNHK200-hEndo的构建及其抗裸鼠肺癌移植瘤疗效
目的:构建一种携带抗肿瘤血管生成基因Endostatin的新型肿瘤基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo,观察其对人肺癌细胞裸鼠移植瘤的治疗效果.方法:克隆人抗血管生成基因Endostatin, 利用病毒重组技术将该基因插入肿瘤特异性增殖腺病毒CNHK200的基因组中,扩增并纯化CNHK200-hEndo病毒.建立裸鼠肺癌细胞移植瘤模型,观察CNHK200-hEndo抗肿瘤的效果,并与非增殖病毒Ad-hEndo对照.结果:成功构建一种新型的基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo,其E1b55kDa蛋白表达缺失.CNHK200-hEndo能在肿瘤细胞内大量增殖并高效表达Endostatin蛋白,表达量明显高于非增殖病毒Ad-hEndo(P<0.05).动物实验证实,CNHK200-hEndo对人类肺癌细胞的裸鼠移植瘤模型具有抑制肿瘤生长的疗效,与Ad-hEndo和空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论:构建的基因-病毒治疗系统CNHK200-hEndo能在肺癌细胞中增殖复制,提高Endostatin蛋白的表达,明显抑制肺癌细胞移植瘤的生长.
-
西妥昔单抗联合mIFL治疗15例奥沙利铂耐药性转移性结直肠癌的疗效
目的:观察西妥昔单抗联合mIFL治疗15例奥沙利铂耐药性转移性结直肠癌的疗效及安全性.方法:15例经病理或细胞学诊断的奥沙利铂治疗无效或失败的晚期结直肠癌患者,西妥昔单抗首剂400 mg/m2,第1周,随后每周1次250 mg/m2,3周为一疗程,西妥昔单抗先于化疗药物使用,均联合mIFL方案治疗.结果:CR 2例,PR 3例,SD 6例,PD 4例,RR为33.33%,DCR为73 33%.TTP为3~48周,中位TTP17周.常见的毒性反应为痤疮样皮疹、腹泻、恶心、呕吐.结论:西妥昔单抗联合mIFL治疗奥沙利铂耐药性转移性结直肠癌具有较高的总体疾病控制率,且耐受性好,不良反应多为轻中度,可作为一线奥沙利铂治疗失败转移性结直肠癌的推荐方案.
-
人P21WAF1/CIP1启动子荧光素酶真核表达载体的构建
目的:构建含人P21WAF1/CIP1基因启动子的表达载体pGL3- P21p.方法:以全血总RNA为模板,经RT-PCR扩增P21WAF1/CIP1基因启动子,并将其克隆到T-easy载体,测序分析,然后经酶切再克隆到pGL3-basic,构成重组真核表达载体pGL3- P21p.将pGL3- P21p转染到乳腺癌细胞株MCF7中,并检测细胞中荧光素酶的活性.结果:经测序、酶切等检测证实重组真核表达载体pGL3- P21p构建成功,荧光素酶活性检测显示P21WAF1/CIP1基因启动子对荧光酶基因表达起到了正调控作用.结论:P21WAF1/CIP1启动子荧光素酶真核表达载体的成功构建为进一步研究P21WAF1/CIP1基因启动子的表达调控奠定了基础.
-
硼替佐米治疗恶性浆细胞病的临床观察
目的:观察硼替佐米(bortezomib)治疗恶性浆细胞病的临床疗效和不良反应.方法:2007年2-10月复旦大学 附属华山医院血液科收治的10例恶性浆细胞病患者,接受VD方案(硼替佐米1.1～1.3 mg/m2,第1、4、8、11天;地塞米松30 mg/d,第1~4天,第8~11天)、VDT方案(VD方案加沙利度胺100～150 mg/d,第1~28天)或PVADT方案(硼替佐米1.1～1.3 mg/m2,第1、4、8、11天;地塞米松30 mg/d,第1~4天,第8~11天;长春地辛 1 mg/d,第1~4天,脂质体多柔比星20 mg,第1、3天;沙利度胺100 mg/d,第1~28天)化疗,4周为1疗程. 结果:10例患者均在第1疗程后显示治疗反应,1例获得非常好的部分缓解(very good partial remission,VGPR)、9例获得部分缓解(partial remission,PR),总有效率为100%;坚持治疗的9例患者,现2例处于完全缓解(complete remission,CR)、1例VGPR、6例PR,总有效率为100%.不良反应主要包括末梢神经炎、血小板减少、胃肠道反应、乏力以及潜在的免疫抑制作用. 结论:硼替佐米对于恶性浆细胞病有显著疗效;存在一些不良反应,但患者耐受良好.
-
重组抗HER2融合蛋白基因ScFv/tBid对骨肉瘤E10细胞的促凋亡作用
目的:构建抗HER2重组融合蛋白基因ScFv/tBid,并探讨其对骨肉瘤E10细胞的促调亡作用.方法:通过间接免疫荧光染色、流式细胞仪(FCM)检测E10细胞膜表面HER2的表达.将抗HER2单链抗体基因e23sFv与铜绿假单胞菌外毒素PE的转膜结构域基因(PEⅡ)和tBid基因连接,构建抗HER2重组融合蛋白基因ScFv/tBid,将其克隆入真核表达载体pCMV中构建重组pCMV-ScFv/tBid载体,转染骨肉瘤E10细胞.间接免疫荧光法检测目的蛋白表达和细胞形态学变化,Annexin V染色流式细胞术及TUNEL法检测E10细胞的凋亡情况.结果:流式细胞仪检测到E10细胞膜表面有HER2的表达.成功构建重组融合蛋白基因质粒 pCMV-ScFv/tBid.重组质粒转染E10细胞后,间接免疫荧光双标记染色检测到E10细胞中tBid的过表达;细胞色素C在细胞质中出现;细胞出现明显的固缩、核浓缩等形态特征.Annexin V染色后流式细胞仪检测可见实验组细胞凋亡率较对照组明显升高(16.1%vs 4.5%);TUNEL染色显示,E10细胞出现典型的凋亡特征.结论:重组抗HER2融合蛋白基因ScFv/tBid可以在转染的骨肉瘤E10细胞中表达,并诱导骨肉瘤细胞发生凋亡.
-
IFN-γ增强TNF相关凋亡诱导配体对骨巨细胞瘤细胞的抑制
目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)对人骨巨细胞瘤(giant cell tumor of bone ,GCT)的作用及干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)对TRAIL抗瘤活性的影响,并探讨其影响机制.方法: 选取2003年-2006年于301医院骨科手术切除的骨巨细胞瘤新鲜标本9例,将取自标本的骨巨细胞瘤细胞分为:对照组, TRAIL组,IFN-γ组, IFN-γ诱导后加入TRAIL组,应用CCK-8法检测TRAIL、IFN-γ单独及联合作用对骨巨细胞瘤细胞的增殖抑制作用,流式细胞仪、TUNEL法分析IFN-γ对TRAIL凋亡诱导作用的影响,RT-PCR法检测IFN-γ作用前后肿瘤细胞DR4、DR5、TRAIL的表达.结果: 骨巨细胞瘤细胞对照组存活率为(98.64±0.31)%,TRAIL (100、 500、1 000 μg/L)单独作用对肿瘤细胞增殖无明显抑制作用;IFN-γ(500、1 000 U /ml)单独作用后,细胞的存活率分别为(94.05±1.89)%、(90 47±2.66)%.IFN-γ(500 U /ml)诱导24 h后与TRAIL(100、200 μg/L)联合作用,细胞的存活率分别为(84.65±2 46)%、(77.65±3.14)%.两者联合作用后流式细胞仪测得联合作用组凋亡率为(27.94±2.88)%、(38.65±2.46) %,对照组凋亡率为(1.77±0.49)%;TUNEL法测得联合作用组凋亡率分別为(19.63±3.51)%、(29.28±4.80)%,对照组的凋亡率为(1.1±0.17)%.RT-PCR 结果显示,IFN-γ作用24 h后肿瘤细胞TRAIL、DR4、DR5 mRNA表达明显上调.结论: 骨巨细胞瘤细胞对TRAIL不敏感, IFN-γ可以明显提高TRAIL诱导骨巨细胞瘤细胞凋亡的敏感性,其机制可能与IFN-γ上调TRAIL、DR4、DR5 mRNA的表达有关.
-
内皮抑素基因对裸鼠移植骨肉瘤的抑制作用
目的:探讨内皮抑素(endostatin, ES)基因对裸鼠骨肉瘤细胞UMR106移植瘤的抑制作用.方法:携带ES基因重组质粒体外扩增后,应用脂质体法转染骨肉瘤细胞UMR106,Zeocin抗性筛选得到ES-UMR106细胞.MTT法观察ES基因对肿瘤细胞增殖的影响,ELISA法检测转染后肿瘤细胞的ES分泌情况.MTT法观察ES基因对血管内皮细胞增殖能力的影响.应用ES-UMR106和UMR106细胞制作裸鼠皮下移植瘤模型,观察两组动物移植瘤生长情况、瘤组织的病理变化及肺转移的情况.结果:ES基因转染不影响UMR106细胞的增殖能力;ES-UMR106细胞可表达有生物活性的ES,转染后48 h ES在培养液中超过350 ng/ml.ES-UMR106细胞分泌的ES可明显抑制血管内皮细胞增殖.与UMR106细胞相比,ES-UMR106细胞在裸鼠接种的移植瘤生长速度缓慢、包膜完整,病理组织学显示瘤体内血管稀少,肿瘤细胞广泛坏死;UMR106细胞移植瘤裸鼠肺组织出现转移灶(2/8),ES-UMR106细胞移植瘤裸鼠无肺转移灶.结论:携带ES基因重组质粒转染骨肉瘤UMR106细胞后可抑制该骨肉瘤细胞移植瘤的生长和转移.
-
靶向survivin的siRNA对骨肉瘤细胞MG63的抑制作用
目的:探讨针对人survivin基因的siRNA对骨肉瘤细胞MG63的体内外抑制作用.方法: 合成survivin基因的RNA干涉(RNA interferance,RNAi)特异性片段,构建survivin特异性的RNA干涉载体pSiS,转染MG63细胞,G418筛选稳定转染的细胞系.细胞计数检测细胞生长情况;Western blotting检测细胞中survivin蛋白表达的变化;通过Annexin V法染色和流式细胞术检测细胞凋亡;观察裸鼠皮下MG63移植瘤的形成.结果: 成功构建了survivin基因siRNA真核表达载体pSiS,获得了稳定转染的细胞MG63/pSiS.与MG63、MG63/pSi(空质粒对照细胞)相比,MG63/pSiS细胞生长曲线十分平缓,差异有统计学意义(P<0.01);Western blotting显示,MG63/pSiS细胞中survivin蛋白表达减少,细胞凋亡率增加(P<0.01).MG63/pSiS移植瘤形成明显受到抑制.结论: Survivin特异性siRNA可明显促进骨肉瘤细胞MG63的凋亡, 抑制该肿瘤细胞体外生长和体内移植成瘤.
-
重组腺病毒介导小鼠内皮抑素对荷骨肉瘤MG-63细胞裸鼠肺转移的抑制
目的:构建携小鼠内皮抑素(endostatin, ES)基因的重组腺病毒载体,观察其对荷骨肉瘤裸鼠肺转移的抑制,探讨内皮抑素表达水平与骨肉瘤肺转移的关系.方法:构建pDC315-mEndo表达质粒,同源重组产生重组腺病毒Ad-mEndo.裸鼠右前肢皮下注射骨肉瘤MG-63细胞建立移植瘤裸鼠模型;随机分为4组:小鼠内皮抑素腺病毒(Ad-mEndo)组,携带EGFP基因腺病毒(Ad-EGFP)组, PBS组,未接种肿瘤细胞裸鼠空白对照组.各组裸鼠每周分别注射相应药物200 μl,连续5次,观察各组动物移植瘤体积、瘤组织病理,ELISA法检测各组裸鼠血ES水平;7周后处死动物,观察有无肺转移及肺转移灶病理.结果:Ad-EGFP组肿瘤体积为(1.53±0.05) cm3,PBS组为(1.56±0.07) cm3, Ad-mEndo组为(0.91±0 .03) cm3,Ad-mEndo治疗的抑瘤率达40.7%.Ad-mEndo组裸鼠血内皮抑素表达水平明显高于Ad-EGFP组和PBS组(P<0.05).Ad-mEndo组裸鼠肺部未发现肿瘤转移灶,其他两组肺部见大量散在转移灶,肺转移率分别为80%和90%.未发生肺转移裸鼠的ES水平显著高于发生肺转移的裸鼠(P<0.05).结论:腺病毒介导的小鼠内皮抑素显著抑制了荷骨肉瘤裸鼠肺转移,内皮抑素表达水平与肺转移有着直接的关系.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 01 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 |
| 2005 | 01 02 03 04 |
| 2004 | 01 02 03 04 |
| 2003 | 01 02 03 04 |
| 2002 | 01 02 03 04 |
| 2001 | 01 02 03 04 |
| 2000 | 01 02 03 04 |
