两种中药提取物相关成分对HCV聚合酶的作用研究
摘要： 目的 构建HCV聚合酶基因的重组原核表达质粒后,研究了获得高效表达聚合酶蛋白的适条件,同时摸索表达产物的纯化方法以及佳变性和复性条件,研究建立细胞外丙型肝炎病毒聚合酶复制模型使用的HCV聚合酶作用模板及酶浓度的佳浓度,为筛选药物创造条件.方法 使用高保真PfuDNA聚合酶进行反转录及套式PCR扩增,从我国HCV RNA阳性病人血清中扩增出HCV NSSb RNA聚合酶全长基因序列,构建了原核表达载体pET3OaNSSb等.在多个载体中选取pET-30a作为表达载体,选择各种诱导表达条件.进一步利用Ni2+金属离子螯和亲和层析将其纯化,对该酶蛋白的变性和复性条件进行研究.利用DNA-BAND培养板96孔板,建立生物素标记检测HCV NS5b聚合酶活性的细胞外分子模型.同时,摸索了聚合酶作用模板以及酶浓度对聚合酶模型的影响的相关条件.结果 测序及读码框架分析结果表明得到相关HCV NS5b RNA聚合酶全基因序列,在佳表达条件下,诱导表达融合蛋白(65×103),得到了纯度大于92.83％的酶蛋白,研究确定了HCV聚合酶作用模板及酶浓度的佳条件.结论 HCV聚合酶的高效表达和有效纯化,以及HCV聚合酶作用模板及酶浓度的佳条件研究,为建立细胞外丙型肝炎病毒聚合酶复制模型及筛选药物奠定基础.
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支气管哮喘患儿血清心肌酶活性的变化及临床意义
目的 探讨不同哮喘状态下,心肌酶的改变及临床意义.方法 选择 3～12 岁的儿童作为研究对象,将他们分为正常对照组(45 例)、轻度哮喘组(37 例)、中度哮喘组(29 例)、重度哮喘组(13 例)和缓解期组(25 例)5 组,用全自动生化仪测定上述 5 组儿童血清心肌酶水平.结果 5 组儿童血清心肌酶测定结果显示:中重度哮喘组心肌酶在比例和水平上较其他组明显升高,而且病情越重升高越明显.结论 中重度哮喘患儿的心肌酶升高提示这些患儿存在心肌受损,需加强监护和治疗.
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两种前路术式治疗单节段脊髓型颈椎病的对比研究
目的 了解两种不同的颈椎前路减压植骨融合术治疗单节段脊髓型颈椎病的疗效.方法 2004 年 6 月～2006 年 6 月,共收治 37 例单节段脊髓型颈椎病,其中 22 例行前路减压植骨加钛板内固定术,15 例行前路减压加 PEEK-cage 内植骨融合术.随访 8～27 个月,平均 11 个月.SPSS11.5 统计软件对两术式疗效及融合率进行 Chi-square test 统计分析.结果 两组植骨融合率均为 100% 且无供骨区并发症和椎间盘退变及椎间高度丢失.两术式疗效及融合率差异无统计学意义(P＞0.05).结论 颈椎病前路手术提高疗效的关键操作是彻底减压,两种不同方式的颈椎前路减压融合术各有其优点,但是 PEEK-cage 内植骨融合术手术并发症少,操作相对简单,术后可获得即刻稳定,显著提高融合率.
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野生绞股蓝复方预防高胆固醇饵料兔肝纤维化研究
目的探讨野生绞股蓝复方对高胆固醇饵料兔肝纤维化的预防作用.方法实验兔分为A组(草食)、B组(高胆固醇饵料+野生绞股蓝复方)、C组(高胆固醇饵料+辛伐他丁)、D组(高胆固醇饵料)4组.比较饲养前后组内及饲养后组间透明质酸(HA)、层黏蛋白(LN)、前胶原Ⅲ(PCⅢ)、血脂、肝功能的变化.结果饲养4个月后B组HA为(130.1±8.2)ng/ml,LN为(154.2±14.1)ng/ml,PCⅢ为(24.4±7.1)ng/ml,与饲养前比较差异有显著性(P＜0.05);C组HA为(240.2±14.1)ng/ml,LN为(269.7±26.8)ng/ml,PCⅢ为(40.1±8.4)ng/ml,与饲养前比较差异有非常显著性(P＜0.01);C组各指标均高于B组,两组比较差异有显著性(P＜0.05).饲养后B、C组胆固醇上升,与饲养前比较,差异有显著性(P＜0.05),B、C组组间胆固醇比较差异无显著性(P＞0.05);D组胆固醇上升,与饲养前比较,差异有非常显著性(P＜0.001).B组甘油三脂上升,与饲养前比较差异有显著性(P＜0.05),C组甘油三脂上升,与饲养前比较差异有非常显著性(P＜0.01),C组甘油三脂高于B组,差异有显著性(P＜0.05),D组甘油三脂上升,与饲养前比较差异有非常显著性(P＜0.001).饲养后B组丙氨酸转氨酶(ALT)、总胆红素(TBiL)与饲养前比较差异无显著性(P＞0.05),C、D组饲养2个月、饲养4个月ALT、TBiL明显升高,与饲养前比较差异有显著性(P＜0.05).结论野生绞股蓝复方参对高脂血症动物肝纤维化有预防作用.
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中药组方抑制lewis肺癌细胞转移及机理研究
目的探讨以黄芪、补骨脂、云芝等组成的中药组方在稳定肺癌病灶、减少转移和提高生存质量等方面的意义及其分子机制.方法复制小鼠lewis肺癌模型,检测中药组方、替加氟和生理盐水对各组肿瘤细胞PCNA表达的影响,并记数小鼠肺组织内肿瘤转移结节数量等数据,比较组间差异.结果PNCA阳性表达率在生理盐水组显著高于替加氟组和消积饮组(P＜0.01),而后两者则差异无显著性(P＞0.05);中药组和替加氟组转移瘤结节数量少于生理盐水组,差异有显著性(P＜0.01);中药组结节数量多于替加氟组,差异无显著性(P＞0.05).结论该中药组方能有效降低小鼠lewis肺癌细胞PCNA的表达,抑制肿瘤细胞肺内转移灶的形成,表现为临床抑癌、抗癌的效果.
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针刺治疗糖尿病性周围神经病变的临床观察
目的观察针刺治疗糖尿病周围神经病变的疗效.方法采用针刺与弥可保随机对照各观察23例,8周后观察症状、血糖、HbA1c、血流变及神经传导速度的变化.结果针刺可改善DPN临床症状,改善血液流变学异常,提高DPN患者神经传导速度.结论针刺治疗DPN疗效是确切的.
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全麻手术病人术前心理状况调查分析及干预
目的 调查分析全麻手术病人术前心理状况及心理干预效果.方法 择期行全麻手术病人380例,术前用Zung氏SAS(焦虑自评量表)进行心理状况调查并分析,将其中360例焦虑病人随机分为试验组和对照组,对试验组病人进行术前心理干预,对照组只进行常规术前准备.人手术室后了解术前晚睡眠情况及肌紧张程度,记录入室时及拔管时血压、心率、呼吸及拔管时呛咳、屏气发生率.结果 试验组病人术前睡眠质量好,人室后生命体征平稳,肌紧张程度低,与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.01).结论 对全麻手术病人进行术前心理干预有利于缓解病人紧张情绪及保持血流动力学稳定,对保障麻醉、手术顺利进行有较大意义.
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仙桃市城镇居民 0～14 岁儿童伤害发生率调查
目的 了解仙桃市城镇居民 0～14 岁儿童伤害发生状况,为开展伤害预防健康教育提供依据.方法 运用分层整群随机抽样法对 1 000 名 0～14 岁儿童 1 年中伤害情况进行调查.结果 伤害发生率为 9.05%,男女之比 1.86:1;7～12 岁年龄组伤害发生率高(17.35%);0～2 岁组发生率低(0.42%),伤害类型发生前五位依次为:跌倒/坠落(52.30%)、交通事故(14.68%)、钝器伤(13.76%)、刀/锐器伤(7.34%)、烧烫伤(6.42%).结论 加强小学幼儿园伤害健康教育,针对不同年龄儿童特点和伤害原因采取相应预防措施.
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颊针理论及其临床应用
目的 探讨面颊部穴位分布规律与人体全身的相关性及其在临床诊疗中的作用效果.方法 通过临床实践、观察研究和面颊部的解剖研究,结合生物全息论,分析颊针的理论基础与颊针疗法的理论依据.结果 面颊部存在着一个涵盖整个人体的全息缩影系统--颊针系统,对疼痛性疾病疗效显著.结论 颊针疗法是一种新的微针诊疗体系和方法.
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电针对糖尿病大鼠学习记忆的影响
目的探讨电针对糖尿病所致学习记忆损害的防治作用.方法采用四氧嘧啶腹腔注射法制备糖尿病大鼠模型,观察电针6周后糖尿病大鼠血糖、体重的变化,并用Morris水迷宫法观察电针对糖尿病大鼠学习记忆的影响.结果 (1)治疗后电针组与模型组的体重均明显低于正常组,电针组体重明显高于模型组(P＜0.05);(2)电针组治疗前后血糖差异非常显著(P＜0.01),但仍然高于正常组(P＜0.01);(3)模型组的逃避潜伏期较正常组明显延长,P＜0.01.电针组的逃避潜伏期较模型组明显缩短,P＜0.05,与正常组比较,其逃避潜伏期仍较长,但两者之间差异无显著性,P＞0.05.与正常组比较,模型组大鼠每天的逃避潜伏期均较正常组延长,差异有显著意义,P＜0.05或P＜0.01.与模型组比较,电针组第1、2、4、5天的每天逃避潜伏期均较模型组明显缩短,P＜0.05或P＜0.01;电针组第3天的逃避潜伏期较模型组有所缩短,但差异无显著意义,P＞0.05.与正常组比较,电针组大鼠每天逃避潜伏期均较正常组延长,但差异无显著意义,P＞0.05.结论 (1)电针能够降低糖尿病大鼠血糖并增加其体重.(2)电针能够改善糖尿病大鼠的学习记忆能力.
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18F-FDG PET/CT显像在老年肺癌诊疗中的价值
目的探讨18F-氟代脱氧葡萄糖(18F-FDG)PET/CT显像对老年肺癌诊断和治疗的临床应用价值.方法 48例老年肺癌患者,在PET/CT显像前、后,根据国际抗癌联盟(International Union Against Cancer,UICC)1997年肺癌TNM分期标准进行分期,并根据美国国家综合癌症网络(National Comprehensive Cancer Network,NCCN)公布的2005年肺癌临床指引,拟定治疗策略,比较检查前、后变化.结果 37例患者肺部病灶18F-FDG摄取增高,标准化摄取值(SUV)＞2.5,在PET/CT显像后,12例分期调高,分期调高率25.0%(12/48),11例发现远处转移,手术切除概率减少了23.9%.40例患者接受了PET/CT机定位及PET/CT融合图像为依据肿瘤靶区勾画的三维适形放疗.结论 18F-FDG PET/CT显像对老年肺癌的诊断、分期、治疗策略的制定及肿瘤靶区的勾画等方面具有较大的价值.
