中国中药杂志
China Journal of Chinese Materia Medica 중국중약잡지
- 主管单位： 中药通报
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 1.71
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-2272/R
- 国内刊号： 李禾
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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葛根素通过调控活性氧对缺氧诱导的PASMCs增殖的影响
探讨葛根素(puerarin,Pue)对缺氧所引起的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响,并探讨其机制是否通过调控活性氧来实现的.原代培养大鼠PASMCs,选用2～5代用于实验.利用体外噻唑蓝比色法(MTT)、蛋白免疫印记法、流式细胞、DCFH-DA荧光观察Pue对PASMCs增殖能力的影响.利用蛋白免疫印记法检测ROS是否参与Pue抑制PASMCs增殖的过程.实验分组为:常氧组、缺氧组、缺氧+ Pue组、缺氧+Pue+ Rotenone组、缺氧+Rotenone组.其中Rotenone为ROS阻断剂.结果显示,Pue对常氧条件下的PASMCs增殖无影响,可抑制缺氧引起的PASMCs增殖.在常氧和缺氧状态下Pue对PASMCs的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达均无影响;可以使缺氧导致的细胞周期蛋白(Cyclin A)、细胞增殖核抗原(PCNA)表达下调;DCFH-DA探针证明Pue能逆转缺氧引起的ROS含量升高.Rotenone与Pue均可抑制因缺氧诱导的HIF-1α,Cyclin A,PCNA表达上调且存在协同作用.这些结果说明,Pue可抑制缺氧引起的PASMCs增殖,这一作用可能是通过调控ROS来完成的.
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松果菊苷对乙肝病毒复制和抗原表达的影响
以HBV基因转染的HepG2.2.15细胞为体外模型,研究松果菊苷对乙肝病毒(HBV)复制和抗原表达的影响,采用ELISA法测定细胞上清乙肝表面抗原(HBsAg)和E抗原(HBeAg)水平;采用荧光定量PCR法检测HBV DNA水平.以HBV转基因小鼠为体内模型,研究松果菊苷对HBV复制的影响,首先采用荧光定量PCR法检测转基因小鼠肝组织HBV DNA水平,采用ELISA法检测小鼠血清HBsAg和HBeAg水平;同时检测血清转氨酶水平和肝组织病理变化;然后将HBV表达阳性的转基因小鼠随机分为5组:对照组、拉米夫定(50 mg·kg-1)组和松果菊苷高、中、低剂量(50,25,12.5 mg·kg-1)组.每天灌胃给药1次,连续给药30 d.第31天分离小鼠血清检测HBV DNA,HBsAg和HBeAg水平;提取肝组织DNA测定其HBV DNA水平,同时作肝组织病理检查.结果表明:松果菊苷在50,100 mg·L-1作用HepG2.2.15细胞6d后能显著抑制HBsAg和HBeAg表达,其高抑制率分别为42.68％,46.29％;同时在100 mg·L-1对HBV DNA具有抑制作用.此外,松果菊苷在50mg· kg-1剂量时能显著抑制HBV转基因小鼠HBsAg与HBeAg表达,其抑制率分别为42.82％,29.12％,同时对转基因小鼠血清HBV DNA水平有显著抑制作用.提示松果菊苷对HBV复制和抗原表达具有较强抑制作用.
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红景天破壁饮片对小鼠肠道菌群影响的初步研究
初步研究并对比红景天破壁饮片、常规饮片和传统粉末对正常小鼠肠道菌群的影响.分别给药灌胃小鼠14d后取小鼠粪便进行传统细菌培养和PCR-DGGE(聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳)分析.细菌培养结果表明1/8剂量破壁饮片组的肠球菌和大肠杆菌的数量比常规饮片组和传统粉末组少,而乳酸杆菌和双歧杆菌显著增加(P＜0.05).PCR-DGGE结果表明,1/8剂量破壁饮片组肠道菌群的多样性系数(H)和物种丰度(S)高于其他各组,物种丰度(S)与正常组对比具有极显著意义(P＜0.01),与常规饮片组和传统粉末组相比具有显著性意义(P＜0.05),组内相似度也较高.长期服用1/8剂量破壁饮片会有一定的调节肠道的作用,且很可能是通过促进乳酸杆菌和双歧杆菌等益生菌的生长来进行调节,所形成的肠道菌群群落也会更稳定.
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葛根素对PI3K/AKT通路介导PASMCS凋亡的影响
探讨葛根素(puerarin,Pue)对缺氧抑制的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)凋亡的影响,并研究细胞外信号PI3K/AKT通路是否参与了Pue诱导PASMCs凋亡的过程.以血清饥饿组(SD组)为对照组,通过噻唑蓝比色法(MTT)、Annexin VFITC凋亡检测试剂盒和蛋白免疫印迹法检测Pue对大鼠PASMCs凋亡情况的影响.采用蛋白免疫印记法检测PI3 K/A KT通路是否参与了Pue诱导缺氧抑制的PASMCs凋亡的进程中.结果显示,①常氧条件下Pue对PASMCs细胞凋亡无影响,缺氧可抑制PASMCs凋亡,常氧及缺氧条件下Pue对TNF-α表达无影响.Pue可以逆转缺氧诱导的Bcl-2(P＜0.01)表达上调以及Bax(P ＜0.01)表达下调.②常氧情况下Pue对P-AKT的表达没有影响,LY294002与Pue均可抑制缺氧诱导的Bcl-2,P-AKT表达上调以及Bax表达下调,与缺氧单独加Pue或缺氧单独加入LY294002对比,缺氧+Pue+ LY294002组Bcl-2,Bax,P-AKT表达变化更显著.结果表明,Pue可诱导缺氧抑制的PASMCs凋亡,并且可能是通过PI3K/AKT通路调控的.
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HPLC-MS/MS测定葛根芩连汤对大鼠肝脏细胞色素P450酶的影响
研究葛根芩连汤及其主要药效成分对大鼠肝微粒体CYP450酶5种同工酶活性的影响.采用体外肝微粒体孵育技术将葛根芩连汤及其主要药效成分与各个探针底物共同孵育,利用LC-MS/MS建立CYP450 5种亚型探针底物的代谢产物的分析方法,考察微粒体蛋白浓度和孵育时间与代谢产物生成量之间的关系来确定蛋白浓度和孵育时间.运用HPLC-MS/MS检测CYP450酶5种同工酶特异性探针底物(非那西汀、甲苯磺丁脲、右美沙芬、氯唑沙宗、睾丸酮)相应代谢产物(对乙酰氨基酚、4-羟基氯唑沙宗、右菲烷、6-羟基氯唑沙宗、6β-羟基睾酮)的生成速率(V)来确定CYP450的各亚酶活性.结果表明,对乙酰氨基酚、4-羟基甲苯磺丁脲、右菲烷、6-羟基氯唑沙宗及6β-羟基睾酮线性关系良好,精密度、稳定性、平均回收率符合要求,所建方法可行;优化的肝微粒体体外孵育条件,符合药物相互作用指导原则的要求;葛根芩连汤对CYP450 5个亚型(CYP1A2,CYP2C11,CYP2D2,CYP2E1,CYP3A1/2)酶均有不同程度的抑制,其主要药效成分中小檗碱在高浓度下可对各亚型酶有一定的抑制(CYP1A2,CYP3A1/2除外).
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甘草总黄酮抑制硫代乙酰胺诱导肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1及Caspase-3的表达
目的:研究甘草总黄酮(LF)对硫代乙酰胺(TAA)诱导慢性大鼠肝纤维化的抑制作用及对肝脏中转化生长因子-β1(TGF-β1)和半胱天冬酶-3(Caspase-3)蛋白表达的影响.方法:SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、LF组(400,200,100,50mg·kg-1·d-1)及水飞蓟素(silymarin,30 mg·kg-1·d-1)阳性药物组共7组.除正常对照组外,其余各组均按150 mg·kg-1剂量给予腹腔注3％ TAA,每周2次,连续12周诱导大鼠慢性肝纤维化模型.期间正常对照组、模型组灌胃给予1 mL·kg-1·d-1的生理盐水.造模及药物干预后,HE,Masson染色法观察肝组织病理变化及肝纤维化的形成程度;采用生化法检测血清中ALT,AST,ALP及肝组织中羟脯氨酸(HYP)的含量;采用放免法测定血清透明质酸(HA)的含量;采用免疫组织化学法测定肝组织中TGF-β1和Caspase-3的蛋白表达,qRT-PCR方法检测肝组织中TGF-β1的mRNA表达.结果:与模型组相比较,甘草总黄酮能够保护肝组织结构的完整,并能明显减轻肝细胞变性坏死和纤维组织增生程度;甘草总黄酮能够显著降低血清中AST,ALT和ALP的水平;降低血清HA水平的同时降低肝组织中HYP的含量;甘草总黄酮能够剂量依赖性的下调肝组织中TGF-β1,Caspase-3蛋白的表达同时,下调肝组织中TGF-β1的mRNA的表达.结论:甘草总黄酮具有抗硫代乙酰胺诱导大鼠慢性肝纤维化的作用;其作用机制可能与下调TGF-β1和Caspase-3的蛋白表达有关.
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壮腰健肾丸对肾虚多尿大鼠膀胱组织中P2X1与P2X3 mRNA表达的影响
为了探讨壮腰健肾丸的缩尿作用及机制,该实验采用皮下注射150mg· kg-1剂量的D-半乳糖诱导亚急性衰老模型,并将其分为模型组、缩泉丸组(1.17g·kg-1·d-1)、壮腰健肾丸高、中、低剂量组(2.39,1.20,0.60g· kg-1 ·d-1),另取正常动物设为空白组,连续给药8周.选用代谢笼法测量大鼠24 h尿量及水负荷5h尿量;采用全自动生化仪检测尿中Na+,Cl-,K+浓度;应用ELISA法测定血清中醛固酮(aldosterone,ALD)、抗利尿激素(antidiuretic hormone,ADH)的含量;采用RT-PCR检测大鼠膀胱组织中P2X1与P2X3 mRNA表达量的变化情况.结果显示壮腰健肾丸高、中剂量组对肾虚多尿大鼠24 h尿量及水负荷后5h内尿量均显著下调(P＜0.05,P＜0.01);对尿中Na+和Cl-浓度均显著降低(P＜0.01);血浆中ALD,ADH含量显著性升高(P＜0.05,P＜0.01);膀胱组织中P2X1与P2X3 mRNA表达量显著下调(P＜0.01);壮腰健肾丸低剂量组尿中Na+和Cl-浓度均显著降低(P＜0.01).结果说明壮腰健肾丸可能是通过下调肾虚多尿大鼠膀胱组织中P2X1与P2X3 mRNA表达量从而发挥缩尿的作用.
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桂枝茯苓胶囊及其活性成分组合物免疫调节活性及其机制研究
该文对桂枝茯苓胶囊及其15个活性成分组合物进行免疫调节活性评价,并对其作用机制进行初步探索.实验通过MTT法检测脾脏淋巴细胞体外增殖活化能力,观察桂枝茯苓胶囊及其活性成分组合物促淋巴细胞增殖作用;通过流式细胞术检测脾脏淋巴细胞中CD80/86,CD3CD25,CD3CD69的比例变化,评价桂枝茯苓胶囊及其活性成分组合物对脾脏淋巴细胞活化的影响.MTT结果显示400 mg· L-1的桂枝茯苓胶囊可以明显促进脾淋巴细胞的体外增殖,与对照组比较,差异具有统计学意义(P≤0.01);15种活性成分组合物也具有相同的作用,在25～800 mg·L-1,与对照组比较,差异具有统计学意义(P≤0.01),且在6.25 ～400 mg·L-1呈现明显的量效关系.流式细胞术结果显示400 mg·L-1桂枝茯苓胶囊与200 mg·L-1的15种活性成分组合物对脾淋巴细胞中CD80和CD86的表达均具有明显的促进作用;对CD3+细胞中CD69和CD25的表达亦具有明显促进作用.综上,桂枝茯苓胶囊与其活性成分组合物具有一定的免疫调节活性,其机制可能与活化淋巴细胞密切相关.
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槐果碱治疗小鼠实验性结肠炎的机制研究
研究槐果碱对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠急性结肠炎的防治作用,探讨槐果碱对小鼠肠道组织中Toll样受体4(TLR4)/促分裂原活化蛋白激酶(MAPKs)和蛋白酪氨酸激酶2/信号转导和转录激活因子3(JAK2/STAT3)信号通路的影响.采用2.5％ DSS饮用6d诱导小鼠急性结肠炎模型,实验前1天及实验全程中槐果碱组给予腹腔内注射槐果碱30 mg·kg-1·d-1,每日进行疾病活动指数(DAI)评分,HE染色观察小鼠结肠黏膜大体形态和组织病理学损伤情况;Real-time RT-PCR法检测各组小鼠肠黏膜肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-1β(IL-1β)及白介素-6(IL-6) mRNA表达情况;Western blot检测各组小鼠肠黏膜组织中TLR4/MAPKs及JAK2/STAT3信号通路中重要蛋白激酶P38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK),c-Jun氨基端激酶1/2(JNK1/2),细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2),JAK2及STAT3变化情况.结果显示,模型组小鼠体重,DAI,结肠长度及组织病理学变化较正常对照组差异有统计学意义(P＜0.05),槐果碱干预组上述指标则均较模型组明显改善(P＜0.05).模型组TNF-α,IL-1β,IL-6较正常组明显上升(P＜0.05),槐果碱干预后不同程度下调(P＜0.05).正常组中TLR4蛋白表达量少,P38,JNK1/2,JAK2,STAT3蛋白磷酸化水平低下,模型组中TLR4蛋白表达上调,P38,JNK1/2,JAK2,STAT3蛋白磷酸化水平升高,槐果碱干预组TLR4表达较模型组减少,P38,JNK1/2,JAK2,STAT3磷酸化水平较模型组明显下调.结果表明,槐果碱能抑制TLR4/MAPKs,JAK2/STAT3信号通路活化,减少肠道组织中促炎细胞因子TNF-α,IL-1β,IL-6表达,减轻炎性反应,从而有效防治实验性结肠炎.
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基于受体药效团的CETP天然抑制剂的发现研究
胆固醇酯转移蛋白(cholesterol ester transfer protein,CETP)是HDL的重要调控因子,抑制其活性可有效提高HDL的含量.由于HDL通过胆固醇逆向转运对动脉粥样硬化发挥的重要遏制作用,CETP已成为治疗心血管疾病的热门靶点.该文以PDB数据库中编号为4F2A的CETP蛋白结构为研究对象,对其活性区域内的药效特征进行识别、聚类及筛选,建立了基于CETP蛋白结构的受体药效团.优药效团由6个疏水特征、1个氢键供体特征及9个排除体积组成,其辨识有效性指数N为3.33,综合评价指数CAI为2.31.同时,利用该模型对TCMD进行虚拟筛选,获得来源于315味中药的629个化合物.后,该研究基于分子对接技术探讨了活性区域的关键氨基酸残基以及中药活性化合物与受体的相互作用,进一步验证了研究结果的可靠性.其中枸杞子、五味子等部分含有潜在活性成分较多的中药已有文献报道确有降脂活性.该研究为从中药中发现CETP抑制剂、探讨中药降脂作用机制提供了数据支撑.
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HPLC测定蝙蝠蛾拟青霉培养物5种核苷类成分的含量
建立HPLC同时测定蝙蝠蛾拟青霉培养物中尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤和腺苷5种核苷类成分含量的方法.采用Waters SunFire C 18(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长260 nm.结果尿嘧啶的线性范围为10.00 ～200.00 mg·L-1(r=0.9994),尿苷的线性范围为10.10 ～202.00 mg· L-1(r =0.999 2),鸟苷的线性范围为10.00～200.00mg· L-1(r =0.999 1),腺嘌呤的线性范围为10.30 ～206.00 mg· L-1(r =0.999 2),腺苷的线性范围为10.45～209.00mg·L-1(r=0.999 1);尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤和腺苷的精密度RSD分别为0.032％,0.035％,0.039％,0.049％,0.000 80％;尿嘧啶、尿苷、鸟苷、腺嘌呤和腺苷的平均加样回收率分别为97.34％,99.10％,101.6％,98.61％,100.2％,RSD分别为1.3％,2.1％,0.96％,0.95％,1.3％.该方法灵敏度高、选择性好,线性关系及重复性好,适合于蝙蝠蛾拟青霉培养物及其提取物中核苷类成分的含量分析.
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木蝴蝶种子的化学成分研究
采用正反相硅胶,Sephadex LH-20,MCI树脂等常规柱色谱及高效液相色谱技术对中药木蝴蝶种子80％甲醇提取物进行化学成分的分离纯化,从中分离得到11个化合物,根据其理化性质以及核磁波谱数据鉴定化合物结构为木蝴蝶苷B(1)、白杨黄素(2)、黄苓苷元(3)、5,6-二羟基-7-甲氧基黄酮(4)、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(5)、槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷(6)、2α,3β-二羟基羽扇豆醇(7)、羽扇豆醇(8)、顺式-连翘环己醇(9)、β-谷甾醇(10)、豆甾醇(11).其中,化合物5为首次从木蝴蝶中分离得到.
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小叶山葡萄化学成分及细胞毒活性研究
该文对小叶山葡萄地上部分化学成分进行了研究,运用硅胶柱色谱,ODS中低压柱色谱,Sephadex LH-20凝胶柱色谱,分析型和制备型HPLC从小叶山葡萄60％乙醇提取物大孔树脂95％乙醇-水洗脱部位分离得到12个化合物,利用高分辨质谱,核磁共振等波谱手段鉴定其结构分别为:(1) betulinic acid,(2)2,2,2'-bis(4-hydroxyphenyl)propane bis(2,3-epoxypropyl) ether,(3) eriodictyol,(4)trans-ε-viniferin,(5)(+)-cis-ε-viniferin,(6)kobophenol A,(7)ampelopsin A,(8)nepalenhenol, (9) cis-miyabenol C,(10) cis-vitisin B,(11) cis-gnetin H和(12)(+)-hopeaphenol.化合物2,5,6,8,9,10,11均为首次从为葡萄属中分离得到的化合物,化合物3,7,12为首次从小叶山葡萄中分离得到的化合物.在作用浓度为50μmol.L 1下,化合物6,7和11对MCF-7(乳腺癌细胞株)具有较明显的体外生长抑制作用,其抑制率分别为66.58％,57.16％,52.84％.
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基于多元功效成分的山茱萸药材质量标准提升研究
建立山茱萸药材中环烯醚萜苷类及三萜酸类化学成分的含量测定方法,为山茱萸药材的质量标准提升提供技术支撑.采用HPLC-UV法,以乙腈-0.1％甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,检测波长为240 nm,建立同时测定莫诺苷、马钱苷、当药苷的含量测定方法;采用HPLC-ELSD法,以甲醇-0.5％乙酸铵(87: 13)为流动相,建立同时测定齐墩果酸、熊果酸的含量测定方法.结果显示在上述色谱条件下,莫诺苷、马钱苷、当药苷分别在质量浓度5.335 ～213.4 mg· L-1(r=0.9999),5.515 ～220.6 mg·L-1(r=1.000 0),1.992～79.68 mg·L-1(r=1.000 0)线性关系良好,平均加样回收率均在98.49％ ～ 99.28％,RSD＜ 2％;齐墩果酸、熊果酸分别在质量浓度7.74～154.8 mg·L-1(r=0.996 4),10.82～216.4 mg·L-1(r=0.999 6)线性关系良好,平均加样回收率均在98.11％ ～99.27％,RSD ＜3％.表明所建立的方法简单快速,准确可靠,重复性好,可用于客观评价山茱萸药材的品质及其质量控制,为完善山茱萸药材现行质量标准提供e实验数据,对于保证其质量和临床疗效具有重要意义.
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翠云草中黄酮类成分的研究
采用大孔吸附树脂、聚酰胺柱、正相硅胶柱、Sephadex LH-20柱色谱以及制备高效液相色谱等分离纯化方法,从翠云草75％乙醇提取物中分离得到9个化合物,根据化合物的理化性质和光谱方法鉴定其结构分别为:滨蓟黄苷(1)、印度荆芥苷(2)、芹菜素-6-C-α-L-吡喃阿拉伯糖-8-C-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、芹菜素-6-C-β-D-吡喃葡萄糖-8-C-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(4)、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、2,3-二氢穗花杉双黄酮(6)、4'-甲氧基穗花杉双黄酮(7)、2,3-二氢-4'-甲氧基穗花杉双黄酮(8),2,3,2",3"-四氢-4'-甲氧基罗波斯塔双黄酮(9),化合物1～5为黄酮苷类化合物,并且均为首次从卷柏属植物中分离得到,化合物7为首次从翠云草中分离得到.
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毛果鱼藤中黄酮类化学成分研究
综合运用硅胶柱色谱、SephadexLH-20、聚酰胺柱色谱、半制备HPLC以及重结晶等方法对毛果鱼藤中黄酮类化学成分进行分离纯化,并通过质谱、核磁共振谱等方法鉴定各单体化合物的结构.后从毛果鱼藤的乙酸乙酯部位分离得到9个黄酮类化合物,依次为香叶木素(1),3,3'-二甲醚-槲皮素(2),阿弗洛莫生(3),6,3'-dihydroxy-7,4'-dimethoxyisoflavone(4),飞机草素(5),7,3'-dihydroxy-8,4'-dimethoxyisoflavone(6),6,4'-dihydroxy-7,3 '-dimethoxyisoflavone(7),5,7,4'-trihydroxy-3,3',5'-trimethoxyflavone (8),alpinumisoflavone (9).所有化合物均为首次从该植物中分离得到.运用MTT法进行体外抗肿瘤实验,结果表明化合物2显示一定的抑制细胞增殖活性.
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紫苏叶挥发油的不同化学型及研究进展
挥发油是紫苏叶中的主要成分,根据其中含有的单萜类或芳香族类成分的主要种类可细分为不同的化学型,中国产紫苏的主要化学型为PA型(主要含紫苏醛和柠檬烯)、PK型(主要成分为紫苏酮)和PP型(以芹菜脑主要成分的PP-a型;以肉豆蔻醚为主要成分的PP-m型;以榄香素为主要成分的PP-e型;以细辛脑为主要成分的PP-as型).不同化学型之间的转化从生物合成途径来看,一般受单个基因或少数几个基因控制,且其药理作用是有区别的.该文立足于紫苏种下变种及其叶中挥发油化学型分型问题,对挥发油中的主要化学成分、生源合成及调控、药理作用、影响因素等方面进行了梳理和综述,以期为紫苏叶的开发利用及进一步研究提供参考.
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胶体金色谱技术在赭曲霉毒素A快检中的研究进展
赭曲霉毒素A(ochratoxin,OTA)是一类主要由曲霉属和青霉属等真菌产生的次级代谢产物,广泛存在于各种食品及中药材中.其痕量、剧毒、受污染、基质复杂等特点,给实际检测造成了很大困难.在众多检测技术中,胶体金色谱技术以其灵敏度高、特异性好、经济实用、使用方便等优点在OTA快速检测中广泛应用.近年来,随着适配子技术的进步及其在色谱技术中的应用,发展了新型胶体金适配子色谱技术.该文阐述了2种胶体金色谱技术的构造及原理,重点介绍了新型胶体金适配子色谱技术,归纳并比较了它们在OTA快速检测中的应用,展望了胶体金色谱技术的发展趋势,以期为相关研究提供参考.
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近30年来中药羌活化学成分研究进展
该文综述了近30年来中药羌活的化学成分研究进展,中药羌活的化学成分主要为香豆素类、聚烯炔类、倍半萜类、酚酸类,另外还有甾体、黄酮等,但报道较少.该文对从中药羌活中报道的每个化合物,都利用SciFinder进行了确认和校正,列出了每个化合物的中文名、英文名和CAS号,以便于为今后中药羌活的研究和开发利用提供参考.羌活中是否有哥伦比亚苷有待于进一步确证.
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罂粟属植物核心DNA条形码的筛选
DNA条形码(DNA barcoding)技术是一种准确、高效且对操作人员要求不高的物种鉴定技术.为了筛选出适合罂粟属的DNA条形码,从GenBank上获得罂粟属植物共69条序列,包括21条ITS序列,10条matK序列,8条psbA-trnH序列,14条rbcL序列和16条trnL-trnF序列.应用Mega 6.0软件分析了罂粟属的ITS,matK,psbA-trnH,rbcL,trnL-trnF序列的特征,通过计算序列的种内、种间距离,评估序列的Barcoding Gap和构建NJ,UPGMA系统发育树进行分析.分析结果表明:trnL-trnF不仅种内变异和种间变异差别大,而且有明显的barcoding gap,种内变异和种间变异重合较少,能较好地区分不同种类的罂粟;所构建的NJ和UPGMA系统发育树,也能将全部物种区分开.综合考虑,建议把trnL-trnF作为鉴定罂粟属植物的核心条形码,结合其他片段作为组合条形码.
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基于眼部特点的麝丹即型凝胶的制备与评价
该实验采用中心组合设计-效应面法制备并优化了温敏型麝丹眼用即型凝胶,其处方佳基质为18％的泊洛沙姆407(P407)和5％的泊洛沙姆188(P188);应用安东帕MCR302流变仪对其进行了流变学考察,振幅扫描结果显示应控制其应变(γ)＜0.5％,在高频区其弹性模量(G')大于黏性模量(G"),表现为凝胶特征,有较好的稳定性,通过温度扫描G',G"及相角(δ)的变化来确定了其相变温度(TSG)为33.25℃,触变性实验显示其结构恢复时间短于5s;分别采用表面张力仪、露点渗透压仪分别测定了其表面张力和渗透压,结果分别为36.43 mN·m-1,320.6 mOsm·kg-1;荧光标记示踪法观察了其在眼角膜的滞留时间为180 min;其溶出实验表现为零级释放动力学特征,麝香酮和丹酚酸B的释放与药物溶蚀线性相关;眼部刺激性实验显示其无刺激性.麝丹即型凝胶有望为临床视网膜静脉阻塞治疗提供一种新型外用长效制剂.
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β-环糊精包合物对香附四物汤挥发油中主要成分在Caco-2细胞模型中转运的影响
虽然香附四物汤挥发油具有较强的药理活性,但挥发油特殊的物理化学性质制约了其临床应用与药效发挥.该文采用环糊精包合技术对香附四物汤挥发油部位进行制剂处理,同时利用人源结肠腺癌细胞系Caco-2细胞单层模型,研究了香附四物汤挥发油经β-环糊精包合后主要活性成分体外跨膜转运的改变,探讨了β-环糊精包合物对以低溶解性、高渗透性为特征的生物药剂学分类系统中第Ⅱ类药物跨膜转运与吸收的影响.首次建立了UPLC-MS/MS进行香附四物汤挥发油中主要活性成分洋川芎内酯A、正丁基苯酞、藁本内酯、去氢木香内酯、α-香附酮同时测定的含量分析方法.结果表明,将香附四物汤挥发油制成β-环糊精包合物能显著提高其活性成分在体外的透膜转运与吸收,据此推测环糊精包合物对难溶性药物的口服生物利用度有一定改善作用.该文的研究内容为香附四物汤β-环糊精包合物更加深入的体内过程研究提供了一定的实验依据,同时也为其新型口服制剂的研发奠定了基础.
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市售赭石、紫石英饮片质量考察及矿物药相关问题的探讨
通过市售赭石、紫石英饮片质量考察,探讨临床用矿物药生品饮片存在的主要问题.采用2010年版《中国药典》一部赭石、紫石英项下要求对市售赭石、紫石英饮片进行外观质量和内在质量考察.结果临床用矿物药外观和内在质量差异均较大,12批市售赭石饮片的不合格率达41.67％,13批紫石英饮片的不合格率达53.85％.建议药典明确矿物药粉碎粒度,进一步完善质量标准;药监系统加强检查和监管力度,以确保矿物药临床疗效的稳定性和可靠性.
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大豆多糖辅助淫羊藿总黄酮喷雾干燥及其对粉体学性质的影响
评价大豆多糖辅助淫羊藿总黄酮提取液喷雾干燥的特性.于淫羊藿总黄酮提取液中分别加入一定比例的大豆多糖进行喷雾干燥,观察大豆多糖对解决喷雾干燥粘壁效果的作用,同时考察淫羊藿总黄酮共喷雾干燥粉体的粉体学性质和有效成分的体外溶出行为.与淫羊藿总黄酮喷雾干燥粉体相比较,大豆多糖-淫羊藿总黄酮喷雾干燥粉体抗粘壁效果显著,粒径无明显变化,但粒子表面光滑,流动性提高,吸湿性改善,体外溶出度显著提高.大豆多糖在中药喷雾干燥粉体中的应用值得进一步研究和探索.
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响应面法优化白芍提取工艺的研究
为进一步优化白芍提取工艺,从化学成分稳定性和操作便捷性考虑,该实验选择超声法对白芍提取工艺进行研究.以液相色谱图中共有峰的总峰面积为指标,通过单因素法考察超声时间、乙醇浓度、液料比对白芍提取效果的影响,并运用响应面法优化白芍的超声提取工艺.实验结果表明,乙醇浓度对白芍提取效果的影响大,其次是液料比与超声时间.响应面法优化得白芍超声提取工艺的适条件为:超声时间20.06 min、乙醇浓度72.04％、液料比53.38 mL·g-1;色谱图中共有峰总峰面积的模型预测值为2.160 8×108.通过验证实验发现:在此佳提取条件下,色谱图中共有峰总峰面积的实际值为2.142 2×108,与预测值相近,二者相对偏差为0.86％,说明响应面优化所得的白芍提取工艺稳定、可行.从白芍提取效果完全、充分的角度看,该研究所得工艺较《中国药典》所载"白芍"中芍药苷提取方法更具优势,可用于白芍的开发、利用和质量综合评价.
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响应面法优化芪白平肺颗粒干法制粒工艺
为了确定芪白平肺颗粒的佳制粒工艺条件,该研究考察了辅料、送料速度、轧轮转速、轧轮压力对干法制粒工艺的影响.以颗粒一次成型率、吸湿性和溶化性为指标确定了辅料种类及用量,再通过单因素考察试验并结合Box-Behnken响应面法,以送料速度、轧轮转速、轧轮压力为自变量,颗粒一次成型率为因变量,优化干法制粒工艺参数,得到芪白平肺颗粒佳工艺条件为:稀释剂乳糖佳比例为干浸膏-乳糖1:2;轧轮压力6.4 MPa、轧轮转速10.9 Hz、送料速度7.2 Hz.通过3批放大工艺验证,显示优化后的工艺参数制备出的芪白平肺颗粒具有成型率高、溶化性好、吸湿率低等优点.结果表明芪白平肺颗粒于法制粒优化后的工艺参数合理、可行、重复性好,为以后该产品产业化应用提供依据.
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基于中医传承辅助系统的中医治疗肿瘤方剂组方分析及新方发现
恶性肿瘤是目前全世界的主要死亡原因之一,已经成为严重危害人类生命健康、制约社会经济发展的一大类疾病.当前报道中药治疗肿瘤的各类成方、验方、自拟方等种类繁多,且分析方剂组方规律常常以用药频次为基础,该类方法适用于发现显性经验,难以有创新性发现与认识.该文基于中医传承辅助系统采用软件集成的改进互信息法、复杂系统熵聚类、无监督的熵层次聚类等无监督数据挖掘方法,分析中医治疗肿瘤方剂的组方规律.筛选出114个处方进行分析,确定处方中药物出现的频次,演化得到核心组合85个、新处方13个.中医传承辅助系统可实现对方剂数据的录入、管理、查询和分析,是一个有价值的中医药研究辅助工具.
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雷公藤多苷治疗糖尿病肾病Ⅳ期患者疗效的系统评价
系统评价了雷公藤多苷(tripterygium glycosides,TG)联合ACEI/ARB制剂治疗糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)Ⅳ期的疗效及安全性.计算机检索Cochrane Libarary,PubMed,Embase,SCI,Sinnomed,CNKI,万方数字化期刊全文数据库数据库和VIP以及手检会议、学位论文等(均为建库至2014年12月30日),查找有关雷公藤多苷联合ACEI/ARB制剂治疗糖尿病肾病Ⅳ期的随机对照和半随机对照试验,制定文献纳入及排除标准,符合纳入标准的文献按Cochrane系统评价员手册标准进行文献质量评估,应用Review Manager 5.3及stata 12.0软件进行Meta分析.共纳入13个随机和半随机对照试验,1 119例糖尿病肾病患者,Meta分析结果显示:联合组在降低24 h尿蛋白定量[MD=-0.84,95％CI(-1.02,-0.66)],升高血清白蛋白[SMD=0.99,95％ CI (0.81,1.16)],总有效率[OR=4.23,95％CI(2.77,6.46)],显效率[OR=5.35,95％CI(2.70,10.60)]方面优于对照组.2组在血肌酐方面无统计学差异[MD=-0.82,95％CI(-4.30,2.66),P=0.64],但联合组不良反应发生的危险性增加7％[RD =0.07,95％CI(0.03,0.12)].应用Egger's检验,无发表偏倚.雷公藤多苷联合ACEI/ARB制剂治疗糖尿病肾病Ⅳ期患者优于单独应用ACEI/ARB制剂,在临床上具有良好的应用前景.但由于纳入研究样本量小且质量较低,仍需要高质量、大样本的随机对照试验加以证实.
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药对研究(Ⅲ)——葛根人参药对对大鼠肠吸收的影响
为研究药对配伍的科学内涵,该研究从药物的肠吸收角度出发,通过大鼠在体单向肠灌流实验比较葛根单提、人参单提、葛根人参合提、葛根人参合并4组药物在大鼠体内的吸收情况.用HPLC测定了药液中指标成分葛根素、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、人参皂苷Re的含量.计算并比较速率常数(Ka)与表观吸收系数(Papp).其中葛根素的Ka和Papp依次为葛根人参合并组＞葛根单提组＞葛根人参合提组.人参皂苷Rg1,Re,Rb1的Ka和Papp依次为葛根人参合并组＞人参单提组＞葛根人参合提组.葛根、人参合并给药可能提高药物在消化道内的吸收.
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外翻肠囊法研究丹参水提物在大鼠肠内的吸收
研究丹参水提物在大鼠肠内的吸收特征,采用大鼠肠外翻模型,选择丹参水提物中具有代表性的原儿茶醛(protocatechuic aldehyde,PAL)、迷迭香酸(rosmarinic acid,RA)和丹酚酸B(salvianolic acid B,SAB)3种成分为考察对象,建立其超高效液相(UPLC)测定方法并测量其累积吸收量,阐明各成分在不同肠段的吸收特征.实验结果显示,RA,SAB在回肠内为被动吸收,符合一级速度过程;RA,SAB在空肠内低、中剂量时为零级速度过程,高剂量时为一级速度过程,是一种主、被动同时存在的吸收方式;PAL在空肠、回肠内均为被动吸收.小肠不同部位的吸收实验表明,空肠可能为RA和SAB的主要吸收部位,回肠可能为PAL的主要吸收部位.丹参水提物中PAL,RA,SAB 3种成分在小肠均有吸收,但各成分的吸收速率及其机制不尽相同,提示小肠对丹参水提物各成分的吸收具有选择性,并不是简单地半透膜渗透过程.
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一测多评法对黔产侗药"钻更"中落新妇苷及黄杞苷的HPLC和UPLC含量分析
该实验以落新妇苷为内参物,研究一测多评法同时测定黔产侗药"钻更"药材中落新妇苷、黄杞苷的含量.在HPLC和UPLC的2个平台上,通过不同型号仪器相对校正因子的考察,探讨不同色谱体系之间所建立的相对校正因子的互用性,再根据建立的相对校正因子计算黄杞苷的含量,并与外标一点法、外标工作曲线法进行比较,以验证一测多评法的准确性.结果表明,在不同色谱体系中,落新妇苷与黄杞苷的相对校正因子及保留时间比值的重复性良好,RSD分别为2.0％,1.8％,均小于3.0％,侗药"钻更"药材中黄杞苷的一测多评法计算值与外标一点法、外标工作曲线法的相对偏差为1.6％ ～ 3.9％,RSD2.0％ ～0.80％,符合相关要求,Pearson相关系数为0.999 8(P ＜0.01).研究表明,采用一测多评法分析黔产侗药"钻更"药材中落新妇苷、黄杞苷的含量信息,该方法准确、可靠、重复性良好,可较好地控制该药材的内在质量.
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三七幼苗对聚乙二醇(PEG 6000)模拟干旱胁迫的生理响应研究
以三七幼苗(30 d苗龄)为试验材料,研究了聚乙二醇(PEG 6000)模拟干旱胁迫对其各部位抗氧化酶、渗透物质和根系活力等生理指标的影响.结果表明,根和叶中POD,APX活力随处理浓度(PEG 6000 0,2.5％,5.0％,7.5％)和时间(1,2,3d)的增加而不断上升,SOD则表现为在同一处理时间下随处理浓度的增加而先升后降,同一处理浓度下则随处理时间的延长而上升,CAT活性表现为在同一处理时间下随处理浓度的增加而增加,同一处理浓度下则随处理时间的延长而呈先升高后降低的趋势;茎中SOD,APX活性变化不明显,CAT活性随处理时间和浓度的增加而升高;根和叶中MDA、可溶性蛋白和脯氨酸含量及根系活力随处理浓度的升高和处理时间的延长而显著升高;处理1d后,根尖H2O2和NO荧光信号随处理浓度的升高而增强.综上所述,三七幼苗能够通过调节抗氧化酶系统、渗透胁迫物质及抗逆胁迫信号物质应对干旱胁迫,当PEG 6000超过5.0％(即溶液水势为-0.50 MPa)时可对三七幼苗产伤害,应及时补水抗旱.
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立体栽培三七的光温效应及对光合的影响
该文以立体栽培下的三七(三年生)为研究对象,对温室大棚内垂直层叠立体栽培结构下,不同层及同层不同位置(左、中、右侧)的光照强度、气体温度、土壤温度及光合特征等进行了测定.结果表明:光照强度、气体温度和土壤温度日变化均表现为上层＞中层＞下层;同层不同位置,光照强度表现为上层无显著差异,中下层左右两侧相同,且显著高于中间位置,气体温度表现为每层的左中右位置均无显著差异,土温表现为苗床中间土层(12 cm)土壤温度低,并呈向上下表面逐渐升高之趋势;三七净光合效率表现为上层＞中层＞下层;气孔导度、胞间CO2浓度和净光合速率与光照强度显著相关,蒸腾速率与光照强度和气体温度显著相关,说明三七叶片净光合速率受光照强度直接影响,受气体温度和土壤温度间接影响.综上所述,研究表明三七立体栽培模式可行,改进苗床架构模式以提高中下层光照强度、增加苗床厚度以降低土壤温差和加强温室通风以调控气体温度等方式为今后提高立体栽培三七种植技术的改进方向.
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立体栽培模式对三七产质量影响及其栽培土壤氮磷钾养分变化特征研究
以立体栽培(上中下3层)三年生三七及种植土壤为研究对象,比较分析了其与大田栽培三七产质量差异和土壤氮磷钾养分年度变化特征.结果表明,与大田栽培相比,立体栽培三七长势和相同面积产量均显著降低,但单位面积产量总和为大田栽培的1.6倍;上中下3层长势和产量均表现为上层＞中层＞下层;立体栽培三七上层剪口、主根和筋条皂苷含量均高于大田栽培,而中层和下层皂苷含量则显著低于大田栽培.立体栽培土壤有机质含量和pH变化趋势与大田一致,呈随种植时间延长而下降的趋势;上中下层有机质含量均显著高于大田土壤,pH则显著低于大田土壤.立体栽培三七土壤氮磷钾全效养分和速效养分年度变化均表现为随种植时间的延长而下降,不同栽培模式氮素和磷素含量均表现为上层＞中层＞大田＞下层,钾素含量表现上层＞中层＞下层＞大田.与大田栽培相比,氮素和磷素在上层三七的地下部(筋条、主根和剪口)所占比例升高,中下层地下部比例降低,钾素在各层地下部所占比例均显著降低.由此可见,虽然立体栽培下三七相同面积产量显著低于大田栽培,但单位面积下的总产量显著高于大田,达到了提高土地利用率的目的;立体栽培土壤养分能够满足三七生长需求,其并非造成三七长势弱、单产低的主要原因;立体栽培模式下的三七吸收氮磷钾养分能力降低,因此从调整栽培结构角度增强三七长势从而提高其养分吸收能力是今后努力方向.
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立体栽培模式下三七种植土壤微生物、酶活特征及对农艺性状影响研究
以立体栽培(3层)三年生三七种植土壤为研究对象,比较分析其与大田土壤(对照)在酶活性、土壤微生物差异及对三七农艺性状的影响.结果表明,立体栽培各层(下、中、上)土壤微生物浓度显著低于大田;土壤脲酶、蔗糖酶和中性磷酸酶活性均表现为从下层至上层逐渐升高,除各层中性磷酸酶活性均显著高于对照外,上层及下层脲酶和蔗糖酶活性均显著低于对照;立体栽培下三七各农艺性状指标均劣于大田栽培,3层中以中层长势好,上层次之,下层差.相关分析表明,真菌、放线菌及中性磷酸酶活性与三七农艺性状显著相关;土壤真菌和细菌浓度均与土壤相对含水量显著相关;放线菌和中性磷酸酶活性均与土壤pH和土壤相对含水量显著相关;脲酶和蔗糖酶活性与日大温差呈显著负相关.当前研究表明立体栽培模式下土壤微生物比例失衡和土壤酶活性剧烈变化是导致立体栽培三七农艺性状劣于大田栽培夫的诱因之一.因此,改善立体栽培结构,从而使土壤微生物及酶活性接近大田土壤,为三七生长营造良好的土壤生态环境是保障三七健康生长的关键.
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三七对镉胁迫的生理响应及富集特性研究
以二年生三七为试验材料,水培条件下研究了镉胁迫(0,2.5,5,10μmol·L-1)对三七抗氧化酶系统和光合参数的影响及三七对镉的吸收分配规律.结果表明:2.5 μmol·L-1镉处理可诱导SOD,POD,APX等酶活性的升高,10μmol·L-1镉处理则对SOD,POD,APX,CAT均产生抑制作用;镉处理对三七各部位CAT活性均具有抑制作用;三七净光合速率,蒸腾速率,气孔导度均随镉处理浓度的升高而降低,胞间CO2浓度则呈先下降后上升的趋势;三七各器官镉含量表现为须根＞剪口＞主根＞叶片＞茎;叶,茎,剪口,须根,主根镉富集系数均随镉处理浓度的升高而降低;各器官中镉含量与迁移系数均随镉处理浓度的升高而上升.综上所述,镉胁迫可对三七抗氧化酶系统和光合系统产生影响,三七对镉具有富集作用,应合理选择三七种植基地以减少对镉的吸收,合理选取三七入药部位,以降低镉摄入风险.
