甲异靛体外对珠蛋白基因表达作用的研究

目的探讨甲异靛体外对外周血培养红系细胞的珠蛋白mRNA相对含量的影响,为临床治疗β地中海贫血提供理论依据.方法采用二步法液体培养外周血红系细胞和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)等方法,研究了6例正常人和11例β地中海贫血患儿外周血体外培养红系细胞在不同浓度甲异靛作用下,以α珠蛋白mRNA为内对照,测定γ和β珠蛋白mRNA的相对含量.结果(1)甲异靛对所有外周血体外培养红系细胞的β/α mRNA比值变化均无影响.(2)经不同浓度甲异靛诱导后正常人外周血体外培养的红系细胞的γ/α mRNA升高0.31～0.45倍,非α/α mRNA升高0.21～0.32倍,三种不同浓度之间差异无显著性;β地贫患儿γ/α mRNA升高0.33～1.17倍,非α/α mRNA升高0.25～0.89倍,2.5 μmol/L和5 μmol/L两种浓度之间差异无显著性,10 μmol/L浓度甲异靛对γ/α mRNA和非α/α mRNA的比值变化比上述两种浓度显著增高. (3) 10 μmol/L甲异靛对β地贫患儿外周血体外培养红系细胞的γ/α mRNA和非α/α mRNA的比值的提高显著高于正常人,其他两种浓度下差异无显著性.结论甲异靛在体外培养的外周血红系细胞中提高γ/α mRNA和非α/α mRNA的比率,对β地中海贫血的治疗具有潜在应用价值.

幼年大鼠反复热性惊厥对惊厥易感性的远期影响

目的探讨幼年大鼠反复热性惊厥对惊厥易感性的远期影响.方法利用热水浴诱导惊厥模型,诱导22日龄SD大鼠发生15次热性惊厥.间隔3个月再用同样的方式诱发惊厥,观察大鼠前后两次惊厥发生率、惊厥潜伏期和惊厥持续时间的差异.采用尼氏染色及Timm染色观察神经元损伤和海马结构的变化.结果有幼年反复热性惊厥史的大鼠3个月后再次接受热刺激时,惊厥发生率(74%)较其高热对照组(8%)高,差异有显著性(χ2=13.50,P＜0.01);惊厥持续时间[(19.3±5.1)min]较幼年时[(5.5±2.9)min]延长,差异有显著性(t=10.49,P＜0.01);且再次接受热刺激时,有4只大鼠出现惊厥持续状态,而幼年时,无1只大鼠出现惊厥持续状态.尼氏染色幼年大鼠脑内未见神经元丢失,3个月后再惊厥大鼠脑内海马CA3区见明显神经元丢失.Timm染色显示惊厥15次大鼠海马区有明显苔藓纤维发芽现象,持续至3个月后.结论在未成年大鼠,反复热性惊厥使得大鼠的远期惊厥易感性增加.

激素敏感型单纯性肾病外周血白细胞乙酰肝素酶基因表达的研究

目的研究激素敏感型单纯性肾病(SRSNS)外周血白细胞中乙酰肝素酶(Hpa)基因表达水平及其与尿蛋白定量之间的关系,探讨肾小球基底膜电荷屏障破坏的机制.方法采用逆转录-聚合酶链反应的方法,分别对43例SRSNS患儿(活动期23例、恢复期10例、缓解期10例)、23例肾炎性肾病、15例紫癜性肾炎(肾病型)和15例正常对照儿童外周血白细胞中Hpa基因表达水平进行半定量研究.结果 (1)SRSNS活动期Hpa表达量(1.27±0.36)高于肾炎性肾病、紫癜性肾炎(肾病型)和正常对照组(0.36±0.13),差异有显著意义(P＜0.001).(2)不同阶段的SRSNS患者之间Hpa表达量活动期＞恢复期＞缓解期,差异有显著意义(P＜0.05);缓解期(0.34±0.18)与正常对照组之间差异无显著意义.(3)SRSNS组活动期、恢复期和缓解期Hpa表达水平与尿蛋白定量之间呈正相关(rs=0.751,P＜0.001).结论外周血白细胞Hpa表达的增高可能与SRSNS大量蛋白尿的产生有关.

新生大鼠缺氧缺血性脑病模型脑组织新生血管形成及调控因素

目的探讨新生大鼠缺氧缺血性脑病(HIE)模型脑组织新生血管形成及调控因素.方法 68只新生大鼠建立HIE模型组(44只)或行假手术组(24只).两组缺氧后1、3、7和14天各处死5只大鼠,用免疫组化方法检测脑组织内皮细胞、增生细胞核抗原和血管内皮生长因子(VEGF).模型组的其余24只新生大鼠建立HIE模型,于缺氧后3、12h,1、3、7和14d各处死4只大鼠,取缺氧缺血侧脑组织液氮速冻,用于提取RNA.假手术组的其余4只正常新生大鼠作假手术处理后即刻处死提RNA做正常对照.分析缺氧缺血侧脑组织毛细血管密度(BCDI)、增生毛细血管密度和VEGF表达.用RT-PCR检测VEGF和缺氧诱导因子-1α (HIF-1α) mRNA表达.结果模型组缺氧缺血侧脑组织坏死灶周围BCDI在第3天开始上升,并持续增加;BCDI显著高于假手术组(第14天:13.29±3.90条/HPF vs 6.08±1.50条/HPF,P＜0.01).正常新生大鼠脑组织偶见增生毛细血管,而模型组缺氧缺血侧脑组织增生毛细血管密度在第3、7天(0.54±0.15条/HPF和0.90±0.25条/HPF)显著高于假手术组(0.12±0.05条/HPF和0.13±0.07条/HPF,P＜0.01).VEGF主要由神经元、毛细血管内皮细胞和软膜细胞等细胞表达.缺氧缺血后脑组织VEGF mRNA表达上调,12h时VEGF mRNA表达显著高于正常(1.56±0.27 vs 0.95±0.21, P＜0.05);HIF-1α mRNA表达上调先于VEGF,3h时HIF-1α mRNA表达即显著高于正常(1.07±0.21 vs 0.64±0.28, P＜0.05).结论新生大鼠HIE模型脑组织有新生血管形成; HIF-1介导的VEGF表达上调在此过程中可能起重要作用.

金属止血夹在儿童肠道粗蒂息肉内镜下切除术中的应用

目的总结金属止血夹用于儿童粗蒂息肉切除的经验并对其应用技术、疗效及安全性进行探讨.方法 2001年10月～2002年12月,利用富士200型电子结肠镜、富士XQ200圈套器以及止血夹推送装置(HX-5QR-1)和金属钛止血夹(MD-850),对5例直径>1.0 cm粗蒂息肉,采用止血夹钳夹结扎加电凝切除法,即利用止血夹钳夹息肉近基部蒂柄,完全阻断息肉血流,再行圈套电凝电切.本组5例术前进行肠道准备,手术在静脉麻醉下进行,术后收集组织进行病理检查.结果共切除息肉6枚.其中横结肠息肉2枚,降结肠息肉4枚;幼年性息肉3枚,腺瘤性息肉3枚.所有息肉均完整切除,无出血及穿孔并发症;术后患儿症状消退.结论金属止血夹能有效防止粗蒂息肉切除中的出血和穿孔并发症.内镜下金属止血夹加电凝切除术是一种安全、有效的治疗儿童胃肠粗蒂息肉方法.

新型气体信号分子硫化氢在高血压发病中的变化及意义

目的研究自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉硫化氢(H2S)转化率及血浆H2S水平的变化,探讨H2S在自发性高血压形成中的作用.方法 4周龄雄性SHR大鼠24只,随机分为SHR对照组(n=8)、SHR+硫氢化钠(NaHS)组(n=8)及SHR+DL-propargylglycine(PPG,胱硫醚γ-裂解酶抑制剂)组(n=8).同样周龄相同遗传背景的正常Wistar大鼠(Wistar-Kyoto rats, WKY) 24只,随机分为WKY对照组(n=8)、WKY+外源性H2S供体硫氢化钠(NaHS)组(n=8)及WKY+PPG组(n=8).SHR对照组及WKY对照组大鼠每日腹腔注射无菌注射用水2.5 ml,SHR+NaHS组及WKY+NaHS组每日腹腔注射NaHS (剂量为56 μmol/kg),SHR+PPG组及WKY+PPG组大鼠分别每日腹腔注射PPG(剂量为37.5 mg/kg).5周后检测各组大鼠血压、左心室与全心重量比值、胸主动脉H2S转化率与血浆H2S水平.结果实验5周后,各组SHR大鼠胸主动脉H2S转化率及血浆H2S水平均明显低于相应WKY大鼠(P＜0.05),SHR+PPG组胸主动脉H2S转化率及血浆H2S水平与SHR对照组相近,SHR+NaHS组的胸主动脉H2S转化率及血浆H2S水平均明显高于SHR对照组( P＜0.05);WKY+PPG组的胸主动脉H2S转化率及血浆H2S水平均显著低于WKY对照组(均P＜0.05),WKY+NaHS组的胸主动脉H2S转化率显著高于WKY对照组(P＜0.05),其血浆H2S水平与WKY对照组相近;各组SHR大鼠血压较相应WKY大鼠显著升高(均P＜0.05),SHR+PPG组大鼠血压与SHR对照组相似,SHR+NaHS组血压较SHR对照组明显降低(P＜0.05);WKY+PPG组血压较WKY对照组显著升高(P＜0.05),WKY+NaHS组血压与WKY对照组相比差异无显著性.结论内源性H2S生成减少是维持机体基础血压的重要因素,也是自发性高血压形成的重要原因,给予外源性H2S提供了干预大鼠高血压形成的新思路.

γ干扰素和神经生长因子诱导神经母细胞瘤细胞分化及TrkA的表达

目的在人神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)SMS-KCNR细胞系中分别应用γ干扰素(IFN-γ)、神经生长因子(NGF)及联合应用IFN-γ和NGF作为诱导剂诱导NB细胞分化,观察细胞形态学的变化、细胞增殖情况及TrkA mRNA的表达.方法常规方法培养人SMS-KCNR细胞系细胞,收取第10天培养的细胞,提取总RNA,应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测TrkA mRNA的表达水平,应用锥虫兰染色方法计数活细胞数并用倒置相差显微镜观察细胞形态学的改变,计数细胞分化率.结果在KCNR细胞中同时负荷IFN-γ和NGF的细胞表现出比单独负荷IFN-γ或NGF更加显著的形态学分化(P＜0.01).前者细胞增殖抑制更加明显(P＜0.01).在IFN-γ组,TrkA mRNA表达增加(P＜0.01),NGF组TrkA mRNA的表达未见明显改变(P＞0.05),联合用药组TrkA mRNA的表达有明显降低(P＜0.01).结论在人SMS-KCNR细胞中,联合应用IFN-γ和NGF比单独应用二者有更加显著诱导分化的作用.与IFN-γ诱导TrkA mRNA表达增加不同,联合用药导致TrkA mRNA表达下调,可能存在某种负调节机制.研究结果表明,联合应用IFN-γ和NGF可能是治疗NB甚至是晚期NB的合理方案.

不同剂量氨基胍对内毒素休克兔模型肾功能的影响

目的探讨早期应用不同剂量氨基胍对内毒素休克模型兔肾功能的保护作用及氨基胍治疗的剂量、时间依赖性.方法 40只新西兰白兔麻醉后被随机分成5组:对照组、内毒素组、氨基胍一组、二组、三组.除对照组外,其他四组每只兔静脉推注大肠杆菌O55B5内毒素(LPS)400μg/kg,当平均动脉压下降为原来的30%时,休克诱导成功.氨基胍一、二、三组每只兔分别静脉注射30、50、100 mg/kg的氨基胍,对照组及内毒素组给予相应剂量的生理盐水.在注射内毒素前(T0)、休克时(T)、休克后第1(T1)、2(T2)、3(T3)、4(T4)、5(T5)、6(T6)小时记录尿量,在T、T2、T4、T6时间点测定血硝酸盐、亚硝酸盐(NO-3/NO-2,NO的代谢产物)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)、尿视黄醇结合蛋白(RBP).结果 LPS可引起血NO-3/NO-2、BUN、Scr、尿RBP显著升高[分别从T点的(47±5)μmol/L、(5.8±1.5) mmol/L、(41±10)μmol/L、(240±61)ng/L,升高至T6 点的(160±18)μmol/L、(15.5±1.8) mmol/L、(166±23) μmol/L、(1580±180) ng/L, P均<0.01].尿量显著减少[从T0点的(17.6±2.8)ml降低到T6 点的(1.3±0.6)ml,P<0.01] .三个氨基胍组均可减轻 NO-3/NO-2、BUN、SCr、RBP升高的程度,增加尿量.氨基胍一、二、三组在T6点的NO-3/NO-2分别为(58±8)、(50±14)、(46±9)μmol/L,与内毒素组相比差异有极显著意义(P均<0.01);BUN分别为(8.2±2.9)、(7.5±1.9)、(5.5±1.8)mmol/L, 与内毒素组相比差异有极显著意义(P均<0.01);RBP分别为(350±60)、(272±72)、(248±103) ng/L,与内毒素组相比差异有显著意义( P分别<0.05、<0.05、<0.01);尿量分别为(11.1±2.4)、(12.1±1.3)、(17.1±2.4)ml,与内毒素组相比差异有极显著意义(P均<0.01).效果以大剂量氨基胍组为著.结论氨基胍可抑制NO的形成,且呈时间、剂量依赖性.氨基胍可不同程度地减轻LPS引起的尿量和肾功能改变.

急性白血病细胞中CD19的表达及其意义

目的观察CD19在儿童急性白血病(AL)中的表达与分布,为白血病的诊断、鉴别以及导向治疗提供依据.方法采用27个荧光直标单克隆抗体(简称单抗)及CD45/SSC双参数设门多色流式细胞术对210例儿童 AL细胞进行免疫诊断和分型,并对CD19在各种类型AL细胞中的表达情况进行分析.结果在93例急性淋巴细胞性白血病(ALL)病例中,CD19 的阳性率(99%,92/93) 明显高于B细胞系其他相关抗原的阳性率,如CD10(88%,82/93,P= 0.003) 、CD20(25%,23/93,P= 0.001)和CD22 (60%,56/93,P= 0.001);CD19在9例含B系成分的杂合型白血病(hybrid acute leukemia, HAL)中全部表达,而在24例T细胞系ALL和5例T/My(髓)HAL上均无表达;在79例急性髓系白血病(AML)中,仅5例(6%)CD19阳性,明显低于它在B系ALL中的阳性率(99%,P= 0.001). 结论 CD19对B系ALL细胞的特异性较好,敏感性高,在B细胞系各个分化阶段持续稳定表达,是诊断B系ALL较为可靠的表面标记,也可作为导向治疗B系ALL的理想靶点.

儿童特发性血小板减少性紫癜小巨核细胞的研究

目的探讨巨核细胞生长发育、小巨核细胞的出现在儿童特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenia purpura, ITP)中的意义.方法对46例儿童ITP进行常规骨髓形态学、骨髓涂片CD41免疫酶标染色检测,并采用ELISA方法检测血小板相关抗体的含量.并分为急性ITP(acute ITP, AITP)组和慢性ITP(chronic ITP,CITP)组进行统计学分析.结果 46例中36例为AITP,10例为CITP;45例骨髓巨核细胞计数增高或正常,1例降低者为CITP.小巨核细胞检出率为98%(45/46),I型淋巴样小巨核细胞检出率为35%(16/46).CITP I型淋巴样小巨核细胞的检出率及计数高于AITP,其他三型小巨核细胞计数低于AITP,产板巨核细胞比例以及各型小巨核细胞数量与血小板相关抗体的含量无相关性.结论儿童ITP骨髓巨核细胞系存在不同程度病态造血,其原因可能并非完全由于免疫因素,部分病例可能以骨髓巨核细胞自身异常为主.I型淋巴样小巨核细胞的出现以及数量的高低可在一定程度上提示ITP病程的长短和预后.

甘露糖结合凝集素基因54号密码子多态性与川崎病易感性的研究

目的探讨甘露糖结合凝集素(MBL)基因第54号密码子多态性与中国汉族儿童川崎病的易感性和临床表型的关系.方法应用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性分析,对160例中国汉族健康儿童及95例川崎病患儿的MBL基因多态性进行检测.结果 (1)中国汉族健康儿童MBL基因多态性分布与文献报道的香港华人及高加索人种接近,无统计学差异. (2)川崎病患儿GAC等位基因频率高于健康对照组(0.258 vs 0.138,P＜0.01),而GGC等位基因频率低于健康对照组(0.742 vs 0.862,P＜0.01).GAC型等位基因与中国汉族儿童川崎病密切相关[OR=2.18,95% CI(OR值的95%置信区间)为1.38～3.44,P＜0.05].(3)在川崎病患儿中,GAC型等位基因携带者其病史有前驱感染史者多于GGC纯合子(P＜0.01).结论川崎病发病受遗传背景的影响,与 MBL第54号密码子基因多态性密切相关.

先天性风疹综合征致动脉导管未闭合并房间隔缺损一例

患儿女,21天.因"发现心脏杂音20天"入院.患儿系孕38+5周,因羊水过少行剖宫产出生,手术顺利,Apgar 评分1分钟为8分,5分钟为9分.出生体重2 000g,羊水清,70ml,胎盘轻度钙化,脐带无异常.

以肾小管间质肾炎为突出表现的狼疮肾炎一例

患儿男,11岁,主因低热、乏力47 d,蛋白尿、糖尿40 d入我院.入院前47 d无明显诱因患儿自感发热,体温37.8℃,当地医院按"上呼吸道感染"治疗,无明显效果,体温波动于37～38℃之间.40 d前查尿常规发现尿蛋白(+)、尿糖(+++),进一步查血沉63 mm/1 h、血尿素氮4.15 mmol/L、血肌酐122 μmol/L、抗链球菌溶血素"O"升高(具体不详),给予青霉素治疗,因无好转而入我院.

Satoyoshi 综合征一例

患儿女,16.5岁.因反复发作、严重肌肉痛性痉挛约10年为主诉就诊.患儿出生至6岁生长发育正常,尔后生长发育迟缓,9岁后发育停滞.头发脱落、不长.全身肌肉(包括面颊部、颈部、腹部、大腿、小腿部)经常痉挛,发作时全身大汗、疼痛难忍,神志清醒.牙齿疼痛、自行断裂而只剩残根.常年腹泻,食用水果后为甚.左膝内翻畸形.至今第二性征未发育,无月经.患儿父母及家族中无类同患者.外院曾予以抗感染,助消化,营养、钙剂、多种维生素包括VitD治疗,均未见疗效.近期在我院多科就诊,未能明确诊断而转至我科.

面中线恶性肉芽肿一例

患儿男,6个月.因发热15天,右鼻腔渗脓血12天,声音嘶哑8天入院.15天前开始发热,体温高达40°C.于当地卫生院输液治疗,病后3天于鼻腔滴入退热剂,随即该侧鼻腔红肿,渗脓血液.病后8天右耳道渗液,哭声嘶哑,吸吮无力.体检:T 39.2℃,P 132次/min,体重6 kg.发育正常,精神萎靡,面色苍白.浅在淋巴结无肿大,无呼吸困难,牵拉右耳患儿啼哭,声音嘶哑.右鼻前庭溃烂结脓血痂,鼻中隔穿孔,口腔硬腭顶部中线两侧各有一瘘口,直径约0.7 cm,边缘规则,上有少许脓痂.心肺正常,肝脾不大.

小儿经皮内镜胃造瘘术一例

经皮内镜胃造瘘术(PEG)是在内镜下进行的无需外科手术和全身麻醉的经皮放置瘘管术.1980年Gauderer等[1]道德介绍PEG以来,国外已广泛开展,国内成人也见有报道[2],但尚未见小儿PEG术临床应用的报道.

支气管肺发育不良研究的新进展

支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia, BPD)是常发生于早产儿长期应用高浓度氧气和辅助机械通气后的一种慢性肺疾病.随着新生儿重症监护技术的迅速发展,越来越多的早产儿和极低体重儿得以存活,但BPD的发病率并未随之显著降低甚或有增高趋势,是新生儿重症监护的重要并发症和婴幼儿时期常见的慢性呼吸系统疾病.有关BPD的发病机制、预防和治疗研究是新生儿医学和呼吸病学的热点.

神经母细胞瘤细胞系血细胞分化抗原的表达

神经母细胞瘤(NB)是儿童常见的颅外实体瘤,预后相对较差.NB细胞系是由形态和生化特性多样的细胞群组成.NB细胞系从形态可分为三种类型的细胞:神经母细胞型(N型)、许旺细胞型(S型)和中间型 (I型)[1].

急性病毒性脑炎患儿血清中MMPs和TIMP-1的水平

2001年1月～2002年12月,我们应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测了我院收治的42例病脑患儿血清中MMP-2、MMP-9和TIMP-1的水平,结果与30例同年龄的非感染性神经疾病患儿的结果做了比较.

川崎病患儿无症状性心肌缺血的三磷酸腺苷-阿托品负荷超声检测

川崎病冠状动脉病变可无症状迁延,具有潜在的心脏风险.自1996年Noto等[1] 首次应用多巴酚丁胺负荷超声心动图诊断川崎病冠状动脉狭窄以来,儿童负荷超声检查的方法及其应用报道甚少.本研究探讨应用三磷酸腺苷(ATP)-阿托品负荷超声心动图,检测心室壁的局域运动变化,评价川崎病心肌缺血.

激素耐药肾病患儿肾小球病理的变化

肾小球病理改变对肾小球疾病的诊断、治疗及预后判断有重要价值.已知肾小球病理改变是动态变化的,随着疾病的缓解或加重,病理改变也会相应随之变化.有关肾病综合征的病理转型我院已有报告[1].为进一步连续观察其病理动态变化,现将我院近年来观察的40例原发性肾小球疾病的病理变化报告如下.

先天性心脏病经导管介入治疗指南

儿科医学教育的改革势在必行

1820年在巴黎建立了世界上第一个儿童医院,1834年俄国建立了世界上第二个儿童医院,并规定儿科学为医学生的必修课.从此,改变了儿科隶属于产科和内科,按患儿的年龄分别由产科医生和内科医生诊治的历史.儿科学迈出了向独立的学科发展的第一步.早期儿科学的内容也仅限于小儿疾病的诊治.嗣后,学术界逐渐认识到不同年龄段小儿的生理特点和病理现象各异,环境条件、膳食营养供应和卫生保健状况对儿童的健康和疾病发生发展的影响不同.