循环酶法测定血清同型半胱氨酸的临床应用研究

目的探讨循环酶法(Enzymatic cycling assay)测定血清同型半胱氨酸水平的临床应用价值.方法将循环酶方法与荧光偏振免疫法测定结果进行比较;首先利用高低值质控血清评价循环酶方法测定同型半胱氨酸的稳定性,并收集在我院住院且明确诊断的各20例糖尿病患者、高血压患者、冠心病患者、心梗脑梗患者、慢性肾功能不全患者及20名健康查体者的血清标本;另收集53例不同疾病患者血清标本,利用循环酶法与荧光偏振免疫法(FPIA)同时平行测定血清同型半胱氨酸水平.结果本方法的批内变异系数为3.07%(低值),3.99%(中值),4.21%(高值);批间变异系数分别为4.00%(低值),4.79%(中值)与4.58%(高值).本法与荧光偏振免疫法相关性良好(r=0.994,n=53).循环酶法测定不同疾病患者血清同型半胱氨酸水平分别为健康人(8.15±1.89)μmol/L,糖尿病组(8.88±1.36)μmol/L,高血压组(10.66±1.60)μmol/L,冠心病组(14.02±3.42)μmol/L,心梗或脑梗组(14.45±3.83)μmol/L,慢性肾功能不全组(15.21±3.50)μmol/L,结果与FPIA法测定值差异无统计学意义.结论循环酶法测定不同疾病患者血清同型半胱氨酸结果与临床上常规应用的FPIA法结果一致,但循环酶法可利用全自动生化分析仪快速、简便测定血清同型半胱氨酸.

国产替考拉宁对凝固酶阴性葡萄球菌的体外抗菌活性研究

目的观察国产替考拉宁对表皮、溶血葡萄球菌等凝固酶阴性葡萄球菌(coagulase-negative Staphycoccus,CNS)的体外抗菌活性.方法采用琼脂稀释法对国产替考拉宁进行224株表皮、溶血葡萄球菌等凝固酶阴性葡萄球菌的低抑菌浓度(MIC)测定, 并与进口替考拉宁进行了抗菌效果对比.结果国产替考拉宁对124株表皮葡萄球菌的MIC90为4 μg/ml,对42株溶血葡萄球菌和14株里昂葡萄球菌的MIC90均为2 μg/ml.结论国产替考拉宁对224株凝固酶阴性葡萄球菌具有较强的抑菌活性.224株凝固酶阴性葡萄球菌对国产和进口替考拉宁的敏感率均为100%.

血管性血友病因子前肽双抗体夹心法检测及临床应用

目的建立血浆血管性假血友病因子前肽(vWF-pp)的测定方法,并检测152例健康体检者及36例冠心病患者和38例同龄正常对照组的血浆vWF-pp水平.方法采用酶联免疫吸附分析(ELISA)双抗体夹心法对152例体检者和36例冠心病患者血浆vWF-pp进行测定.结果 152例体检者vWF-pp水平为496.44±167.24 μg/L.50～60岁年龄组vWF-pp显著高于40岁以下年龄组(P<0.01).男女间vWF-pp水平差异无统计学意义(P>0.05).男51～60岁年龄组与16～20,21～30,31～40岁的3个年龄组vWF-pp水平差异都具有显著的统计学意义(P<0.05);152份体检者血浆样品vWF-pp水平与年龄的相关性分析显示,vWF-pp水平与年龄呈显著的正相关关系(r＝0.444,P＝0.000).冠心病组vWF-pp水平为1051.6±331.9 μg/L ,与同年龄段对照组vWF-pp水平485.2±119.4 μg/L比较具有显著性差异(P<0.001).结论该法测定血浆vWF-pp具有特异、快速、灵敏的优点,具有良好的临床应用前景.

尿液细胞成分定量分析方法学研究

目的探讨并比较尿液有形成分定量方法与镜检定量计数的关系. 方法采用离心和不离心,人工和自动化仪器(镜检计数定量和仪器定量计数),同一标准和实验方案和多中心的方法,分析尿液有形成分定量方法之间的差异. 结果离心定量检测法有形成分误差较大.不离心多样品量的细胞计数(扩大细胞计数范围)、UF-100尿流式分析仪及AVE-763全自动尿沉渣智能镜检分析仪能较为真实反映尿有形成分的实际浓度. 结论规范尿液离心检查法对于检查尿液病理性有形成分是泌尿系统疾病诊断的理想方法,但不适用于沉渣有形成分定量.未离心多细胞数量的镜检定量能较准确反映沉渣有形成分的实际浓度.UF-100和AVE-763分析仪由于计数细胞数量多,能较为准确反映尿液的真实情况.但对于细胞识别的功能则应另行探讨.

高效液相色谱法同时测定血浆同型半胱氨酸及其相关硫醇物浓度方法的建立

目的建立一种柱前衍生反相高效液相色谱-荧光检测法同时测定血浆同型半胱氨酸(homocysteine, Hcy)、半胱氨酸(cysteine, Cys)、半胱氨酰甘氨酸(cysteinylglycine, CysGly)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)的方法.方法以 tris-(2-carboxylethyl)-phosphine (TCEP) 为还原剂,7-fluorbenzo-2-oxa-1, 3-diazole-4-sulfonate (SBD-F) 为衍生剂,N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcystine,NAC)为内标,C8柱分离.流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液(25 mmol/L,pH 3.0),梯度洗脱,激发波长(λex)380 nm,发射波长(λem)510 nm,内标标准曲线法定量.结果 Hcy、Cys、CysGly、GSH的线性范围分别为1.0～160.0 μmol/L,30.0～1 040.0 μmol/L,2.0～300.0 μmol/L,1.0～130.0 μmol/L,具有良好的相关性,r为0.999 4～0.999 9.低检测限为0.1～2.0 μmol/L.日内精密度不超过3.0%,日间精密度除GSH为13.21%外均小于6.0%.平均回收率为87.24%～114.99%.结论本方法准确、灵敏、快速、特异,适合于实验室研究和临床常规检测.

调节性T细胞亚群变化与五种自身免疫性疾病的关系

机体通过调控活化自身反应性T细胞,可保护机体免受持续有害免疫反应的损害.近研究[1]表明,调节性T细胞(简称Treg)可主动抑制逃逸出被动耐受机制的自身反应性T细胞.目前已发现的Treg亚群有多种,CD4+CD25+ T细胞是研究较为深入的一类,大量动物实验证明,其数量缺乏和功能紊乱将导致严重或致命的自身免疫性疾病.但对其在人自身免疫性疾病发生中的作用目前还不明确,故本研究分析与探讨其与5种自身免疫性疾病的发病关系.

过敏原特异性IgE检测芯片的制备及初步应用

目的研制一种能同时对18种过敏原特异性IgE进行检测的蛋白芯片,并探讨其在过敏性疾病诊断中的应用价值.方法选择合适的固相载体,经L16(44×23)正交法对芯片制备,并对使用条件进行优化,以Scanarray 4000激光共聚扫描仪成像,Quantarray软件分析荧光强度.同时用自制芯片和IVT试剂盒对138份过敏性疾病患者血清进行对比检测分析.结果本研究的佳试验条件:以用NC膜为固相载体,血清稀释8倍,抗原抗体反应2 h,Cy3-亲和素浓度为1.25 μg/ml.将本研究研制的过敏原特异性IgE检测芯片与IVT试剂盒比较,阳性检出符合率为60.2%,两种方法对鸡蛋、海鱼、大豆、花生、大籽蒿花粉等过敏原的检出率无差异(P>0.05).结论本研究建立的过敏原特异性IgE检测芯片,具有血清用量少、同时检测多项指标、操作简便、价格低廉等优点,适合在临床检测工作中推广应用.

重组抗原酶联免疫吸附试验检测人疱疹病毒6型抗体的研究

人疱疹病毒6型(HHV-6)与幼儿急疹(ES)、良性和恶性淋巴增生性疾病、慢性疲劳综合征及多发性硬化症等发生有关,在免疫功能低下患者可引起致死性感染.

结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药基因突变快速检测方法的建立

目的建立结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药基因突变的快速检测方法.方法根据结核分枝杆菌标准株H37Rv序列,自行设计覆盖rpoB、katG、inhA基因突变区的系列寡核苷酸探针,并检测临床样品中结核分枝杆菌的基因突变情况,以此来判断耐药结果.结果在56个利福平耐药菌株中,有50个菌株都在rpoB基因上检出有突变,利福平耐药突变检出率为89.3%(50/56);有30个利福平敏感菌株rpoB基因上都未检出突变.有58个异烟肼培养的耐药菌株中有47个在katG或inhA基因上检出有突变,异烟肼耐药突变检出率为81.0%(47/58);有30个异烟肼敏感菌株katG或inhA基因上未检出突变.结论用膜芯片检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼的耐药性,具有较高的特异性和敏感性,可用于临床结核分枝杆菌耐药性的检测.

孕妇外周血中游离DNA分级分离方法的应用研究

目的探讨DNA片段差异性分级分离法对孕妇血浆中胎儿游离DNA富集的效果.方法取孕中期孕妇静脉血5 ml,分别提取血浆中游离DNA和白细胞DNA,用琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段,回收<400、400～1 000、1 000～3 000 bp部分凝胶中的DNA,扩增16个短串联重复序列(STR)遗传标志位点,同时扩增和检测孕妇白细胞基因组DNA和胎儿羊水细胞基因组DNA作对照,然后,用ABI 310基因分析仪检测.结果共检测3例孕妇外周血标本48个STR位点,其中有意义位点(即胎儿父源性等位基因可与孕妇等位基因区分的STR位点)31个.从血浆总DNA、<400、400～1 000和1 000～3 000 bp DNA组中成功检测到胎儿等位基因的位点数占有意义位点数的百分比分别为6.45%、29.03%、38.71%和9.68%,各组检出成功率的差异有统计学意义(χ2=13.432,P=0.004),而＜400和400～1 000 bp DNA组成功率较高. 结论孕妇血浆DNA中短片段组分(<1 000 bp)胎儿DNA含量相对较高,有望应用于无创性胎儿产前诊断.

非霍奇金淋巴瘤患者血清中MMP-9和MMP-2蛋白的检测及临床意义

肿瘤细胞及其基质细胞分泌的明胶酶B(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和明胶酶A(matrix metalloprotein-ase-2, MMP-2)在促血管生成、肿瘤细胞侵袭和转移灶形成中的作用已日益引起人们的关注[1,2].

脑血管病患者总同型半胱氨酸水平与血肌酐相关性及肾脏代偿调节的性别差异分析

目的探讨正常血肌酐(Scr)水平脑血管病患者总同型半胱氨酸(tHcy)水平、与血肌酐的相关性及肾脏代偿调节的性别差异.方法测定脑梗死(CI)组男278例,女160例,脑出血(CH)组男22例,女16例,短暂性脑缺血发作(TIAs)组男27例,女20例的空腹血清tHcy、Scr、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)并对上述3组患者伴有高血压、糖尿病的情况进行调查.结果 3组间比较:CI组血tHcy明显高于TIAs组(P< 0.001),CI组、CH组、TIAs组高同型半胱氨酸血症(HHe)发生率依次为41.5%、32.5%、19.1%(P= 0.008);Scr水平差异无统计学意义(P> 0.05).男、女组间(CI、CH、和TIAs组,男327例、女196例)比较:tHcy差异有统计学意义[(18.36±11.30)μmol/L,(13.11±6.21)]μmol/L,P< 0.001],男性明显高于女性;男性HHe发生率明显高于女性(47.1%,25.0% P<0.001);男性Scr明显高于女性(P<0.001);女性TG、TCHO、HDL-C、LDL-C明显高于男性(P= 0.002～P< 0.001);伴高血压、糖尿病男女性别之间差异无统计学意义(P> 0.05).Lg tHcy与Lg Scr经Pearson相关分析显示:男性组相关系数r=0.166(P= 0.003);女性r= 0.405(P< 0.001),女性相关系数明显高于男性.按性别分组、Scr分层作图显示:男性在Scr水平位于70～100 μmol/L区间内肾脏对血tHcy具有明显的代偿调节作用,女性则未表现出明显的肾代偿调节.结论血tHcy水平和HHe发生率在脑血管病的不同类型中差异有统计学意义.男性较女性血tHcy明显升高是致男性较女性多发脑血管病的一个重要原因.男、女Scr水平位于70～100 μmol/L区间肾脏对血tHcy代偿调节不同.

甲基化特异性PCR在原发性肝细胞癌p16INK4A基因甲基化检测中的应用

目的设计一种将亚硫酸氢化测序PCR和甲基化特异性PCR相结合的巢式PCR技术,即BS-MSP技术,对原发性肝细胞癌手术切除组织中p16INK4A甲基化情况进行检测.方法基因组DNA经亚硫酸氢化修饰后,首先通过亚硫酸氢化测序PCR评估模板的质量,然后再分别用甲基化和非甲基化特性PCR分析基因的甲基化状态,并将所得的扩增产物进行测序验证.结果在40例HBV感染的肝细胞癌中,有3例(7.5%)因模板质量原因无法检测,其余37例标本中p16INK4A基因甲基化发生率为78%,测序结果证实了所用方法的可行性.结论 BS-MSP技术对于肿瘤发生过程中基因甲基化的研究,以及临床诊断方面都具有一定的应用价值.

高效液相色谱法检测精浆辅酶Q10水平及氧化应激研究

目的建立人精浆中辅酶Q10高效液相色谱测定方法,探讨正常生育男性及不育症患者精浆中辅酶Q10含量水平差异及其与男性不育氧化应激反应的关系.方法精浆样品经甲醇沉淀蛋白后,用正己烷提取辅酶Q10组分,45℃下氮气流吹干后溶解,以Lichrospher C18化学键合硅胶为固定相,异丙醇～甲醇～四氢呋喃(55∶ 39∶ 6)为流动相进行色谱等度分离,在275 nm波长下以辅酶Q9为内标定量检测,并对195例不育症患者和23名正常生育对照男性进行分析.结果在所建立的分析条件下,辅酶Q10及内标辅酶Q9色谱保留时间分别约为5.83 min及4.97 min,峰形清晰对称,与样品中其余内源性物质分离完全,定量准确.辅酶Q10浓度在0.01 ～10.00 mg/L范围线性良好.批间(n=5)及平均批内(n=6)测定的相对标准偏差分别为0.80%和1.81%.样品测定回收率为94.1%～99.0%.对23例正常生育男性及195例不育症患者精浆中辅酶Q10含量测定结果分别为(37.1±12.2) μg/L和(48.5±20.4) μg/L,统计学分析表明两组之间的差异有统计学意义(P<0.01),随着精液中精子数量越少,这种差异性越显著.结论精浆CoQ10水平可作为男性不育研究时一项有用的生化参考指标,其升高或降低能反映生殖系统氧化应激反应状况,为临床治疗和有关男性生殖功能机制研究提供参考指导.

多个短串联重复序列位点在遗传性出血性毛细血管扩张症基因诊断中的应用

目的建立一种遗传性出血性毛细血管扩张症(HHT)间接连锁分析方法进行基因定位,为进一步查找基因突变位点提供信息.方法采用荧光标记PCR扩增技术、复合PCR技术和基因扫描的方法,对100名无关汉族个体的6个短串联重复序列(short tandem repeat,STR)进行多态性分析,对两个HHT家系38名成员6个STR位点进行多态性连锁分析和单倍型分析.结果 6个STR位点基因型分布均符合Hardy-Weinberg 平衡(P>0.05),杂合度(H)大于0.723,多态信息含量(PIC)大于0.704.两个家系连锁分析结果表明,HHT与12号染色体的ALK-1基因紧密连锁.结论选择的6个STR位点具有较好的多态性,结合基因扫描技术能够应用于HHT的间接连锁分析,该方法快速、准确、客观.

聚合酶链反应与反向线点杂交检测沙眼衣原体及分型

目的建立和评价一个新的多重和巢式PCR-反向线点杂交试验(RLB)检测泌尿生殖道沙眼衣原体及其分型方法.方法该试验设计了3对引物分别针对CT外膜蛋白(omp1)基因VD2区和质粒进行扩增,用CT15种血清型(A、B/Ba、C、D/Da、E、F、G/Ga、H、I/Ia、J、Ja、K、L1、L2 和L3)探针与扩增后的产物杂交.经COBAS Amplicor检测的355份标本,其中277份尿液,2份男性直肠拭子和78份女性宫颈试子,进行PCR-RLB检测CT并分型.结果 192份COBAS Amplicor阳性标本中175份PCR-RLB阳性,其中93.1%(163/175)的CT感染可被正确分型,其单一型感染分型结果与DNA测序结果一致.163份COBAS Amplicor阴性标本中6份巢式PCR-RLB阳性.85.3%(139/163)为单一型CT感染,常见的CT是E(38.6%)F (28.5%)和D(18.2%).14.7%(24/163)为CT混合感染,混合感染以H和K为主.结论 PCR-RLB检测CT是一种简便、快速、特异和敏感的方法,并准确的进行CT分型,为CT感染的临床诊断和分子流行病学研究提供了一种可靠的方法.

荧光定量与芯片杂交快速诊断患儿化脓性脑膜炎

临床确诊化脓性脑膜炎(化脓)主要依赖脑脊液细菌培养,但其耗时较长,阳性率低,难以适应临床早期诊断.为此,我们对疑似化脑患儿行脑脊液细菌DNA荧光定量及芯片杂交检测,并进行脑脊液细菌培养对照,效果较好.

高效液相色谱霉菌酸分析方法的建立

高效液相色谱 (HPLC) 分析霉菌酸(MA)快速鉴定分枝杆菌是一种有效的化学分析方法.MA化学结构复杂,目前已知3类.棒状杆菌MA;诺卡菌MA;由C60-C90组成的分枝杆菌MA[1].国外一些学者对MA进行了广泛研究[2],一致认为,HPLC MA分析能够快速、准确地鉴定医学上大部分重要的分枝杆菌.我们从2000年着手HLPC MA分析方法的研究.

胃腺癌细胞环磷酸腺苷和环磷酸鸟苷含量的变化

细胞信号传导过程异常可导致细胞增殖、转化和肿瘤的发生[1].深入探讨受体水平后信号传导通路与肿瘤的关系,对于肿瘤的早期诊断和治疗具有深远的理论价值和实际的临床意义.

人神经干细胞异种移植示踪检测分析

目的摸索人胎脑神经干细胞(hNSC)在动物移植研究中理想的示踪检测方法,探讨hNSC移植后的命运,为新生儿缺氧缺血性脑损伤的干细胞治疗提供依据.方法用添加表皮生长因子+碱性成纤维细胞生长因子+白血病抑制因子的N2培养基从流产的人胚胎前脑组织培养出神经干细胞球,通过免疫荧光技术检测神经干细胞巢蛋白(Nestin)抗原标志和细胞分化潜能以鉴定其干细胞属性.取体外培养6 d的神经干细胞集落,进行PKH26标记后培养和分化示踪.将培养14 d的神经球移植到缺氧缺血性脑病的新生鼠侧脑室,12只鼠分为PKH26标记示踪组(4只)、免疫反应检测组(4只)和对照组(4只),于移植后第4、7、14 天杀鼠取脑,全脑切片,行抗人细胞核抗体(抗-hNuc)和抗人神经丝抗体(Anti-hNF)的特异性免疫反应检测及PKH26的荧光观察.结果体外培养获得典型人胎脑神经干细胞球.PKH26能高效标记神经干细胞,标记的阳性率＞95%,标记分子可伴随干细胞增殖、迁移和分化,但不进入细胞突起,仅位于胞体.Anti-hNuc免疫荧光检测和PKH26示踪结果显示:植入脑室的hNSC,4 d即可迁移到嗅球、额叶皮层内侧中央前区、海马、枕叶皮层等部位的颗粒层内,小脑蒲氏细胞层有单层标记细胞排列,中脑区域也有广泛的标记细胞分布,损伤灶区有明显多的移植细胞分布.抗-hNF检测结果显示:在大脑皮层的颗粒层有阳性反应细胞,彼此间有连接发生.结论可用PKH26对体外培养获得的hNSC进行标记示踪.Anti-hNuc可用于检测移植细胞在受体鼠脑内的分布,抗-hNF可用于检测移植细胞的成神经元分化及神经元间发生的连接.hNSC经脑室途径移植缺氧缺血性损伤的新生大鼠脑,可快速迁移到全脑多处远距离部位,并构建神经元连接,损伤灶区对移植细胞有牵引作用.

荧光定量聚合酶链反应检测人急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因方法的建立

目的制备荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法进行人急性早幼粒细胞白血病(APL)融合基因PML-RARα(bcr1型)mRNA表达量分析的RNA标准品,为白血病微小残留状态(MRD)的监测奠定基础.方法体外转录RNA的方法制备目的基因PML-RARα及管家基因ABL(Ableson gene)RNA标准品.结果目的基因PML-RARα的RNA标准品浓度分别为1×106、1×105、1×104、1×103 、1×102拷贝/μl时CT(threshold cycle,循环阈值,即产生可被检测到荧光信号所需的少循环数)值分别为20.09、23.58、26.35、29.63、33.48.标准曲线的斜率为-3.30,相关系数为0.999.管家基因ABL标准品浓度分别为1×106、1×105、1×104、1×103 、1×102拷贝/μl时,CT值分别为17.27、20.49、24.00、27.28、30.41.标准曲线的斜率为-3.24,相关系数为1.000.结论构建的两个RNA标准品可以得到良好的标准曲线,且标准曲线显示线形关系良好,标准品构建成功.

人Survivin基因克隆和单克隆抗体的研制及在肝癌中的表达

目的对人Survivin基因进行克隆,制备和鉴定针对人Survivin的单克隆抗体,检测Survivin在肝癌中的表达.方法利用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MCF-7扩增克隆Survivin 基因,构建可表达Survivin蛋白的原核表达载体,在大肠杆菌中表达MS-Survivin融合蛋白.以纯化的融合蛋白免疫BALB/C小鼠,取其脾细胞,用传统杂交瘤技术与小鼠骨髓瘤细胞融合及次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养.单克隆杂交瘤上清经ELISA双筛后,进行亚类和Western blot分析.免疫化学方法检测Survivin在肝癌中的表达情况.结果克隆了429 bp的Survivin全长基因.经ELISA双筛,获得了4株能稳定分泌针对Survivin的单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌抗体亚类均为IgG1.Western blot结果显示,抗Survivin单抗可与MS-Survivin融合蛋白呈特异性结合.免疫细胞化学显示,该单抗与人肝癌HepG2细胞株呈阳性反应,并且可与肝癌组织结合,呈强阳性反应.结论以分子生物学技术克隆了凋亡抑制因子人Survivin基因,通过原核表达产物制备并纯化了针对Survivin的单克隆抗体,Survivin可在肝癌细胞和肝癌组织中表达,为深入研究Survivin的功能和临床检测肿瘤组织及体液中的Survivin奠定了可靠基础.

同型半胱氨酸的检测和临床应用

本文阐述了检测同型半胱氨酸的重要性.高同型半胱氨酸血症与心、脑血管病患率与死亡率有明显关系,是一个新的心、脑血管病的危险因子及预测因子,必须予以充分重视 .鉴于我国对此项检测尚不普及的情况,作者就开展此项检测中的某些问题,如:检测人群的选择、正常参考范围确定、质量保证、临床研究中应注意的问题提出了建议.

我国血细胞分析参考系统的建立

为了解决血液分析仪的校准存在的问题,卫生部临床检验中心按照国际血液学标准化委员会和国际标准化组织颁布的国际标准,在部中心建立了血细胞计数的参考系统,研究的主要内容包括:(1)建立了血细胞分析校准实验室,并作为医学实验室中的首家实验室通过了国家实验室认可委员会ISO17025校准实验室的认可;(2)首次在国内建立了血细胞分析的参考方法并与国外的参考实验室长期进行结果的比对;(3)使用参考系统定值的新鲜血或校准物为常规检测实验室提供校准服务,开辟了血液分析仪校准的新途径;(4)建立了二级标准检测系统的方法并与国外参考实验室进行长期的结果比对,同时将经验推广到全国26个省、自治区、直辖市,建立了比对实验室网络;(5)起草了多个卫生部行业标准和技术要求.目前该系统的应用领域主要包括:临床检验中心、医疗机构的临床实验室、体外诊断试剂的政府管理机构、疾病控制系统等.

多位点测序技术在病原菌核型分析中的应用

随着分子生物学研究技术的发展,有人说在未来5～10年中,对人类健康做出贡献的关键生物技术是传染病的分子诊断技术.

猪链球菌Ⅱ型致脑膜炎菌血症一例

我科于2005年8月从1例脑膜炎合并败血症患者的脑脊液,血液标本中同时分离出1株猪链球菌Ⅱ型(Streptococcus suisⅡ).

梅毒螺旋体特异性抗体检测方法的实验室评价

梅毒是由梅毒螺旋体引起的性传播疾病.梅毒螺旋体血细胞凝集 (TPHA)、明胶凝集(TPPA)、酶联免疫吸附试验 (ELISA)、荧光密螺旋体抗体吸收(FTA-ABS)、蛋白印迹试验(WB)等.特异性试验本研究细胞应用检测了252份血清样本,对临床常用的前4种检测梅毒特异性抗体的方法进行比较.

核酸基础序列扩增法检测移植术后巨细胞病毒IE-mRNA的实验研究

传统检测移植术后巨细胞病毒(Human cytomegalovirus, HCMV)感染的方法很多,但各一定的局限性.我们自2004年1月建立了核酸基础序列扩增法(NASBA法)检测IE-mRNA和pp67-mRNA的试验条件,对42例器官移植受者的外周血标本进行了检测,并与pp65抗原检测结果相比较.

支原体培养假阳性结果原因分析

解脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)是泌尿生殖道中非淋菌性炎症中常见的病原体.商品化的Uu-Mh二合一液体培养以基因其快速和经济的特点而在临床广泛应用,但我们在工作中发现此方法假阳性较高.因此,我们对300份泌尿生殖道标本采用Uu-Mh二合一液体培养法和传统的液体-固体培养法进行对比研究.

精子的运动与活率

一、概述随着医学科学的发展,男科学的迅速崛起,不育症的患者增加,传统的精液常规检查已经不能满足临床发展的需要,必须与时俱进地向前发展.评估精液的质量依赖4个要素:

基于日常检测结果的核酸扩增检测假阳性统计室内质量控制方法

目的建立一种利用核酸扩增检验实验室日常检测数据进行定性测定假阳性监测的实验室室内质量控制方法.方法以实验室日常不少于20次检测的阳性率比值为基础,计算阳性率比值的均值()和标准差(s),绘制质控图,以1+2S为"告警"规则,1+3S和3+2S为失控规则.结果对实验室212次HBV DNA 聚合酶链反应(PCR)实测数据分析, 和s分别为0.527和0.078,与前20次测定的(0.532)和s(0.09)相近.212次测定中,出现5次超出±2s,按照所定的质控规则有两次失控.符合统计上的正态分布. 结论为核酸扩增常规检测提供了一种具有可操作性的假阳性统计室内质控方法.

对循环酶法同型半胱氨酸测定试剂盒的评价

目的对循环酶法同型半胱氨酸测定试剂盒进行临床应用评价,以确定其分析性能是否符合临床实验室应用的要求.方法依据美国国家临床实验室标准化委员会(NCCLS) 颁布的EP5-A, EP6-A, EP7-A分别对九强公司生产的循环酶法同型半胱氨酸测定试剂盒进行了精密度评价、线性评价和抗干扰实验.结果高、低浓度水平的批内精密度CV分别为1.23%和3.87%,总精密度CV分别为2.60%和4.03%.线性范围:在0～50.0 mol/L范围内,测定结果为线性.结合胆红素在20 mg/dl、乳糜在1.2%、抗坏血酸在30 mg/dl以内,对试验无明显的干扰,干扰相对偏差<4%.血红蛋白在13.3 g/L内,干扰偏差不大于7%.结论北京九强公司生产的循环酶法同型半胱氨酸检测试剂盒在测定精密度、线性范围、抗干扰等方面的性能可以满足临床检测的需要.

中华检验医学杂志读者调查解析

当今生命科学领域突飞猛进的发展给临床检验医学专业注入了无限的生机与活力,也为其发展提供了机遇[1].

厌氧菌与盆腔炎的关系及盆腔炎感染的厌氧菌群的分布

盆腔炎是危害妇女健康的常见疾病,阴道的微生态失调(dyshiosis)致阴道固有细菌上行而致的内源性机会感染是盆腔炎的主要原因,对引起盆腔炎感染的厌氧菌群的鉴定和分布进行分析,有助于掌握盆腔炎的发生和发展规律,为临床治疗提供依据.

下呼吸道感染病原菌群的分布及耐药性分析

本研究总结2001-2003年间收住呼吸科的下呼吸道感染患者分离到335株致病菌的分布及对耐药性进行分析,了解下呼吸道感染菌群的分布特点及耐药变迁,以期指导临床合理用药.

葡萄球菌诱导型克林霉素耐药的检测

许多临床微生物实验室采用仪器或肉汤微量稀释法进行抗生素敏感试验.这两种方法能检测大多数抗生素耐药机制,但是不断增加的葡萄球菌诱导型克林霉素耐药(MLSBi)用标准的药敏试验方法不能检测.

问:如何对β内酰胺类/β内酰胺酶抑制剂复合物进行药敏质量控制?

答:目前大多数实验室只用大肠埃希菌ATCC 25922、金黄色葡萄球菌ATCC 25923、绿脓假单胞菌ATCC 27853、粪肠球菌ATCC 29212对日常药敏试验和M-H培养基进行质量控制,但是在细菌室中要准确测定阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦等β内酰胺类/β内酰胺酶抑制剂复合抗菌药物对相关细菌的药敏试验结果时,应严格按照CLSI的规定使用大肠埃希菌ATCC 35218对β内酰胺类/β内酰胺酶抑制剂复合物进行药敏试验质控.否则,此类抗菌药物的药敏试验结果是不可靠的.

烟台卓越生物技术有限责任公司征集技术合作

电子文件在临床实验室管理中的应用

实验室信息系统(Laboratory Information System, LIS)是医院信息系统(Hospital Information System, HIS)的一个部分,随着计算机性能不断提高,价格下降,计算机已在实验室得到越来越广泛的应用.