中华检验医学杂志
Chinese Journal of Laboratory Medicine 중화검험의학잡지
- 主管单位： 中华医学检验杂志
- 主办单位： 中国科学技术协会
- 影响因子： 1.40
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-4452/R
- 国内刊号： 韩锟
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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住院患者急性肾损伤的发病情况调查
目的 通过分析血清肌酐(SCr)变化水平调查综合医院急件肾损伤(AKI)发病率及其与死亡率的关系.方法 通过实验室信息系统采集北京协和医院2006年6月1日至2007年5月31日所有住院患者的SCr检测数据,筛选至少检测1次的患者作为研究对象,收集患者临床常规资料.分析SCr枪测次数与性别年龄的关系.分析SCr上升水平与性别、年龄及检测次数的关系,并对其进行分层分析,与哈佛大学研究比较.统计AKI发病率及其疾病种类的关系,并进一步分析AKI的发生与重症临护病房患者死亡率的关系.结果 1年内住院患者共36855例,其中16934例检测1次SCr,15233例检查2次以上,男性、高龄患者检测次数偏多(P<0.01).SCr上升绝对水平与年龄显著相关(P<0.01),与性别无关;其上升的相对水平与年龄、性别均无关(P>0.05).随着SCr变化程度的增加,检测次数显著增加(P<0.01).以SCr短时间上升≥50％作为AKI的入选标准,本院住院患者AKI的发病率为8.46％,以创伤和中毒(16.7％)、感染(16.0％)、血液系统疾病(16.1％)和肿瘤(12.7％)发生率高,ICU和内科加强医疗病房(MICU)的AKI发生率分别为27.7％和55.2％.MICU患者死亡率随SCr上升水平的增加而显著增加;ICU发生AKI患者的病死率为23.3％,明显高于ICU总死亡率,经校正后的OR为2.7(P<0.01).结论 通过监测SCr水平变化判断的AKI发生率明显高于临床实际诊断的发生率,且本方法简便易行,可操作性强,对于AKI的早期发现和干预具有重要临床意义.
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家族性额外小染色体不育症一例检测分析
临床核型分析应用较多的是染色体G显带技术和常规荧光原位杂交(FISH)技术,但这些方法只能检测比较简单的染色体数目和结构异常.
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凝固酶阴性葡萄球菌菌种鉴定与苯唑西林耐药凝固酶阴性葡萄球菌检测准确性
目的 评价凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)菌种鉴定与苯唑西林耐药凝固酶阴件葡萄球菌(MRCNS)检测的准确性.方法 139株临床分离CNS,经ID 32 STAPH鉴定到种,用头孢西丁(FOX)、苯唑西林(OXA)纸片扩散法检测MRCNS,以Slidex MRSA detection乳胶凝集法检测青霉素结合蛋白2a(PBP2a)作为参考方法.结果 139株CNS鉴定为8个种,依次为溶血葡萄球菌、表皮葡萄球菌、人葡萄球菌、木糖葡萄球菌、腐生葡萄球菌、耳葡萄球菌、模仿葡萄球菌、沃氏葡萄球菌.FOX纸片法总的敏感度和特异度为99.0%和86.0%;OXA纸片法总的敏感度和特异度为91.7%和74.4%.影响FOX纸片法敏感度的菌种为1株表皮葡萄球菌;影响其特异度的菌种包括木糖葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、腐生葡萄球菌;而影响OXA纸片法敏感度的菌种包括溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、模仿葡萄球菌、耳葡萄球菌;影响其特异度的菌种包括人葡萄球菌、模仿葡萄球菌、木糖葡萄球菌、耳葡萄球菌、腐生葡萄球菌、沃氏葡萄球菌.结论 FOX纸片法检测MRCNS准确性因菌种不同有所差异,尤其应关注木糖葡萄球菌、沃氏葡萄球菌、腐生葡萄球菌的影响.建议检测MRCNS时,尽可能将CNS鉴定到种,视菌种必要时用PBP2a或mecA基因予以确认.
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DNA测序确认人类白细胞抗原新等位基因A*0330及二例家系调查分析
人白细胞抗原(HLA)作为人类的1个遗传标记,具有多样性和种族特异性[1].随着中华骨髓库志愿捐献者日益增多,不断有新的等位基因在中国人中被发现[2-6],但同时在同一地区发现数例相同新等位基因并且做家系调查的较少.我们在1例骨髓移植患者常规HLA分型中发现的新等位基因,经DNA测序,2007年5月31日被WHO人白细胞抗原因子委员会命名为HLA-A*0330(ID号:HWS10004714-EF602747).随后在造血干细胞自愿捐献者中又发现1例,经DNA测序确认与首例患者等位基因相同.我们对2个家系进行调查分析,现报告如下.
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建立实时荧光定量PCR技术检测H5N1型高致病力禽流感病毒
禽流感(avian influenza,AI)是由正黏病毒科流感病毒属的A型流感病毒引起的一种禽类或人类感染的疾病综合征.自1997年中国香港地区首次发生HSN1亚型禽流感病毒(AIV)感染以来,已引起多例患者死亡,同时对兽牧业造成的经济损失也难以估计.如何快速准确地检测出禽流感病毒成为目前亚洲乃至全球关注的焦点.
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临床堪萨斯分枝杆菌89株的鉴定和分型研究
分枝杆菌属内除了结核分枝杆菌复合群和麻风分枝杆菌外统称为非结核分枝杆菌(non-tuberculosis mycobacteria,NTM),其数目迄今报道已达150种以上,且有不断增加的趋势[1].
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Protis分析软件在评价神经系统疾病患者鞘内IgG合成与血脑屏障功能损伤中的应用
目的 分析多发性硬化患者和其他神经系统疾病患者鞘内IgG合成及血脑屏障功能状态,以探讨Protis分析软件和传统脑脊髓液(CSF)IgG生成指数以及24 h IgG合成率在评价神经系统疾病患者鞘内局部IgG合成与血脑屏障功能障碍中的应用价值.方法 用BN-Ⅱ特定蛋白分析仪检测34例多发性硬化患者、80例其他神经系统疾病患者、20例CSF正常患者血和CSF中白蛋白(ALB)、IgG含量,并用CSF免疫固定电泳检测IgG寡克隆区带.用传统公式分析计算IgG生成指数和24 h IgG合成率,并将数据输入Protis软件分析,得出鞘内IgG合成率(IgGIF).结果 多发性硬化组血脑屏障功能基本正常,白蛋白商值(QALB)为4.5×10-3[(3.1～7.6)×10-3],且与CSF正常对照组差异无统计学意义(D=5.25,P>0.05),多发性硬化组34例患者中有31例患者寡克隆区带检测阳性,阳性率为91.2%;鞘内IgGIF、IgG生成指数及24 h IgG合成率为31.25%(11.65%～71.45%),0.93(0.80～1.04),24.25 mg/24 h(15.25～46.15 mg/24 h),均高于CSF正常对照组(D=175.5、112.5、103.4,P均<0.05);而多发性硬化组的鞘内IgGIF、IgG生成指数及24 h IgG合成率与寡克隆区带检测阳性率的差异无统计学意义(P均>0.05).其他神经系统疾病组QALB为35.2×10-3[(18.5～55.5)×10-3],显著高于CSF正常对照组(D=102.7,P<0.05),80例患者寡克隆区带检测全部为阴性,IgG生成指数及24 h IgG合成率结果分别为0.75(0.69～0.82)、44.29 mg/24 h(20.35～65.98 mg/24 h),均高于CSF正常对照组(D=85.6、98.5,P均<0.05),其他神经系统疾病对照组鞘内IgGIF阳性率为0(0/80),IgG生成指数阳性率为40.0%(32/80),24 h IgG合成率阳性率72.5%(58/80).此外,IgG生成指数随血脑屏障功能损害程度的加深呈递增趋势(P<0.05),同时其假阳性率也随血脑屏障功能损害程度的加深逐渐增加(P<0.05);24 h IgG合成率结果也存在同样的变化趋势.在多发性硬化组鞘内IgGIF与IgG生成指数和24 h IgG合成率均存在显著相关性(r=0.788、0.695,P均<0.05);在其他神经系统疾病患者中鞘内IgGIF与IgG生成指数和24 h IgG合成率不存在相关性(r值均为0.000,P均>0.05).结论 用Protis软件分析得出的鞘内IgGIF,可更准确地反映出患者鞘内IgG合成情况,Protis分析软件在神经系统疾病的实验室诊断中具有较好的应用价值.
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DNA测序鉴定新等位基因人白细胞抗原-Cw*1521
人白细胞抗原(HLA)系统是人类复杂的遗传多态性系统,迄今已发现3095个等位基因.HLA-Cw属于经典的HLA-Ⅰ类基因,位于HLA-A和HLA-B位点之间,于1970年被发现,目前HLA-Cw位点已经被发现了190多个等位基因[1].我们在常规白血病患者高分辨率分型的样本中发现了1个新的HLA-Cw等位基因,2007年4月被世界卫生组织人白细胞抗原命名委员会正式命名为HLA-Cw*1521.
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流感病毒快速检测法在北京地区2007-2008年流感季节中的应用
目的 分析评价采用流感病毒快速检测法诊治流感的应用价值.方法 前瞻性选择2007年12月-2008年3月流感季节在北京朝阳医院发热门诊就诊的符合卫生部流感样病例患者500例,留取咽部分泌物进行流感病毒培养,随机选取260例患者进行流感病毒快速检测,并调查患者性别、年龄、症状、实验室检查、症状恢复时间、治疗花费等因素.同时分析流感病毒培养阳性组与流感病毒快速检测组的敏感度、特异度、阳性预测值和阴性预测值,及对治疗方案和预后的影响.结果 2007-2008年流感季节共入选流感样病例500例,终498例纳入分析,病毒培养结果主要为乙型流感(208例,41.8%),而甲型流感少见(51例,10.2%).498例流感样患者的平均年龄为35岁,男:女比例为1.47:1.与培养阴性组比较,培养阳性组咳嗽、咽痛、鼻塞症状比例比较高(t值分别为13.728、4.014和4.720,P均<0.01或0.05).260例经流感病毒快速检测患者中,甲型流感抗原阳性18例、乙型流感抗原阳性132例,流感病毒快速检测的敏感度77.1%、特异度70.1%、阳性预测值78.6%、阴性预测值68.2%.流感病毒快速检测抗病毒治疗的比例由0提高到26%,抗生素使用比例由63.4%降到20.7%.结论 2007-2008年流感季节主要流感类型为乙型流感,流感病毒快速检测法对临床病例检测敏感度和特异度较高,对临床抗病毒诊治有指导意义.
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肌钙蛋白Ⅰ(28～110aa)-C复合物的表达纯化及抗体制备
心肌肌钙蛋白Ⅰ(cTnI)是诊断急性心肌梗死的"金标准"[1-2].心肌损伤时,外周血中90%以上的cTnI以I-C复合物形式存在[3-4],而28～110间的肽段与C形成复合物稳定,我们根据患者血清中cTnI存在形式,通过引物设计构建pGEX4T-3-cTnI(28～110aa)-C原核表达系统,在大肠杆菌中实现cTnI(28～110aa)-C复合物的稳定可溶性高表达.然后,用该融合蛋白抗原制备抗cTnI单克隆抗体及多克隆抗体,为建立检测方法,提高检测灵敏度做前期准备.
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新型mucA基因突变对铜绿假单胞菌生物被膜形成的影响
目的 研究新型突变的mucA基因对黏液型铜绿假单胞菌PA17生物被膜形成过程和成熟生物被膜形态的影响.方法 将PAO1的mucA基因全长克隆到铜绿假单胞菌表达质粒pUCP20上,转化到含新型mucA基因突变的黏液型铜绿假单胞菌PA17,酶切、测序鉴定;异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组质粒表达,半定逆转录(RT)-PCR检测IPTG诱导前后藻酸盐合成关键基因algD的表达水平;改良平板培养法建立PA17、含重组质粒的PA17及PAO1的生物被膜模型,扫描电镜观察其生物被膜形成过程.结果 IPTG诱导后,表达重组质粒的PA17浮游状态时algD表达下降,证实PAO1的mucA基因转化PA17成功,其生物被膜形成速度居PAO1和PA17之间,8 h时即可出现不可逆性黏附,6 d形成成熟生物被膜,PA17、PAO1和含重组质粒的PA17所形成的成熟生物被膜形态相似.结论 PA17所含的新型mucA基因突变造成PA17生物被膜形成初始阶段的不可逆黏附过程延迟,但对成熟生物被膜形态无影响.
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利用PCR衍生技术检测血液系统疾病
PCR技术给血液病的诊断带来了革命性的进展,已经成为临床急性和慢性白血病基因分型,骨髓增殖性疾病确诊,海洋性贫血、血友病等多种血液遗传病的诊断不可或缺的基本技术.在PCR基础上,已经发展了包括多重巢式PCR、荧光实时定量PCR(Q-PCR)、变性高压液相色谱分析(DHPLC)、毛细管电泳、分子杂交和直接测序等方法.多重巢式PCR可检测多种白血病基因,确定白血病的类型.Q-PCR有效地解决了PCR污染的问题,可以监测白血病微小残留病.毛细管电泳法更适于基因片段长度有变化的基因突变.DHPLC适用于大批量标本的突变筛查.PCR产物的直接测序可靠性强,已经用于常规诊断.
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如何正确使用临床检验标准物质
临床检验标准物质的应用,对保证不同试剂、不同方法以及不同的临床实验室间结果的可比性具有重要意义.本文对临床检验标准物质的分类、选择途径以及应用领域进行了阐述.
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引起血清心肌肌钙蛋白升高的多种疾病状态
众所周知,血清谷氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶及其同工酶组成的血清心肌酶谱曾在20世纪60、70年代在诊断急性心肌梗死(AMI)中发挥重要作用.80年代初,肌酸激酶同工酶质量浓度(CK-MB mass)成为测定肌酸激酶同工酶(CK-MB)的首选方法.随着科学技术的发展,传统的心肌酶谱在心肌损伤诊断方面的缺陷也逐渐凸显,为此,越来越多的学者致力于心肌蛋白标志物在心肌损伤诊断方面的研究.
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造血发育调控基因在白血病中的研究进展
正常造血干细胞(HSC)具有自我更新和多向分化的潜能,能在体内重建造血系统.而在病理状态下,当HSC不断地增殖但分化受阻时,就会形成白血病干细胞(LSC),从而促进和维持了白血病的发生[1-2].
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应用生物传感器检测单核苷酸多态性
21世纪是牛命科学的时代,随着"人类基因组计划"的完成,人类遗传信息的秘密被揭开.单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)是人类基因组丰富的遗传变异,SNP的研究应运而生,并且发展迅速.研究表明,SNP与许多疾病直接相关,是决定人类疾病易感性和药物反应差异的主要因素.
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小儿患者感染马尔尼菲青霉菌致死二例
患儿1,女,14个月.因反复发热咳嗽,体温高达39℃,在基层医院治疗12 d后,于2007年4月8日转入我院.体检:体温37.3℃,呼吸急促,口唇发绀,中度贫血外观,较烦躁,咳嗽呈阵发痉挛性,双肺呼吸音粗,可闻及干湿哕音,肝右肋缘下触及4 cm,脾左肋下触及4.5 cm,双下肢轻度水肿.
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白天血常规检查时检出亚周期型班氏微丝蚴一例
患者女,34岁.因不明原因疲乏无力、头晕、头痛4年余,经多家医院诊治无效,于2006年12月3日到贵州省六盘水市水城钢铁(集团)有限责任公司总医院门诊部就诊,当日13:00时采末梢血作血常规检查:Hb 105 g/L,WBC4.0×109/L,中性杆状核粒细胞(Nst)0.03,中性分叶核粒细胞(Nsg)0.27,淋巴细胞0.62,单核细胞0.04,嗜酸粒细胞0.02,嗜碱粒细胞0.02.
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人禽流感一例患者实验室指标动态变化及病程转归
人禽流感是一种由高致病禽流感病毒(H5N1)感染人而引起的一种严重急性呼吸道传染病,1997年,我国香港地区发生H5N1型人禽流感,导致6人死亡,引起世界范围内广泛关注[1].该病潜伏期一般为1～7 d,通常为2～4 d,重症患者一般均为H5N1亚型病毒感染,患者可出现高热不退,病情发展迅速,几乎所有患者都有临床表现明显的肺炎,伴有咳嗽、呼吸急促等症状[2],该病死亡率较高(全球63.59%,中国66.67%)[3].
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肺栓塞患者一例心肌酶、胸腔积液及尿酸检验的意义
肺栓塞是下肢深静脉血栓(deep vein thrombosis,DVT)形成的并发症;在下肢深静脉形成的血栓栓子经血流到达肺动脉,而栓塞动脉血管;是血栓性栓子堵塞肺动脉或其分支引起肺循环障碍的临床和病理生理综合征.
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从白血病患者血液中分离出一株龋齿罗氏菌
龋齿罗氏菌(Rothia dentocariosa)为兼性厌氧的革兰阳性棒状细菌,是人口咽部的正常菌群,在临床标本中很少分离到.文献报道该菌可引起肺部感染、菌血症、心内膜炎等[1],有人报道可以从猫抓病肿大淋巴结分离出龋齿罗氏菌[2].我们自一患者血液中分离出龋齿罗氏菌,报道如下.
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ELISA方法检测HBsAg假阳性一例
健康体检者,女,29岁,身高158 cm,体重57 kg,血压116/62 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),心率72次/min.内、外、妇、耳鼻喉、眼科体检未见明显异常,无既往病史.心电图正常,超声检查肝、胆、胰、脾、双肾、甲状腺及盆腔未见异常,胸透未见病征.
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医学真菌实验室常规检查方法
真菌感染的日益增多已成为广大临床医师的共识,这一现状对微生物实验室真菌检查技术也提出了更高的要求.规范的标本取材、保存、处理以及正确的真菌镜检和培养方式可以提高阳性率检出,对临床诊断和治疗提供有价值的帮助.笔者就标本取材、真菌镜检和真菌培养的操作规范以及致病真菌鉴定原则进行简要的介绍.
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SYBR Green Ⅰ实时定量PCR检测尿液中大肠埃希菌方法的建立
大肠埃希菌(Escherichia coli,E. coli)是引起尿路感染的常见病原菌,其病原学诊断主要依据细菌培养的结果[1],然而常规的培养法检测和鉴定大肠埃希菌需2～3 d的时间,常常延误诊断和治疗.
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自动化细菌鉴定仪和碳青霉烯酶基因OXA-51扩增在不动杆菌属细菌鉴定中的价值
目的 评价自动化细菌鉴定仪Phoenix和Vitek2 Compact以及碳青霉烯酶基因OXA-51(blaOXA-51-like扩增在不动杆菌属细菌鉴定中的价值.方法 收集2006-2007年北京协和医院临床标本中分离的非重复不动杆菌属细菌50株,以扩增性核糖体DNA限制性酶切片段分析(amplified ribosomal DNA restriction analysis,ARDRA)为参考方法,分别采用blaOXA-51-like基因扩增和Phoenix、Vitek2 Compact细菌鉴定仪进行鉴定.结果 与ARDRA分子鉴定结果进行对比,blaOXA-51-like基因扩增鉴定方法敏感度为100%,特异度为100%;细菌鉴定仪Phoenix和Vitek2 Compact鉴定到种的准确率分别为44%和56%.结论 不动杆菌属仪器表型鉴定准确率不高;对于鲍曼不动杆菌,blaOXA-51-like基因扩增为一种快速可靠的鉴定方法.在研究不动杆菌的耐药机制或同源性分析时,可采用ARDRA方法进行鉴定.
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氰化高铁血红蛋白国家一级标准物质的研制
目的 研制氰化高铁血红蛋白(HiCN)国家一级标准物质,用作血红蛋白测定结果溯源的标准.方法 参照国际血液学标准化委员会(ICSH)的要求,制备HiCN标准物质;按照ISOGuide 35的要求,评价标准物质的均匀性和稳定性,在二者合乎要求的基础上,由多个实验室使用溯源至美国国家标准技术研究所(NIST)标准滤光片的分光光度计为HiCN标准物质定值;为验证定值结果的可靠性,使用定值仪器测定国际标准物质,将测定结果与WHO参考实验室的定值进行比较,此外,对所研制标准物质和国际标准物质的扫描图形进行了比较.结果 HiCN标准物质均匀性的不确定度为0.000 4 g/L,变异系数(CU)为0.09%;长期稳定性的不确定度为0.000 6 g/L;HiCN标准物质的定值为0.6159 g/L,不确定度为0.000 4 g/L;当扩展因子取2时,标准物质的扩展不确定度为0.001 8 g/L;定值仪器对国际标准物质的测定结果与国际标准物质定值的相对偏差为0.08%.结论 HiCN标准物质均匀性和稳定性良好,定值方法准确、可靠.
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电感耦合等离子体质谱测定血清钠
目的 建立一种应用电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)测定血清中钠(Na)元素含量的候选参考方法.方法 以铝(Al)作为Na的内标用重量法加入到标准溶液和血清中,样品经过硝酸消解、稀释,以ICP-MS测定其23Na/27Al同位素比值,应用标准曲线法定量.结果 应用ICP-MS测定2份血清中Na的平均分析回收率分别为100.67%和100.15%,精密度分别为0.08%和0.04%.标准参考物质(SRM)909b两水平血清Na浓度的总变异系数分别为0.18%和0.22%,结果与认定值的中间值偏差分别为0.17%和0.14%,SRM956b 3水平血清Na浓度的总变异系数分别为0.41%、0.41%和0.66%,结果与认定值的中间值偏差分别为-0.09%、-1.05%和-0.48%.结论 建立了ICP-MS测定血清Na的方法,此法操作简单快速、准确、精密,有望成为血清Na测定的参考方法.
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微粒子化学发光法检测梅毒抗体的临床应用
梅毒螺旋体是梅毒的病原体,很难培养,可通过垂直传播和性传播感染.依靠临床症状、黏膜或皮肤破损样本直接查找病原体和血清学结果是诊断梅毒的主要方法.因为损伤材料只在发病早期可以获得,加之梅毒感染的自然病程存在临床症状不明显的潜伏期[1],故对晚期阶段和潜伏期梅毒主要诊断依据是检测其特异性抗体.
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前行的脚步
2008年即将过去,这一年注定将永远留在人们的记忆之中."奥运"圆了中华民族的百年梦想,"神七"圆了中华民族的千年飞天梦想,而罕见的低温雨雪冰冻灾害和汶川特大地震灾害不仅肆虐和震撼了大地,也震撼和净化了人们的心灵,中国人民谱写了感天动地的英雄凯歌.就在全国人民欢庆改革开放30周年之际,一场突如其来的金融海啸又接踵而至,至今还无平息的迹象.
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白血病NPM1基因突变检测方法的临床适用性比较
目的 分析急性髓细胞白血病(AML)的NPM1(nucleophosmin)基因第12外显子突变,对比3种常用检测方法的临床适用性.方法 随机选择54份AML患者的冻存骨髓细胞标本,提取DNA后PCR扩增NPM1基因第12外显子,分别进行PCR-毛细管电泳、变性高效液相色谱(DHPLC)和直接测序检测.FLT3内部串联重复(ITD)突变的检测采用FLT3 PCR产物分别进行琼脂糖凝胶电泳和PCR-毛细管电泳检测.结果 7例AML患者发现NPM1基因突变,其中5例为常见的A型突变,即960 bp处插入TCTG 4个碱基;1例为D型突变,即960 bp处插入CCTG 4个碱基;另1例为新发现的1种突变,在958 bp处丢失TGGCAGTG 8个碱基,插入GCCCGCGGTTTA 12个碱基.3种基因突变的检测方法检出率均为100%.毛细管电泳检测NPM1基因突变更快速可靠,且可同时检测FLT3-ITD突变.DHPLC的分辨率受实验因素的影响较多.直接测序步骤相对繁琐,而且有杂合子基因序列误读的可能性.结论 AML存在一种NPM1基因的958 bp位点12个碱基置换的基因突变;AML的NPM1基因突变临床检测采用PCR-毛细管电泳法更方便.
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多重位点特异性PCR检测骨髓增殖性疾病五种JAK2基因突变
目的 建立一种同时检测多种JAK2基因突变的多重位点特异性PCR方法,并探讨其对骨髓增殖性疾病(MPD)的临床应用价值.方法 建立同时枪测JAK2 V617F突变和JAK2 exon12中K539L(包括2种基因突变)、N542-E543del和E543-D544del突变的多重位点特异性PCR方法.对115例MPD患者进行检测,包括61例真性红细胞增多症(PV)患者、43例原发性血小板增多症(ET)患者和11例原发性骨髓纤维化(MF)患者.结果 建立的PCR方法可以同时检测上述5种JAK2基因突变,可以检测出1%的JAK2 V617F突变型等位基因,对其他几种突变可检测出0.1%的突变型等位基因.在61例PV患者中,检测出JAK2 V617F突变56例、JAK2 exon12突变3例;在43例ET患者中,检测出JAK2 V617F突变27例,未检测到JAK2 exon12突变;在11例MF患者中,检测到JAK2 V617F突变6例,未检测到JAK2 V617F突变.3例JAK2 exon12突变的患者临床表现为血红蛋白增多,内源性红系集落生成阳性,但白细胞和血小板增多不明显,不伴脾肿大.结论 多重位点特异性PCR方法检测灵敏度高,可联合检测5种JAK2基因突变,能有效提高突变检出率.
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急性髓细胞白血病中婆罗双树样基因4的表达及其临床意义
目的 探讨婆罗双树样基因4(SALL4)在急性髓细胞白血病(AML)中的表达及其临床监测意义.方法 采用逆转录PCR、实时荧光定量PCR、细胞培养、流式细胞术、骨髓涂片及血细胞分析仪等技术检测了68例AML患者(急性期36例、缓解期32例)、30名健康对照者、AML细胞系Kasumi-1和THP-1中SALL4的表达水平,评价其与骨髓原始细胞数、外周血WBC、未染色大细胞(LUC)计数及骨髓白血病免疫表型CD34表达率的关系.动态观察5例AML患者化疗前后3个时间点(化疗前急性期、治疗中第2～3周、化疗后缓解期)SALL4的表达水平.结果 急性期AML患者SALLA表达水平[69.01(17.20～120.28)]是缓解期AML患者SALL4表达水平[2.64(1.35～5.41)]的26倍,是健康对照组SALL4表达水平[1.14(0.50～1.62)]的61倍(Z=-6.48、-6.83,P均<0.01);缓解期AML患者SALL4表达水平是健康对照组的2.3倍(Z=-3.61,P<0.01).动态观察5例AML患者,SALL4基因表达水平随着治疗和病情缓解呈下降趋势,化疗前急性期、化疗中第2～3周和化疗后缓解期SALLA基因表达水平分别为79.74(33.76～89.09)、7.19(5.97～20.21)和3.40(1.44～15.53).骨髓原始细胞数增高组、LUC计数增高组及CD34表达率增高组中SALL4表达水平分别为33.82(16.00～144.01)、30.70(23.75～72.50)、56.25(23.79～153.81),高于相应正常组的2.74(1.59～5.13)、5.71(2.52～22.40)、20.82(14.03～55.12),差异有统计学意义(Z=-4.64、-2.18、-3.66,P<0.01或<0.05);外周血WBC计数增高组SALL4表达水平为89.26(23.75～154.34),高于相应的WBC计数正常组的3.86(2.03～6.01)和WBC计数减低组的6.66(2.51～17.06),差异有统计学意义(Z=-4.91、-4.21,P均<0.01);SALL4表达率与骨髓原始细胞数以及外周血WBC计数呈正相关(r=0.45、0.40,P均<0.01).结论 成功建立了人SALL4基因表达水平的实时荧光定量PCR方法,SALL4表达有望成为监测AML病情和判断预后的新指标.
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人类白细胞抗原及单倍型与中国北方汉族急性非淋巴细胞白血病相关性研究
急性非淋巴细胞白血病(AML)是我国白血病分类构成中常见的一类,其疾病的发生、发展机制目前尚不十分清晰,可能与遗传因素、外界环境因素和自身免疫因素等有关.人类白细胞抗原(HLA)与肿瘤的免疫监视作用密切相关,HLA与白血病相关性研究国内外文献均有报道[1-3],但结论不一.
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杂合性歧义引物分离法在解决人类白细胞抗原基因歧义分型结果中的应用
目的 评估杂合性歧义引物分离法(HARPs)在解决中国汉族人群人类白细胞抗原(HLA)基因歧义分型结果中的应用价值,并筛选合适的HARPs引物.方法 416名南方汉族个体的HLA-A、HLA-B、HLA-DRB1基因通过PCR-测序分型(PCR-SBT)方法进行基因分型,并采用美国Atria公司的HARPs引物对其中的歧义分型标本进行附加测序分型.结果 86.3%(132/153)的HLA-A、73.9%(130/176)的HLA-B和38-1%(85/223)的HLA-DRB1歧义分型标本可以通过HARPs方法有效解决;其中48.5%(64/132)的HLA-A、80.0%(104/130)的HLA-B和100.0%(85/85)的HLA-DRB1歧义分型标本只需要1种HAPRs引物,47.7%(63/132)的HLA-A、20.0%(26/130)的HLA-B需要同时使用2种HAPRs引物;3～6种HARPs引物可以解决90%以上的歧义分型标本.结论 HARPs可作为解决中国汉族人群HIM-A、HLA-B、HLA-DRB1基因SBT歧义分型结果的常规方法.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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| 2000 | 01 02 03 04 05 06 |
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| 1998 | 01 02 03 04 05 06 |
