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中华检验医学

中华检验医学杂志

Chinese Journal of Laboratory Medicine 중화검험의학잡지

北大核心期刊
  • 主管单位: 中华医学检验杂志
  • 主办单位: 中国科学技术协会
  • 影响因子: 1.40
  • 审稿时间: 1-3个月
  • 国际刊号: 11-4452/R
  • 国内刊号: 韩锟
  • 发行周期: 月刊
  • 邮发: cjlm@cmaph.org
  • 曾用名: 中华医学检验杂志
  • 创刊时间: 1978
  • 语言: 英文
  • 编辑单位: 中华医学会
  • 出版地区: 北京
  • 主编: 中华检验医学杂志编辑委员会
  • 类 别: 临床医学
期刊荣誉:
  • 载脂蛋白M单克隆抗体的制备及其初步应用

    作者:胡敏;赵水平;张涛;田芳艳

    目的 制备亲和力高、纯度好的载脂蛋白M(apoM)单克隆抗体,并用以检测apoM在组织细胞及不同人群中的分布.方法 用重组apoM蛋白免疫Balb/c小鼠,经细胞融合、筛选及克隆化,得到生长良好、分泌稳定的杂交瘤细胞株;注射Balb/c小鼠腹腔,收取腹腔积液,纯化后得到apoM单克隆抗体,并用本实验制备的单克隆抗体检测健康对照组及冠状动脉粥样硬化性心脏病(冠心病)患者稳定型心绞痛(sA)组和急性冠状动脉综合征(ACS)组血清中的apoM蛋白浓度.结果 得到了3株单克隆抗体,经亚型鉴定、阻断试验和WB确定为apoM单克隆抗体;并通过该抗体在人细胞和组织中检测到了apoM蛋白.冠心病SA组的apoM浓度为(11.02±1.96)×10-3 g/L,ACS组apoM浓度为(10.76±1.32)×10-3g /L,对照组为(12.83±2.28)×10-3 g/L,3组间差异有统计学意义(F=11.544,P<0.05).比较冠心病sA组和ACS组与健康对照组血浆apoM浓度,显示两组冠心病患者血浆apoM浓度均低于健康对照组(t=2.962、3.967,P<0.05),两组冠心病组之间血浆apoM浓度差异无统计学意义(t=1.033,P>0.05).结论 成功制备了3株apoM的单克隆抗体,可与人组织细胞中的apoM蛋白特异结合,为进一步研究apoM在脂代谢中的作用打下了基础.

  • 高尔基体蛋白73及其基因检测对原发性肝癌诊断的价值

    作者:石玉玲;曾兰兰;李林海;孙朝晖;廖扬;陈建芸

    目的 评价分析GP73和GP73 mRNA在PHC中的诊断价值,探讨血清中GP73和AFP联合检测对PHC诊断和高危人群普查的意义,为PHC诊断和普查提供一种新方法 .方法 采用ELISA对73例PHC、13例肝硬化、32例肝炎和62名健康人的血清GP73、AFP水平进行检测,采用SYBR Green实时荧光定量PCR法检测各组外周血单个核细胞GP73 mRNA的相对表达量,以Ct值比较法计算GP73 mRNA相对表达水平,同时检测分析8份正常肝组织和8份肝癌组织的GP73 mRNA相对表达水平.结果 ELISA检测4组血清GF73、AFP结果 显示,总体比较经Kruskal-Wallis检验,4组间差异有统计学意义(H值分别为89.6、52.0,P均<0.01),全血GP73 mRNA含量4组间差异无统计学意义(H=4.33,P>0.05).组间多重比较Mann-Whitney检验结果显示,PHC组血清GP73的含量[166.7(162.7-231.8)μL]与肝硬化[57.3(46.6~113.6)μg/L]、肝炎[29.6(26.2~54.5)μg/L]及健康对照组[25.1(20.8~29.4)μg/L]比较,差异有统计学意义(U值分别为246、297、349,P均<0.01),各组血清AFP的含量分别为380.9(258.5~ 503.2)μg/L、3.8(1.3~14.5)μg/L、5.1(2.4~7.8)μg/L、2.8(2.2~5.7)μg/L,差异亦有统计学意义(U值分别为246、419、790,P均<0.01).肝癌组织GP73 mRNA表达量(12.64)显著高于正常肝组织(1.00).以ROC曲线确定诊断PHC的GP73临界值为123.2μg/L和AFP临界值为10.6 μg/L时,PHC组血清GP73、AFP单项检测的敏感度分别为65.8%和53.4%,特异度分别为95.3%和92.5%,两者联合检测的敏感度为79.5%,特异度为90.7%.结论 GP73蛋白对PHC诊断具有较好的敏感度和特异度;全血标本GP73 mRNA检测不能作为诊断PHC的肿瘤标志,肝组织标本GP73 mRNA检测可作为诊断PHC的肿瘤标志,但存在创伤性大、风险大、患者痛苦等缺点.血清GP73联合AFP检测可有效提高PHC诊断,可用于PHC高危人群的普查及筛选.

  • 伴两个t(15;17)易位的四倍体核型急性早幼粒细胞性白血病的实验和临床研究

    作者:樊一笋;沈霞;潘金兰;薛永权;尹栩芳

    目的 探讨伴有2个t(15;17)易位的四倍体核型APL的临床和实验室特点.方法 选取5例伴有2个t(15;17)易位为特征的四倍体核型APL病例,采用骨髓细胞直接法或短期培养法制备染色体,用R显带技术进行核型分析;采用流式细胞术对1例患者进行DNA倍性分析,检测APL患者白血病细胞表面CD2、CD13、CD15、CD33和CD34的表达;采用PML/RARα双色探针和FISH技术,检测其中1例APL患者的PML/RARα融合基因;采用RT-PCR技术,检测2例APL患者的PML/RARα融合基因的转录本.结果 5例APL患者均为男性,中位年龄38岁.骨髓细胞形态学检查显示,骨髓早幼粒细胞胞体巨大、胞核畸形.R显带染色体分析显示,5例APL患者均有以2个t(15;17)(q22;q12)为特征的四倍体或近四倍体核型细胞,其中1例同时伴有t(15;17)二倍体核型细胞和1个正常细胞,2例同时伴有正常核型的细胞.5例APL患者中,1例经间期FISH检测证实,含有2个PML/RARα融合荧光信号;2例经RT-PCR检测证实PML/RARα融合基因阳性.5例APL患者中,1例患者的白血病细胞仪表达CD33;其余4例表达CD13和CD33,其中2例同时表达CD2,1例同时表达CD34.采用流式细胞术对1例患者进行DNA倍体分析,发现四倍体克隆峰,其DNA指数为1.998,变异系数为8.2%.全部病例经全反式维甲酸和(或)砷剂治疗后均获得完全缓解.结论 伴2个t(15;17)易位的四倍体APL患者的骨髓涂片中均可见到巨大畸形白血病细胞;此类患者多为短型PML/RARα转录本;此类核型异常并不影响全反式维甲酸的疗效及预后.

  • 抗SLA/LP在评估自身免疫性肝炎患者病情中的意义

    作者:赵艳;张永宏;檀玉芬;刘妍;张欣;冯霞;马冬梅;闫惠平

    AIH是自身免疫性疾病之一,常引发严重的肝脏病变.目前,对AIH诊断基于组织学异常、临床特征、生化指标和血清自身抗体与蛋白水平的异常.抗SLA/LP具有严格疾病特异性,前期研究认为,抗SLA/LP缺乏AIH分型意义[1],但其对AIH患者病情评估的国内报道罕见.本研究旨在通过总结抗SLA/LP阳性AIH患者临床及随访资料,以初步阐明抗SIA/LP检测对AIH患者病情评估方面的作用.

  • 实时荧光定量PCR检测VAD1 mRNA评估新型隐球菌性脑膜炎的疗效

    作者:江凌;李雯;欧启水

    目的 建立RT-FQ-PCR检测新型隐球菌VAD1 mRNA的方法 ,探讨定量测定VAD1 mRNA用于CNM疗效评估的可行性.方法 依据GenBank收录的新型隐球菌VAD1 mRNA全序列,设计引物和TaqMan探针,建立RT-FQ-PCR检测VAD1 mRNA的方法 .检测25例CNM患者和30例其他神经系统疾病对照组患者脑脊液,评价方法 的敏感度及特异度;检测25例CNM患者急性期与恢复期脑脊液中VAD1 mRNA的表达量,分析VAD1 mRNA与CNM治疗效果的关系.结果 建立的标准曲线相关系数为-0.997 9,检测下限为101 拷贝数/μl,高、中、低浓度质粒标准品批内CV值分别为0.65%、0.89%和1.23%;RT-FQ-PCR法检测新型隐球菌的敏感度为96%(24/25),特异度为100%(30/30);急性期VAD1 mRNA表达量为3.042±0.906,明显高于恢复期的2.187±0.665,差异有统计学意义(t=4.583,P<0.01).结论 本研究建立的RT-FQ-PCR方法 具有较高的敏感度、特异度和重复性,适合于新型隐球菌的VAD1 mRNA检测;VAD1 mRNA表达水平与CNM的治疗效果有关.

  • 遗传性蛋白S缺陷症家系基因突变的研究

    作者:杨芳;王冠军;康丽花;王学锋;丁秋兰;王鸿利

    目的 对2个遗传性PS缺陷症家系进行临床表型诊断和基因突变检测.方法 PS:A测定采用发色底物法;TPS:Ag、FPS;Ag测定采用ELISA法;PS基因(PROS1基因)检测采用PCR方法 对先证者PROS1基因的15个外显子及其侧翼内含子序列进行扩增,PCR产物纯化后直接测序.结果 先证者1的PS:A为48.6%,FPS:Ag为41 mg/L,TPS:Ag为136 mg/L,PROS1基因2号外显子在c.C121T位点发生杂合碱基替换,导致编码的PS蛋白存在Arg-1 Cys(R-1C)杂合错义突变.先证者2的PS:A为29.2%,FPS;Ag为26 mg/L,TPS:Ag为83 mg/L,PROSl基因14号外显子在c.C1687T位点发生杂合碱基替换,导致编码的PS蛋白存在Gln522Stop杂合无义突变.结论 c.C121T是PROS1基因的一个新的突变位点,该杂合突变可以导致Ⅱ型遗传性PS缺陷症;c.C1687T杂合突变导致Ⅰ型遗传性PS缺陷症.

  • 焦磷酸测序法检测结直肠癌患者k-ras基因突变

    作者:陈婕;郭兴中;朱凡;邹媛;白法安;方国伟

    研究证明,k-ras癌基因的激活在CRC发生发展过程中起重要作用[1].k-ras基因常见的激活方式为点突变,其中90%以上的突变发生在1号外显子第12位密码子(野生型:GGT)和第13位密码子(野生型:GGC)[2],突变率约30%~49%[3].近年来,k-ras基因是否突变已成为西妥昔单抗能否用于CRC分子靶向治疗的用药评判标准[4].因此,如何快速准确检出k-ras 基因突变对这类药物的应用及疗效预测显得尤为重要.焦磷酸测序法是一种酶促级联测序技术,特别适用于SNP常规检测[5].

  • 脓毒血症并发急性肾损伤早期诊断标志物的研究

    作者:李萍珠;徐炜新

    目的 探讨NGAL预测脓毒血症后AKI的准确性.方法 收集74例脓毒血症患者诊断后不同时间点的血、尿标本,对其中17例AKI患者,采用固相夹心酶联免疫吸附法检测尿NGAL水平,胶乳颗粒增强的免疫透射浊度法测定Cys C的值,肌氨酸氧化酶法测定Set水平.同期的57例非AKI患者作为研究的对照.观察两组患者毒血症诊断后尿NGAL和Scr的动态变化.运用ROC曲线评价尿NGAL诊断AKI的准确性.结果 Scr基线值为(59.38±16.72)μmoL/L,诊断AKI的中位时间为脓毒血症确诊后的24(12,48)h,Scr为(100.35±28.26)μmol/L.本组脓毒血症后发生AKI17例,发生率为23%(17/74).脓毒血症AKI组患者2、4、6 h血清Cys C水平分别为(0.63±0.14)mg/L、(0.68±0.16)mg/L、(0.65±0.14)mg/L,与基线值(0.61±0.15)mg/L比较未见上升;8 h时,其血清Cys C值小幅升高为(0.85±0.22)mgs/L,但差异无统计学意义(t=1.63,P>0.05);12、18、24、36、48及72 h等各时间点的血清Cys C值呈逐渐升高的趋势,与基线值比较差异均有统计学意义(t=2.81、2.98、3.05、3.11、3.38、3.17,P<0.01).AKI组脓毒血症后2 h尿NGAL为(96.21 ±45.32)μg/L,显著高于基线值的(4.98±1.65)μg/L.随后,在2 h至48 h等各时间点,患者尿NGAL水平呈逐渐升高的趋势,与基线值比较差异均有统计学意义(t=2.74、2.83、2.91、3.04、3.15、3.22、3.31、3.45、3.57,P<0.01).AKI组脓毒血症后各时间点尿NGAL水平均显著高于同期的非AKI组,差异有统计学意义(t=2.69、2.73、2.84、2.96、3.02、3.13、3.29、3.43、3.54、3.22,P<0.01).用ROC曲线分析脓毒血症后2 h尿NGAL水平在AKI诊断中的准确性,得到ROC曲线下面积为0.935,95%的可信区间为0.683~0.971.当脓毒血症后2 h尿NGAL的cut-off值为50μg/L时,其在AKI诊断中的敏感度和特异度及准确性分别为94.4%、87.5%和96.8%.结论 脓毒血症后2 h尿NGAL水平可以准确地预测AKI的发生,其诊断AKI的时间早于Cys C和Scr.尿NGAL可作为脓毒血症后AKI的早期诊断标志物.

  • 荧光定量RT-PCR检测Rac1 mRNA基因及其与胃癌转移的关系

    作者:高丹丹;续薇;刘力华;张明威;罗微

    目的 探讨肿瘤转移相关基因Rac1水平与胃癌转移的相关性,并评价分析Rac1 mRNA基因在胃癌转移和区分胃良、恶性病变中的价值.方法 用荧光定量RT-PCR TaqMan探针技术,选择Rac1基因目的 片段,与pET-20b(+)载体连接构建重组质粒,建立Rac1 mRNA荧光定量RTPCR标准曲线,并用于检测52份胃癌、癌旁组织及12份胃良性病变组织标本中Rac1 mRNA的含量,分析评价其与胃癌转移的关系.结果 胃癌组织中Rac1 mRNA表达阳性率和含量为100.0%,7.41×103 (3.50×105 ~4.36×106)拷贝/μl,癌旁组织为46.2%,0(0~1.73×104)拷贝/μl,良性病变组织为33.3%,0(0~3.55×103)拷贝/μl,3组间阳性率和Rac1 mRNA含量水平差异均有统计学意义(x2=43.16,x2k-w=64.19,P均< 0.01).当ROC曲线确定荧光定量RT-PCR检测Rac1含量的佳临界值为1.73×104 拷贝/μl时,诊断胃癌组织标本的敏感度为88.5%,特异度为100.0%;当佳临界值为7.49×103 拷贝/μl时,诊断胃癌是否发生淋巴结转移的敏感度为57.9%,特异度为78.6%.结论 荧光定量RT-PCR检测Rac1 mRNA对鉴别胃良、恶性病变及评价胃癌转移均有参考价值.

  • X-连锁迟发性脊髓骨骺发育不良家系的基因诊断

    作者:王莉;姚丰;廖世秀;王应太;杨艳丽;黄飞飞

    目的 探讨一个X-连锁迟发性脊髓骨骺发育不良(X-linked spondyloepiphyseal dysplasia tarda,SEDL)家系发病的分子机制,建立基因诊断方法 .方法 采用身高测量、影像学检查殚及家系分析进行临床诊断.收集相关家系成员的外周血标本.提取基因组DNA后,采用PCR-SSCP和DNA测序分析家系中先证者、携带者和健康人SEDL基因的第3~6外显子.利用微卫星位点DXS16进行连锁分析.结果 PCR-SSCP检测到先证者第4外显子有异常泳动带;第4外显子的序列分析表明3例先证者均存在C.218C>T突变,导致氨基酸序列S73L改变,3例携带者均存在该核苷酸位点的杂合突变,健康人未见突变;先证者的第3、5和6外显子核酸序列未见突变.序列分析证实家系中3名未婚女性Ⅲ10、Ⅳ6和Ⅳ7为致病基因携带者.结论 C.218C>T突变是导致该家系发病的分子机制,可采用第4外显子序列分析对该家系进行基因诊断和产前基因诊断.

  • 非酒精性脂肪性肝病危险因素的调查研究

    作者:高岚;赵明立;蔺春燕;张军喜;张卫东

    NAFLD是指除外酒精和其他明确的肝损伤因素所致的,以弥漫性肝细胞大泡性脂肪变为主要特征的临床病理综合征.新资料显示,随着肥胖症和MS患者的增多,NAFLD在中国人群中的患病率约为15%,且呈逐年上升趋势[1].同时由于缺乏有效的防治措施,NAFLD不仅导致患者生活质量下降和预期寿命缩短,还会加重家庭和社会的经济负担.本研究通过对健康体检中NAFLD人群的疾病因素和生活饮食习惯进行调查,研究其疾病因素和生活饮食习惯可能与NAFLD发病的相关性,并提出干预性防治措施.

  • HLA-Cw基因常规检测区外第1、5、6、7外显子核苷酸序列测定的研究及临床应用

    作者:高素青;徐筠娉;王大明;金士正;邹红岩;邓志辉

    目的 研究中国人群HLA-Cw基因第1、5、6、7外显子的分子遗传多态性,探讨增加第1、5 6 7外显子核苷酸序列测定在临床组织配型工作中的重要性及意义.方法 应用PCR-SBT法,对324份样本的HLA-Cw基因第2、3、4外显子作常规测序分型.对检出的模棱两可结果,设计HLACw第1、5 6 7外显子序列测序引物并优化测序反应条件,增加第1、5、6、7外显子核苷酸序列分析.结果 对HLA-Cw基冈第2、3、4外显子常规检测,一次性获得等位基因前4位数分型结果 的样本占23.8%(77/324);出现模棱两可结果的样本数占76.2%(247/324),检出的模棱两可等位基因组合有73种;增加HLA-Cw基因的第1、5、6、7外显子多态性检测,可解决Cw* 030201/030202、030301/0320N、Cw* 040101/0409N/0430、Cw* 070201/0750、Cw* 0403/0409N/0430和Cw* 080101/0822等10种常见的模棱两可等位基因组合.结论 在临床HLA-Cw基因配型中增加第1、5、6、7外显子多态性检测,有助于解决测序分型中的模棱两可的结果 和提高HLA-Cw基因分型精确度,对临床组织配型工作具有重要意义.

  • 参考区间研究现状概述

    作者:曾洁;陈文祥;申子瑜

    临床实验室的作用是通过必要的实验过程为就诊者疾病的诊断、治疗、预后和筛查提供信息.要发挥以上作用,检测结果就需要一个参考区间作为评价标准,任何缺乏参考区间的检测结果都是没有临床意义的,因此分析物的参考区间无论对临床医师、患者还是检验人员都至关重要.现将参考区间的研究现状做一介绍.

  • 浅析国际标准化比值与纤维蛋白原测定的实验室校准

    作者:丛玉隆;李健

    随着人们饮食结构和生活方式的改变,心血管和血栓性疾病的发病率和病死率呈逐年增高的趋势,血栓栓塞作为多种系统疾病的并发症也成为临床医学的研究重点.近年来,止血血栓学检验在出血性疾病的诊断、术前筛查和抗凝治疗检测中得到了广泛应用,自动化凝血仪的普及大大提高了检测效率,使检测结果的精密度和准确度达到了前所未有的水平.配合凝血诊断试剂国家行业标准的推出,本文试对当前临床实践中的误区加以辨析.

  • Hb/MCHC比值法测定红细胞压积参考方法的建立及临床应用研究

    作者:杨晏;廖璞;王忠诚

    PCV是临床血液学检验的常规指标,对贫血及相关疾病的诊断、治疗监测和预后评估具有十分重要的作用.PCV的检测方法主要有温氏法、电阻抗法和微量压积法.其中,电阻抗法是血细胞分析仪检测PCV的主要方法,但须用参考方法或配套校准品校准仪器才能保证分析结果的准确性.微量压积法先后被美国CISI和ICSH分别推荐为PCV检测的参考方法和"替代参考方法"[1-2],但由于该法在离心后,精密毛细管中的红细胞沉积部分越到底部越易因为压缩过度而破坏,越往上越易混入白细胞、血小板或血浆,特别在病理情况下,其结果欠佳[3].

  • HBV S区基因变异与HBsAg检测

    作者:高春芳

    乙型病毒性肝炎是世界范围内常见的病毒感染性疾病,全球约3亿~4亿人存在活动性HBV感染,有约1/3的人口存在HBV暴露史.HBV是人类第一个从基因组水平及蛋白水平被认识的肝炎病毒.临床实验室对HBV感染或献血员进行血液检查在预防HBV的垂直及水平传播上具有非常重要的意义.自20世纪60年代末首次引入HBV感染的血清标志物(即HBsAg)以来,HBV感染后血清标志物的检测方法不断进步,新的乙型肝炎分期及随访标志物也不断被发现.

  • 新型高通量肺癌相关基因甲基化检测方法的建立

    作者:娄加陶;薛剑;吴传勇;葛歆悦;吴京;姚见儿

    目的 建立一种包含甲基化标准品的新型高通量肺癌相关基因的甲基化检测系统.方法 2009年3-6月上海交通大学医学院附属胸科医院经病理学和影像学确认的非小细胞肺癌患者8例,其中男7例,女1例,平均年龄(57±11)岁,手术后留取肺癌组织及外周血.男性健康志愿者1名,年龄35岁,抽取外周血20 ml,用以分离单个核细胞提取DNA制备质粒.对7个肺癌相关基因的启动区进行克隆,用各基因的特异性引物对克隆到质粒中的各基因片段再次进行扩增,PCR产物用甲基化酶M.sss Ⅰ和亚硫酸盐处理.通过设计3'末端CpGpCpG探针来识别甲基化模板,并经佳连接酶、佳退火温度及连接温度的选择,建立一套多重连接PCR体系,后运用液相芯片平台对扩增的标准品和临床标本进行检测.利用甲基化特异性PCR检测新系统的可靠性.结果 成功的构建了7个基因的甲基化和非甲基化标准品,并建立了多重PCR偶联液相芯片的快速检测系统,p16INK4A、APC、DAPK、RARβ、RASSF1 A、MGMT和GSTP1甲基化标准品的荧光信号值分别为863、909、703、701、901、1 060和885,与非甲基化标准品区分明显.抽提8例患者的肺癌组织DNA,对其中检测出阳性频率较高的基因进行甲基化特异性PCR,产物电泳结果 与新建甲基化检测系统检测结果 完全一致.结论 本研究建立的新型检测系统能同时准确地检测7个基因甲基化状态,有望应用于临床标本的检测.

  • MALDI-TOF MS在临床常见菌快速鉴定中的应用研究

    作者:蒋颜;周宏伟;蔡加昌;张嵘;陈功祥

    目的 评价MALDI-TOF MS在临床常见细菌快速鉴定中的应用.方法 选择浙江大学医学院附属第二医院2008年12月至2009年8月分离自血液、痰液、分泌物和尿液的临床常见细菌和浙江省疾病预防与控制中心收集的沙门菌共426株.包括革兰阳性球菌76株和革兰阴性杆菌350株.采用Vitek系统将细菌鉴定到种,血清凝集试验对沙门菌和志贺菌进行血清分型.PCR扩增91株细菌的16S rDNA基因并测序,所得核苷酸序列与GenBank中的数据库进行比对,确定细菌种类.用MALDI-TOF MS对所有细菌进行快速鉴定,比较不同鉴定方法 之间的符合情况.结果 除沙门菌和志贺菌外的所有革兰阳性球菌和革兰阴性杆菌的Vitek和MALDI-TOF MS两者的鉴定结果 完全符合.23株沙门菌中只有2株肠炎沙门菌鼠伤寒血清型的3种鉴定方法 结果 相符,另有1株伤寒沙门菌、3株甲型副伤寒沙门菌、1株乙型副伤寒沙门菌、1株肠炎沙门菌和1株肠炎沙门菌病牛血清型的血清凝集结果 与16s rDNA基因测序结果 相符.Vitek及血清凝集试验鉴定为福氏志贺菌的4株菌16s rDNA基因测序和MALDI-TOF MS的鉴定结果 均为大肠埃希菌.结论 MALDI-TOF MS可快速、准确地对细菌进行鉴定,具有良好的重复性,但对沙门菌和志贺菌效果不佳.

  • 参加肌酸激酶参考方法国际室间比对计划结果分析

    作者:迟珊;沈默;张曼

    目的 对2006-2008年3年来参加IFCC组织的参考实验室RELA的CK的测定结果 进行比较和分析,为我国CK参考方法 的建立和应用提供借鉴.方法 按照IFCC公布的酶学活性测定(37℃)参考方法 的标准操作程序(SOP)测定CK国际样本,不精密度评价按美国CLSI的EP5-A2进行,准确度评价采用国际有证参考物质(ERM).结果 2006年测定结果 ,样本A CK值为(9.896±0.112)μkat/L,样本B为(4.953±0.120)μkat/L;2007年测定结果 ,样本A为(2.684 ±0.054)μkat/L,样本B为(8.798 ±0.101)μkat/L;2008年测定结果 ,样本A为(10.523±0.149)μkat/L,样本B为(10.551±0.141)μkat/L.2006-2008年CK参考方法 的不精密度分别为0.92%、0.86%、0.88%,均<1%,ERM测定均值在"靶值±不确定度[(1.68±0.07)μkat/L]"范围内,初步验证了参考方法 的不精密度和准确度.结论 连续3年的CK国际样本测定结果 均在IFCC公布的置信区间(limit of equivalence)±5%范围内,CK的IFCC参考方法 已经建立并且日趋成熟.

  • 人乳头瘤病毒基因分型质控品的建立

    作者:黄杰;曲守方;徐任;高尚先

    目的 建立HPV基因分型质控品.方法 收集宫颈脱落细胞标本300份,通过表面等离子谐振法和测序法检测标本型别,根据GenBank中参考序列设计各型别L1基因扩增引物,通过PCR扩增、连接转化构建包含不同型别L1基因重组质粒,通过30个重组质粒PCR鉴定和序列测定,并将测定序列用BLAST软件进行比对.结果 收集的标本包含了HPV 6、16、18等30种不同型别HPV感染.PCR扩增片段大小和设计引物扩增片段长度相符,除了HPV CP8304外,其余型别均在1 500~2 000 bp之间.重组质粒PCR鉴定与目的 片段相符,测序结果 与GenBank中的参考序列一致性在99%以上,在碱基数为1 500 bp的比对序列中不一致碱基数为11个.结论 建立了30种不同型别HPV L1基因分型质控品,覆盖了所有常见型别,涵盖了14种高危型、3种中危型和13种低危型.

  • 串联质谱法两种扫描方式检测干血滤纸片上氨基酸含量的精密度和准确度

    作者:李启亮;徐樨巍;宋文琪

    遗传代谢病是指参与体内代谢的某种酶、运载蛋白、膜受体等编码基因发生突变,使其编码的产物功能不良而引发代谢失常的一组疾病[1].许多种类的遗传代谢病已有特效治疗方法,降低病死率及远期神经系统后遗症发生率依赖于早期快速诊断前提下的及早干预治疗[2].国内外的大型实验室主要通过串联质谱技术来辅助临床医师进行遗传代谢病诊断[3-6].

  • 抗菌药物敏感性试验新动向:2010年CLSI M100-S20主要更新内容

    作者:杨启文;王辉

    美国CLSI是一个国际性、跨学科、非营利、致力于发展操作标准的教育组织.其抗菌药物敏感性试验分委员会(Subcomittee on Antimicrobial Susceptibility Testing)每年组织该领域专家和药厂代表等对药敏相关文件M100进行修订.目前我国的临床微生物实验室均以CLSI文件作为药敏指导文件进行试验操作和报告,本文将CLSI M100-S20(2010年)[1]的主要更新内容总结如下.

  • 引进CLSI微生物检验标准促进实验室标准化进程

    作者:王辉;史红

    当前,抗菌药物耐药愈演愈烈,已成为全球面临的难题.多重耐药、泛耐药、甚至极度耐药株的出现和传播,给临床治疗和控制带来极大的困难.苯唑西林耐药的金黄色葡萄球菌(MRSA)、万古霉素耐药的屎肠球菌(VRE)、产ESBL的肠杆菌科细菌、碳青霉烯类耐药的不动杆菌(CRAB)和铜绿假单胞菌(CRPA)均已成为国际普遍关注的热点问题[1].

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