中华检验医学杂志
Chinese Journal of Laboratory Medicine 중화검험의학잡지
- 主管单位: 中华医学检验杂志
- 主办单位: 中国科学技术协会
- 影响因子: 1.40
- 审稿时间: 1-3个月
- 国际刊号: 11-4452/R
- 国内刊号: 韩锟
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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全血七种微量元素质控品的配制及评价方案探讨
目的 探讨全血七种微量元素(镁、锰、铁、铜、锌、铅、钙)质控品的实验室自配方案和性能评估.方法 以肝素钠抗凝小牛全血为基质,根据各元素目标浓度添加金属盐或标准液,经防腐、混匀分装处理后制成全血质控品,观察抗菌效果,依据CNAS-GL03评估均匀性、稳定性,依据CLSIEP14文件判断基质效应,应用效果的评估包括检测变异(CV)的比较和标准差指数(SDI)的计算.结果 自配全血元素质控品终浓度达到目标浓度,无菌实验通过,均匀性和稳定性结果表明该质控品基质均匀并至少稳定一年.另外,除铅外其他元素的基质效应可忽略,自身历史比对和室间比对的结果表明该质控品表现与商业质控品无明显差异.结论 本次全血七种元素质控品(镁、锰、铁、铜、锌、铅、钙)的配制和评估方案可行,按照该自配方案配置和评估通过的全血元素质控品可同商业质控品一样进行医学实验室元素检测的室内质控.
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清除法测定小而密低密度脂蛋白胆固醇的方法学评价及临床应用初探
目的 对直接清除法检测小而密低密度脂蛋白胆固醇(sdLDL-C)的检测性能进行初步评价,并对其在急性冠脉综合征(ACS)中的临床应用进行评估.方法 采用病例对照研究,验证并评估直接清除法检测sdLDL-C的精密度、准确度和线性范围.选择2016年4至10月在山东省立医院心内科和急诊内科住院ACS患者143例,男100例,女43例,包括急性心肌梗死(AMI)组59例,不稳定性心绞痛(UAP)组84例;选择山东省立医院健康查体中心健康对照者83名,其中男性59名,女性24名.采用全自动生化分析仪检测sdLDL-C与常规血脂项目总胆固醇(TCH)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、载脂蛋白ApoA Ⅰ、载脂蛋白ApoB、脂蛋白(a)(Lpa)以及超敏C-反应蛋白(Hs-CRP)的水平.非高密度脂蛋白胆固醇(non-HDL-C)用TCH与HDL-C的差值表示.统计学分析采用x2检验、t检验、ANOVA方差分析、Pearson线性相关和多元线性逐步回归分析.结果 直接清除法检测sdLDL-C的批内和批间变异系数为2.85%、3.36%;方法学比对:线性回归方程Y=0.984X +0.018,r2 =0.966,t-0.191,P=0.850;sdLDL-C检测在0.15~2.65 mmol/L范围内呈线性,拟合方程y=1.026X+0.007,r2=0.999.sdLDL-C水平与TCH、non-HDL-C、LDL-C、TG、ApoB呈正相关(r分别为0.758、0.848、0.839、0.514、0.885,P均<0.01),与HDL-C呈负相关(r=-0.224,P=0.001),与ApoA Ⅰ、Lpa、Hs-CRP无相关性(r分别为-0.021、0.050、0.003,P均>0.05).多元线性逐步回归分析显示,对sdLDL-C水平有显著影响的因素为ApoB、LDL-C、TG和HDL-C.ACS组的sdLDL-C、TG水平明显高于健康对照组(t值分别为3.415、4.660,P均<0.01),而两组的TCH、non-HDL-C与LDL-C水平差异无统计学意义(t值分别为-1.831、-0.452、-1.398,P均>0.05).AMI组与健康对照组比较,sdLDL-C、TG、Hs-CRP均明显高于健康对照组(P值分别为0.000、0.000、0.000),而TCH、LDL-C以及non-HDL-C两组之间差异无统计学意义(P值分别为0.800、0.320、0.120);UAP组与健康对照组比较,TG、Hs-CRP高于健康对照组(P值分别为0.001、0.047),TCH、LDL-C明显低于健康对照组(P值分别为0.003、0.008),而sdLDL-C差异无统计学意义(P =0.305);AMI组与UAP组比较,sdLDL-C、TCH、LDL-C、Hs-CRP明显高于UAP组(P值分别为0.000、0.003、0.001、0.000),而TG两组之间差异无统计学意义(P=0.473).结论 直接清除法检测sdLDL-C性能符合要求,能评估血脂的代谢情况,可作为一个ACS独立危险因素和预测指标,临床价值优于LDL-C.
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体外模拟胃肠道消化环境对免疫法粪便隐血实验的影响
目的 探讨胃肠道消化环境对粪便隐血检测的影响.方法 采集中日友好医院2015年体检中心25名健康志愿者外周混合静脉血共45 ml,建立胃肠道体外模拟消化模型,采用两种免疫法便隐血检测试剂,研究不同消化时间及消化液浓度对免疫法便隐血检测的影响.结果 出血量>5 ml时,胃液消化3h且肠液消化2h便隐血实验仍为阳性;胃液消化0.5~3h后如继续肠液消化3h以上时便隐血实验转为阴性;粪便隐血实验的阳性率与出血量密切相关,当出血量较大较急时,由于后带现象可出现假阴性;2种试剂的检出上限均超过3 165 ng/L,检出下限为0.2 ng/L.结论 免疫法检测粪便隐血不仅对下消化道出血敏感,对上消化道出血也有较高的阳性率,免疫法便隐血试剂检出限范围较宽,能够满足临床便隐血检测需要.
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不对称重组酶介导扩增结合分子信标检测金黄色葡萄球菌方法的建立与应用
目的 建立一种基于重组酶介导扩增技术(RAA)与分子信标相结合的病原菌恒温快速检测方法.方法 方法学的建立.通过金黄色葡萄球菌A蛋白(SPA)所对应的基因设计相应引物及分子信标探针,不断调整引物浓度比例以确定佳引物浓度比来进行不对称扩增,利用不对称重组酶介导扩增并与分子信标探针杂交,通过琼脂糖凝胶电泳及荧光采集观测结果.将阳性质粒以10倍的梯度稀释,检测该方法的灵敏度.利用该RAA杂交法检测大坪医院检验科微生物室保存的2016年12月的72株包含金黄色葡萄球菌及葡萄球菌属其他种细菌的菌株,以检测该方法的特异性.在特异性实验基础上添加我室保存的2016年12月的39例其他菌株进行Kappa一致性检验及临床诊断效能评价.结果 当限制性引物与非限制性引物的浓度比例在1:20时,产生单链DNA(ssDNA)的效率高.不对称RAA扩增与分子信标探针杂交的效率明显高于对称扩增.该方法的灵敏度为20拷贝/μl.RAA杂交法能够将金黄色葡萄球菌与葡萄球菌属其他菌株区分,与传统金标准相比Kappa为0.860,一致性良好.经过对111株菌株的检测,该方法敏感度为92.5% (37/40),特异度为97.2%(69/71),阳性预测值为94.9%(37/39),阴性预测值为95.8% (69/72),阳性似然比为33.04,阴性似然比为0.077,约登指数为0.897.与传统金标准相比,Kappa为0.902,两种方法一致性良好.结论 通过对不对称RAA扩增条件的优化及与分子信标探针的结合,建立了RAA杂交技术检测细菌DNA的新方法,为恒温扩增应用于临床奠定基础.
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尿液exosomal miR-375在前列腺癌诊断中的价值初探
目的 研究尿液exosomal miR-375在前列腺癌中的表达及临床应用价值.方法 收集45例前列腺癌患者、24例前列腺增生患者、24名健康对照者的尿液,提取尿液中的exosomal RNA.应用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测尿液exosomal miR-375的表达量,并采用全面的统计方法探讨miR-375对前列腺癌的临床价值.结果 前列腺癌尿液exosomal miR-375的表达量较BPH和健康对照组明显下调,差异有统计学意义(P<0.01).但miR-375在BPH组和对照组中的表达差异无统计学意义(P>0.05).尿液exosomal miR-375的表达与临床分期和骨转移相关(P<0.05),随着临床分期的增加,miR-375的表达水平降低;但miR-375的表达量与患者年龄、Gleason评分和血清前列腺特异性抗原水平相关性不强(P>0.05).ROC曲线显示尿液exosomal miR-375较PSA能够更好地区分前列腺癌与BPH,曲线下面积分别为0.715(95% CI:0.589 ~0.842)、0.632(95% CI:0.492 ~0.771).结论 尿液exosomal miR-375可作为前列腺癌非侵入性的分子诊断标志物.
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浆母细胞样树突细胞白血病的骨髓细胞形态学及临床分析
目的 探讨浆母细胞样树突细胞白血病(BPDCN)患者骨髓细胞形态学的诊断价值.方法 收集北京协和医院2011至2016年确诊的5例BPDCN白血病患者的临床资料.收集患者骨髓涂片标本,在油镜下观察肿瘤细胞的胞体、胞核、染色质,胞浆等方面的形态学特点.结果 5例(100%) BPDCN白血病患者均有皮肤受累,淋巴结肿大4例(80%),肝大3例(60%),脾大4例(80%);免疫表型提示CD4,CD56,CD123均阳性;典型BPDCN细胞具有明显的异质性,中等大小,核圆形或不规则形,染色质丝网状,胞浆灰蓝色,呈不均匀弱嗜碱性,浆内无颗粒,可具有特征性的伪足突出及沿胞膜下呈珍珠项链样排列的空泡,BPDCN细胞可类似3种形态,原始单核细胞样、原幼淋巴细胞样及淋巴瘤细胞样.结论 浆母细胞样树突细胞有特征的形态学表现,若患者有皮肤损害,可高度提示BPDCN白血病的诊断,确诊仍需流式细胞学检查及病理活检.
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缺血性脑卒中患者白细胞Homer表达水平的临床价值
目的 探讨缺血性脑卒中(IS)各亚型患者外周血白细胞Homer表达水平变化及临床价值.方法 回顾性研究.收集2015年7月至2016年6月期间中南医院266例患者全血(平均年龄:72.1±11.7;男172例,女94例),样本分为5组:大动脉粥样硬化型(LAA) 100例,心源性脑栓塞型(CE)42例,小动脉闭塞型(SVO) 68例,其他明确病因型(SOE)23例和不明原因型(SUE)33例,同时收集同期健康体检者126例(平均年龄:71.3±8.1;男84例,女42例).其中IS诊断符合中国急性缺血性脑卒中诊治指南2010年标准.使用RT-qPCR法检测白细胞Homer含量(经对数转换后呈正态分布),采用Oneway ANOVA分析Homer在亚组中表达水平,采用ROC曲线分析计算曲线下面积(AUC)及其95%置信区间(CI),多项Logistic回归分析计算风险比(OR)值及其95% CI.结果 LAA组Homer1 (2.01±0.15)和Homer2(1.81 ±0.31)水平显著高于其他病例组(Homer1 CE:2.40±0.34;SVO:2.38±0.35;SOE:2.36±0.33;SUE:2.40±0.30;Homer2 CE:2.09±0.38;SVO:2.08±0.30;SOE:2.09±0.41;SUE:2.10 ±0.34) (Homer1 CE:t=9.353,P<0.001;SVO:t=9.258,P<0.001;SOE:t=5.396,P<0.001;SUE:t=9.644,P<0.001;Homer2 CE:t=4.725,P<0.001;SVO:t=5.545,P<0.001;SOE:t=3.640,P<0.001;SUE:t=4.669,P< 0.001)和对照组(Homer1:2.35±0.28;Homer2:2.12 ±0.31) (Homer1:t=11.882,P <0.001;Homer2:t=8.464,P <0.001).而非LAA病例组及健康对照组中Homerl(F=0.940,P=0.441)和Homer2(F=0.336,P=0.854)表达差异无统计学意义.各组间Homer3表达差异均无统计学意义(F=0.641,P=0.669).Logistic回归分析显示,在校正了年龄、性别及血脂水平等的影响后,白细胞Homer1与Homer2水平的升高与LAA(Homer1:OR=8.62,95%CI:4.13 ~ 18.00,P<0.001;Homer2:OR=2.42,95%CI:1.75 ~ 3.36,P<0.001)的发生相关.ROC曲线分析显示,联合Homer1与Homer2区分LAA与健康对照者的AUC为0.896(95% CI:0.862 ~0.929,P<0.001);区分LAA与非LAA患者的AUC为0.847(95%口:0.800~0.894,P<0.001).结论 白细胞Homer1与Homer2表达水平可能是LAA早期诊断的潜在标志物.
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循环骨髓瘤细胞数量与髓内瘤细胞负荷相关性分析及临床意义
目的 探讨多发性骨髓瘤(MM)患者的循环骨髓瘤细胞(CMCs)数量和髓内瘤细胞(MMCs)负荷的相关性以及CMCs与MM预后相关指标的关系,评价CMCs反映骨髓瘤细胞负荷及病情进展的可行性.方法 非干预型临床研究.选择2015年7月至2016年10月于郑州大学第一附属医院确诊的82例MM患者,其中男44例,女38例,年龄58(33 ~78)岁;依据诊断和疗效标准分为初发及复发组35例、部分缓解(PR)组31例和完全缓解(CR)组16例;依据CMCs阳性标准分为CMCs阳性组45例和阴性组37例.筛选本院同期30例非浆细胞相关疾病的贫血患者作为对照组,其中男18例,女12例,年龄53 (33 ~ 83)岁.应用流式细胞术检测各组的CMCs和MMCs的比例,同时分析MM患者的血红蛋白(Hb)、血浆白蛋白(Alb)、β2微球蛋白(β2-MG)、血清肌酐(sCrea)、血清钙(Ca)、乳酸脱氢酶(LDH)、骨质破坏、肾功能损害、DS分期及ISS分期各预后相关指标.采用Kruskal-Wallis H检验、Mann-Whitney U检验、Spearman秩相关、x2检验及Logistic回归进行统计学分析.结果 (1)CR组及对照组均未检测出MMCs及CMCs.(2)初发及复发组和PR组的CMCs阳性检出率分别为71.4%、64.5%,两组中CMCs与MMCs比例均呈正相关(P <0.05);MMCs和CMCs在初发及复发组的比例均显著高于PR组,在PR组的比例均显著高于CR组和对照组(P <0.008 3).(3)与CMCs阴性组相比,CMCs阳性组的中度以上贫血、β2-MG增高、sCrea增高、骨质破坏及肾功能损害的频率明显升高,呈现出较高的DS、ISS分期(P<0.05).经多因素Logistic回归分析,中度以上贫血、β2-MG增高是CMCs阳性的独立危险因素(P<0.05).结论 CMCs可反映MM患者的肿瘤负荷及病情进展;相比MMCs,检测CMCs可以提高患者依从性.中度以上贫血和β2-MG增高是MM患者CMCs存在的独立危险因素.
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液相串联质谱法检测血浆醛固酮的方法学建立和性能评价
目的 建立一种稳定的血浆醛固酮(ALD)的液相色谱-串联质谱检测方法(LC-MS/MS).方法 方法学建立.收集2016年2至4月中山医院324名表面健康人群建立生物参考区间,收集322份标本对LC-MS/MS和RIA进行方法学比较.以同位素氘代作为内标,采用CORTEX C18色谱柱进行分离.流动相为甲醇和水,梯度洗脱;柱温:45℃;使用Waters(@) XevoTM TQ MS ACQUITYUPLC(@)Svstem建立方法,并对该方法的线性,回收率,精密度,低检测下限进行性能评价.补充统计学方法.使用SPSS17.0软件进行统计学分析.结果 该方法通过了线性,回收率,精密度和低检测下限的性能评价.ALD的检测线性范围为25~2 000 pg/ml;ALD的定量检出限为20 pg/ml;天间和批间的CV分别<6%和<10%;回收率结果为97.3%~105.8%;建立的生物参考区间为21~211.6 pg/ml(立位);相关曲线r=0.43,Y=0.271X+ 138.900.结论 本研究建立了可靠的检测ALD的LC-MS/MS方法,适合于临床应用.
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评价BACTEC和BacT/Alert血培养系统对临床菌血症标本检测能力的回顾性研究
目的 评价BACTEC Plus需氧瓶、BACTEC Lytic溶血素厌氧瓶的血培养系统和BacT/Alert FA需氧瓶、BacT/Alert FN厌氧瓶的血培养系统对临床菌血症血标本的检测能力.方法 回顾性研究.对北京大学人民医院2013年6月至2015年9月收集的同一住院患者、同一时刻采集的4瓶血培养标本(BACTEC Plus需氧瓶、BACTECLytic溶血素厌氧瓶和BacT/Alert FA需氧瓶、BacT/AlertFN厌氧瓶各1瓶)进行分析.全部血培养瓶用BACTEC FX和BacT/Alert 3D全自动血培养仪培养5d.用x2检验比较不同血培养系统检测不同病原菌临床血标本的阳性率,平均检测时间(TTD)应用配对符号秩和检验.结果 2 189组标本中,20组因抽血量不足剔除,201组(9.27%)为菌血症阳性.除去假阳性及污染的病例,对于不同病原菌,BACTEC Plus需氧瓶和BacT/Alert FA需氧瓶阳性率(单瓶分离菌株数/需氧瓶总分离菌株数)分别为75.3% (140/186)、69.4% (129/186)(x2=1.625,P=0.202),BACTEC Lytic溶血素厌氧瓶和BacT/Alert FN厌氧瓶阳性率(单瓶分离菌株数/厌氧瓶总分离菌株数)分别为63.6% (77/121)、81.8% (99/121)(x2=10.083,P=0.001).BACTEC Plus需氧瓶平均TTD 11.0(8.0 ~ 16.0)h与BacT/Alert FA需氧瓶13.9(10.4 ~ 18.7)h的差异有统计学意义(Z=-5.240,P<0.001),BACTEC Lytic溶血素厌氧瓶平均TTD 8.0(7.0 ~ 10.0)h与BacT/Alert FN厌氧瓶11.3(9.3 ~12.7)h的差异有统计学意义(Z=-4.299,P<0.001).与两系统各抽1套相比,单独抽取1套BACTEC系统或BacT/Alert系统血培养瓶只能分别检出74.13%(149/201)和74.63%(150/201)的阳性标本.结论 BACTEC血培养系统的需氧瓶和厌氧瓶相比BacT/Alert系统具有更快的TTD和更低的假阳性率,对于不同病原菌检测能力差异无统计学意义.BacT/Alert FN厌氧瓶阳性率高于BACTEC Lytic溶血素厌氧瓶.
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抗菌肽hCAP18在结肠癌患者血清中的表达及其临床应用价值
目的 探讨结肠癌患者血清中抗菌肽人类阳离子抗菌蛋白18 (hCAP18)水平的变化及其在结肠癌辅助诊断和预后中的价值.方法 采用病例对照研究.选择同济大学附属同济医院胃肠外科2014年1月至2015年6月结肠癌患者标本68例及同期体检科40名健康对照者进行研究,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中hCAP18的浓度,并比较结肠癌患者术前和术后血清中hCAP18的浓度变化情况;免疫组化检测结肠癌组织中的hCAP18的表达;采用溴脱氧核苷尿嘧啶(BrdU)——酶联免疫吸附试验(ELISA)法和软琼脂克隆形成实验检测hCAP18对结肠癌细胞增殖能力的影响.通过分析受试者工作特征曲线(ROC)判断hCAP18浓度在结肠癌诊断中的敏感度、特异度.采用t检验和单因素方差分析等方法进行统计学分析.结果 血清hCAP18水平在结肠癌Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期、Ⅳ期患者中分别为(0.46 ±0.18) mg/L、(0.65 ±0.45) mg/L、(1.26 ±0.68)mg/L、(2.35±1.06) mg/L,均值为(1.16±0.88)mg/L;显著高于健康对照组的(0.19±0.07) mg/L,差异有统计学意义(t =5.290,P<0.05);在结肠癌患者肿瘤切除后30 d血清中hCAP18的浓度为(0.26±0.06)mg/L,明显低于术前均值(1.16±0.88) mg/L,差异有统计学意义(t=3.971,P<0.05);免疫组化结果显示与癌旁组织相比,结肠癌组织中hCAP18高表达;BrdU-ELISA法检测的结果显示,用浓度为0.05 ~1.00 mg/L的hCAP18在处理后,HCT116和SW480细胞的增殖能力明显增加;软琼脂克隆形成实验显示结肠癌细胞HCT116和SW480经1.00 mg/L hCAP18处理后,HCT116细胞克隆簇大小由(145.40±35.20) μm增加到(370.80±32.65) μm,差异有统计学意义(t=10.50,P<0.05),数量分别由(8.50±2.30)个增加到(42.80±6.60)个,差异有统计学意义(t=3.945,P<0.05);SW480细胞克隆簇的大小由(101.00±27.10) μm增加到(369.00±27.29) μm,差异有统计学意义(t=15.58,P<0.05),数量分别由(6.20±1.70)个增加到(46.00±7.20)个,差异有统计学意义(t=4.775,P<0.05);血清hCAP18检测结肠癌的ROC曲线下为0.93(95% CI=0.859 ~0.999),对结肠癌诊断的敏感度和特异度分别达到91.17%和80.00%,优于结肠癌肿瘤标记物癌胚抗原(CEA)[0.78(95%口=0.699 ~0.933)]对结肠癌的辅助诊断效能,差异有统计学意义(t=4.519,P<0.05).结论 血清hCAP18检测对结肠癌的辅助诊断具有良好的敏感度和特异度,有可能成为一项潜在的检测指标应用于结肠癌的无创诊断和病情检测;hCAP18能促进结肠癌细胞的增殖,在结肠癌的进展过程中扮演着重要的作用.
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炎性因子在小儿脓毒症早期的临床对比初探
目的 探讨脓毒症诊断前不同时间点的炎性因子[肝素结合蛋白(HBP)、降钙素原(PCT)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)]的临床价值对比.方法 采取回顾性研究模型,选取2014年1月至2016年10月舟山市妇幼保健院儿科病房小儿脓毒症患者24例,平均年龄(4.08±1.68)岁,男性16例,女性8例.收集患儿诊断脓毒症时刻的前72 h(A组)、前48 h(B组)、前24 h(C组)血浆;同期选取22名无器质性疾病的小儿健康体检者抽取血浆作为正常对照组,平均年龄(4.07±1.58)岁,男性12名,女性10名.酶联免疫吸附法检测肝素结合蛋白(HBP)、白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10),免疫荧光法检测降钙素原(PCT)和超敏C反应蛋白(hs-CRP).采用重复测量的方差分析和多重比较检验各时间点的差异,受试者工作特征曲线分析其诊断价值.结果 HBP在正常对照组、A组、B组、C组的血浆水平分别为(9.69±1.30) μg/L、(12.82±2.03) μg/L、(15.46±1.02) μg/L、(18.60±1.10)μg/L,HBP的B组、C组时间点分别高于A组和B组水平(t=5.62,P<0.01;t=10.25,P<0.01),A、B、C组均高于正常对照组(t=6.27,P<0.01;t=16.82,P<0.01;=25.16,P<0.01).受试者工作特征曲线(ROC曲线)显示,HBP在A组的诊断效能(AUC)分别为0.823,均高于其他4种炎性因子(IL-6、IL-10、PCT、hs-CRP)(Z=2.41,P<0.01;Z=2.02,P<0.05;Z=0.38,P>0.05;Z=0.32,P> 0.05),HBP在B组的诊断效能(AUC)分别为0.898,均高于其他4种炎性因子(IL-6、IL-10、PCT、hs-CRP)(Z =0.43,P>0.05;Z =0.46,P>0.05;Z =0.26,P>0.05;Z=0.57,P>0.05),PCT在C组的诊断效能(AUC)为0.941,高于其他4种炎性因子(IL-6、IL-10、HBP、hs-CRP)(Z=0.12,P> 0.05;Z=0.08,P> 0.05;Z=0.03,P>0.05;Z=0.10,P>0.05).结论 HBP具有较宽的诊断窗口期,可作为小儿脓毒症的早期预测指标之一.IL-6、IL-10、PCT及hs-CRP在小儿脓毒症的不同时期也分别具有一定的诊断价值.
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免疫共沉淀联合液相色谱串联质谱技术应用于精子膜蛋白筛选
目的 为了揭示免疫性不育的机制,研究通过免疫共沉淀联合液相色谱串联二级质谱技术筛选与抗精子抗体(ASA)结合的精子膜蛋白.方法 病例对照研究.选取2015年9至12月在中国人民解放军总医院生殖中心门诊就诊的不明原因不孕症血清标本521份,采用ELISA试剂盒进行ASA阳性血清的筛选,再应用混合抗球蛋白试验对ASA阳性血清进行确认,得到ASA阳性血清标本56份作为疾病组,同时选择在该院临床检验科正常查体的血清ASA阴性的已正常生育过的健康人血清标本31份作为对照组.选取2016年1至4月在中国人民解放军总医院行正常查体男性志愿者精液标本48份,混合后提取精子膜蛋白.进行免疫共沉淀反应,精子膜蛋白分别与ASA阳性血清、ASA阴性血清孵育后,同时加入蛋白A/G(protein A/G)孵育,采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳对免疫沉淀复合物进行分离,切胶酶解后,进行液相色谱串联二级质谱分析,得到相应的蛋白编码.通过UniProt数据库检索查找这些蛋白的名称、生物学功能、细胞定位等信息.结果 筛选出ASA阳性不育患者血清56份(女39例、男17例),ASA阴性正常生育者31例(女17例、男14例).共鉴定出40种相关蛋白,可分为3组蛋白,分别是:仅与正常组血清相结合的蛋白(11种);既与正常组血清结合,也与ASA阳性不育组血清结合的蛋白(14种);仅与ASA阳性不育组血清结合的蛋白(15种).这15种蛋白分别是精子阳离子通道蛋白1,精子阳离子通道蛋白3,精子阳离子通道蛋白4,精子相关抗原9,载脂蛋白A-I,轴丝动力蛋白重链14,多波段多肽-2,精卵融合蛋白4,硫氧还蛋白结构域蛋白2,含有蛋白H的IQ域,含有蛋白F1的IQ域,精子发生相关蛋白5,精子发生相关蛋白5样蛋白1,精子顶体膜相关蛋白1,E3泛素蛋白连接酶RNF114.结论 利用免疫共沉淀联合液相色谱串联二级质谱分析技术筛选出15种免疫性不育相关的候选蛋白,可能对揭示免疫性不育病因有重要意义.
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精准医疗、精准检验、检验精准
随着人类基因测序、生物医学分析技术的进步及大数据分析工具的出现,提出了新的精准医疗的概念.精准医疗在个体化用药、遗传病分析和疾病预测等方面的应用越来越广,并将成为今后疾病诊疗的发展趋势.然而,要实现精准医疗,首先必须做到精准检验,这一需求的不断强化才能推动检验新技术的持续发展.临床实验室是实现精准检验的载体,加强临床实验室的建设,提高实验室的管理水平,做到检验精准,才能为精准医疗提供更加可靠的依据.
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精准医学与临床实验室规范化
从精准医学发展初,DNA测序等实验室检测就伴随精准医学,成为推动精准医学的关键技术.而展望精准医学的发展,其必将是与临床实验室检测相伴相随.但随着新的方法和新的检测指标的不断出现,临床实验室规范化检测也面临巨大的挑战.精准医学检测商品化试剂或系统、临床实验室检测,特别是精准医学检测项目、实验室自建试剂方法和结果报告与解释等方面均有一些规范化要求值得重视.
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唾液活检在肿瘤领域的研究现状
以唾液为基质的检测具有无创、准确、简便的优势.目前证实的唾液肿瘤标志物有蛋白质、mRNA、miRNA以及DNA,相应的检测技术有聚丙烯凝胶电泳、芯片、测序等.通过相关文献的分析,发现唾液活检在肿瘤领域的诊断、临床用药治疗及预后评价方面具有重要作用.由于文献报道的实验设计多样化,尚需大量科学验证对唾液采集和处理方法、检测程序及质量控制进行标准化.
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液体活检在结直肠癌诊疗中的应用
液体活检在实现精准医疗的过程中已经崭露头角,其在多种疾病诊疗的应用实践中起到正越来越重要的作用.结直肠癌发病率高、起病隐匿,基于液体活检的精准检测技术将有利于早期筛查与诊断、术后监测以及靶向用药指导,终可改善患者生存质量及预后.我们应把握当下机遇,推动具有潜力的研究成果向结直肠癌临床诊疗应用的转化.临床医师、检验技术人员及监管机构应直面液体活检技术在临床转化过程中的各项挑战.
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分子标志物检测在筛选转移性结直肠癌靶向治疗获益人群中的应用研究进展
结直肠癌(CRC)是一种分子型别多样化的肿瘤.早期非转移性CRCs,经以手术为主的综合治疗后,五年生存率达50% ~ 80%.对于晚期转移性结直肠癌(mCRC)患者,多数只能选择全身化疗,且治疗效果不佳,西妥昔单抗、帕尼单抗和贝伐单抗等靶向药物可用于晚期mCRCs,延长患者生存时间.大量研究显示,KRAS、BRAF等驱动基因的检测对于指导临床抗EGFR治疗等靶向用药具有重要价值.本文对晚期mCRCs的KRAS,BRAF突变以及微卫星不稳定(MSI)和人类表皮生长因子受体2(HER2)过表达的检测分别在抗EGFR、抗PD-1和抗HER2单抗药物和BRAF抑制剂应用中的相关临床研究作一简要概述.
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血栓实验室检查的循证发展与挑战
血栓实验室检查的临床应用可分为四类,包括风险评估、排除诊断、辅助诊断和治疗监测.有循证依据并被纳入国际主流血栓防治指南的项目包括凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、抗因子Xa活性、D-二聚体、凝血因子Ⅷ、抗凝血蛋白、抗磷脂综合征相关指标、肝素诱导的血小板减少症抗体以及血小板聚集试验等,为临床干预和制定抗栓策略提供重要依据.其他多数血栓试验尚缺乏足够的循证证据,因此需要积极参与多中心临床随机对照研究,主动进行系统评价和荟萃分析,解决基于PICO构建的临床问题,推动实验室指标的临床应用.
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两种检测抗双链DNA抗体方法及量值与系统性红斑狼疮活动指数评分的相关性研究
系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)是自身免疫介导的,以免疫炎症为突出表现的弥漫性结缔组织病.SLE疾病活动性指数(systemic lupus erythematosusdisease activity index,SLEDAI)评分是临床公认的作为SLE判断病情活动的一种可靠、有效的评价工具,通过SLEDAI评分可进行不同剂量激素和不同免疫抑制剂的选择.其中实验室指标抗dsDNA抗体是SLEDAI评分的活动性指标之一,对诊断SLE有较高的特异性.目前,存在多种抗dsDNA抗体检测方法,但各种方法对SLE患者活动度判断的效能评价却不同.对此,本研究通过回顾分析ELISA及间接免疫荧光法(indirect immunofluorescence,IIF)检测抗dsDNA抗体结果的符合率及与SLEDAI评分的相关性,探讨两种方法对于判断SLE疾病活动度的临床价值.
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慢性阻塞性肺疾病中TAM受体的表达与临床意义
慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonarydisease,COPD)是一种以气道、肺实质及肺血管的慢性炎症为主要特点的呼吸道疾病.预测到2020年,COPD将居全球死亡原因的第3位,将会给社会带来巨大的经济和社会问题,严重影响老年患者的生活质量[1].近年来,越来越多的研究表明细胞凋亡参与COPD的发生发展,COPD患者肺内凋亡细胞显著增加,同时肺泡巨噬细胞吞噬凋亡细胞的能力下降,导致凋亡细胞在肺内聚集,当过多的凋亡细胞不能被及时清除,可发生凋亡细胞的继发性坏死[2],致炎症和自身免疫性反应,目前临床上还没有评估COPD患者及其严重程度的血浆标志物.
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10种市售总25-羟基维生素D免疫检测系统测定偏差评价
目的 评价10种25-羟基维生素D[25(OH)D]免疫检测系统的测定偏差.方法 本研究属于方法学比对.先选用含有不同25 (OH)D类型的4浓度水平的人血清标准物质SRM972a,应用本室建立的液相色谱-同位素稀释质谱法(ID-LC/MS/MS)和迈瑞、新产业、迈克、科美、雅培、西门子、罗氏、梅里埃8个厂家的10种标记免疫检测系统共同测定,利用Excel软件计算测量值和标准物质标示值之间的相对偏差.再选用2支含不同浓度水平25(OH)D3的临床血清样本进行共同测定,利用Excel软件计算免疫检测系统测量值和ID-LC/MS/MS测量值之间的相对偏差.对各免疫检测系统测定偏差结果进行评价,要求免疫检测系统相对偏差不大于10%,同时简要分析各检测系统分析特异性.结果 通过对血清25(OH)D标准物质测试,自建ID-LC/MS/MS测量结果和标准物质标示值接近,测量偏差在1.6% ~2.8%,各免疫检测系统对不同类型25(OH)D成分的检测能力有差别,有8个检测系统对高含量25(OH)D3标准物质(水平1)测量偏差较小(1.5%~3.5%),但只有2个免疫检测系统对高含量25(OH) D2标准物质(水平3)测量偏差较小(3.6%~3.7%),5个免疫检测系统对高含量3-epi-25(OH)D3标准物质(水平4)测量偏差较小(-0.3% ~9.0%).总体而言检测系统7表现出较小的测定偏差,对25 (OH) D2、25 (OH) D3和无活性异构体3-epi-25 (OH) D3有较好的分析特异性.对2支25(OH)D3血清临床样本的测试显示,与同位素稀释质谱法测量结果相比,免疫检测系统高值样本检测时测定偏差较小.结论 不同免疫检测系统对25(OH)D检测结果与ID-LC/MS/MS相比,测量偏差的差异较大.各25 (OH)D免疫检测的特异性检测能力,尤其是对25(OH)D2和25(OH)D3的等效识别上还有提升的空间.
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2017年CLSI M100-S27主要更新内容解读
CLSI M100S是临床微生物药敏试验重要指南之一,是由临床微生物专家、临床专家、药学专家等共同编写,是临床微生物工作人员、临床医生、临床药师抗感染参考指南之一.每年更新一次,每次更新内容都经过高质量研究证实、众多专家反复商榷,现将2017年的更新内容汇总如下[1].
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三级综合性医院医学检验部门设置基本要求的建议
医学检验部门指开展临床检验工作,以提供人类疾病诊断、管理、预防和治疗或健康评估的相关信息为目的,对来自人体的血液、体液、分泌物、骨髓、组织等各种标本进行血液免疫学、血液学、生物化学、免疫学、微生物学、分子生物学、药理学、细胞遗传学等检测并出具医学检验结果的实验室.本建议主要适用于三级综合性医院的医学检验部门.其他类型医疗机构的医学检验部门可以参照本建议.
关键词:
年 | 期数 |
2019 | 02 |
2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
2002 | 01 02 03 04 05 06 |
2001 | 01 02 03 04 05 06 |
2000 | 01 02 03 04 05 06 |
1999 | 01 02 03 04 05 06 |
1998 | 01 02 03 04 05 06 |