中华血液学杂志
Chinese Journal of Hematology 중화혈액학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 1.17
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0253-2727
- 国内刊号： 12-1090/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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丁酸钠诱导NB4细胞凋亡的蛋白质组学研究
目的分析丁酸钠(SB)诱导NB4细胞凋亡后细胞蛋白质组的变化,以探讨SB诱导NB4细胞凋亡的分子机制.方法在NB4细胞培养体系中,加入1.0 mmol/L SB,用流式细胞术检测对照组及加药后0,12,24,48,72 h细胞的凋亡情况;分别取对照组及用药后上述时间点的细胞进行双向凝胶电泳(2-DE),分析不同时间点蛋白质组的变化,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和电喷雾串联质谱(ESI-MS/MS)对发生变化的蛋白质进行鉴定分析.结果SB可诱导NB4细胞凋亡,并呈时间依赖性.SB作用NB4细胞后21种蛋白发生了明显的变化,这些敏感蛋白涉及凋亡信号传导、免疫调节、转录调控、细胞代谢、细胞内分子转运等众多细胞内事件.其中13种蛋白已有报道与凋亡相关.结论SB不仅可促进肿瘤细胞凋亡,而且可能有增强细胞对化疗药物敏感性及免疫调节作用,新蛋白的鉴定为进一步分析SB抗肿瘤作用的机制及筛选新的药物靶点奠定了分子基础.
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特异诱导脐血CD8+抗白血病细胞毒淋巴细胞的研究
目的研究体外诱导脐血CD8+细胞毒性T淋巴细胞(CTL)特异性杀伤白血病细胞的作用,探讨脐血淋巴细胞用于特异性免疫治疗的可行性.方法联合细胞因子体外诱导10份脐血单个核细胞(MNC)分化为树突细胞(DC),同时负载U937冻融抗原;成熟DC刺激同源的脐血T淋巴细胞成为CTL,经MACS磁珠分选出CD8+CTL.倒置显微镜、扫描电子显微镜及流式细胞术等方法检测DC细胞特性.MTT法测定细胞杀伤活性.结果10份脐血标本均可培养出形态典型、功能成熟的DC.CD8+CTL、CD8-CTL和淋巴细胞(TL)组对U937细胞不同效靶比的杀伤率以CD8+CTL组高;CD8+CTL在40:1效靶比时对靶细胞U937细胞的杀伤率高于对K562细胞的杀伤率[分别为(66.36±12.43)%和(41.97±14.24)%,(P《0.05)];而CD8-CTL在40:1效靶比时对U937细胞和K562细胞的杀伤率差异无统计学意义[分别为(34.47±8.19)%和(22.45±4.00)%(P》0.05)].结论用负载U937细胞抗原的成熟脐血DC,诱导出脐血淋巴细胞特异性的CD8+CTL;CD8+CTL对U937细胞的杀伤活性强于CD8-CTL;CD8+CTL对U937细胞的杀伤活性具有特异性.
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乌苯美司增强全反式维甲酸诱导急性早幼粒细胞白血病细胞分化的体外研究
目的探讨氨肽酶N抑制剂乌苯美司(ubenimex)对全反式维甲酸(ATRA)诱导人急性早幼粒细胞白血病(APL)细胞分化的影响及可能机制.方法采用流式细胞术检测细胞表面分化抗原CD11b,四氮唑蓝(NBT)还原实验检测细胞分化;Western blot法检测细胞c-Myc、ERK1/2及p-ERK1/2、p38MAPK及p-p38MAPK蛋白表达.结果ubenimex单独应用对NB4细胞的NBT还原能力及CD11b表达无明显影响,但ubenimex能增强ATRA诱导NB4细胞的NBT还原能力及CD11b的表达.100μg/ml ubenimex能增强10 nmog/L ATRA诱导原代APL细胞的NBT还原能力.100μg/mlubenimex增强10 nmol/L ATRA下调NB4细胞c-Myc蛋白的表达;抑制10 nmol/L ATRA引起的NB4细胞的p38MAPK磷酸化.结论ubenimex能够增强ATRA对APL细胞的诱导分化作用,可能与抑制p38MAPK的磷酸化及对原癌基因c-Myc表达的调控有关.
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成年大鼠骨髓多能成体祖细胞的克隆化培养及其鉴定
目的优化培养条件,获得体外克隆化培养的成年大鼠骨髓多能成体祖细胞(rMAPC),并对其进行表型分析及分化潜能鉴定.方法选择低血清条件培养基全骨髓直接贴壁法初步分离大鼠骨髓干细胞,用极限稀释法进行克隆化培养;用流式细胞术及免疫细胞化学法对克隆化培养的rMAPC进行表型分析,并进行体外成脂肪、成骨及成神经细胞诱导,RT-PCR检测Oct 4及三个胚层早期标志物,确定其表型及分化潜能.结果单个细胞来源rMAPC在体外扩增至20代仍保持良好的生长状态;流式细胞术及细胞免疫组化检测结果显示CD71、α-SMA及Vimentin表达阳性;CD34、CD44、CD45表达阴性;细胞周期分析显示S+G2+M期细胞约占17%,而处于G0/G1期的细胞占83%;rMAPC体外可被诱导向脂肪细胞、骨细胞及神经细胞分化;RT-PCR检测到Oct 4及三个胚层早期标志物的表达.结论体外克隆化培养的rMAPC能维持良好的干细胞生物学特性.
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阿霉素增强抗人DR5单克隆抗体mDRA-6诱导HL-60细胞凋亡的作用
目的观察抗死亡受体5(DR5)单克隆抗体(单抗)mDRA-6与阿霉素(Adr)对HL-60细胞的协同杀伤作用.方法用DR5蛋白免疫BALB/c小鼠,融合筛选抗DR5杂交瘤细胞,制备抗人DR5单抗mDRA-6;流式细胞术测定Adr对HL-60细胞表面DR5表达的影响;荧光显微镜下观察mDRA-6与Adr协同作用下HL-60细胞的形态变化;MTT法测定1μg/ml Adr与不同浓度的mDRA-6对HL-60细胞存活的影响;琼脂糖凝胶电泳检测mDRA-6与Adr联合对HL-60细胞DNA片断化的影响.结果Adr诱导HL-60细胞表面DR5表达,mDRA-6作用后HL-60细胞出现染色质浓缩、断裂,细胞出芽,凋亡小体形成,mDRA-6与Adr联用细胞形态变化更明显;mDRA-6与Adr对HL-60细胞具有明显的协同杀伤作用,20 ng/ml的mDRA-6作用HL-60细胞10 h,细胞死亡率为9.32%,1μg/ml Adr作用HL-60细胞10 h,细胞死亡率为17.47%,20 ng/ml mDRA-6联合1μg/ml Adr,可使HL-60细胞死亡率增至65.06%;20μg/ml mDRA-6与1μg/ml Adr联合作用于HL-60细胞3 h,DNA琼脂糖凝胶电泳显示明显"梯形"条带.结论抗DR5单抗mDRA-6与Adr对HL-60细胞具有强大的协同杀伤作用.
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联合转染mdr1和mcl1基因短发夹RNA干扰表达质粒逆转K562/A02细胞耐药的实验研究
目的构建针对mdr1和mcl1基因的短发夹RNA(shRNA)干扰表达质粒,并探讨联合转染对K562/A02细胞耐药的逆转作用.方法根据mdr1和mcl1基因表达序列设计有效的RNA干扰片段,分别将其构建入质粒表达空载体中,以获得两种基因特异性shRNA干扰表达质粒;然后在脂质体介导下分别和联合转染K562/A02细胞,用G418和(或)Hygro B筛选出稳定表达的细胞克隆.用RT-PCR分析mdr1和mcl1 mRNA的表达;MTT法检测阿霉素对K562/A02细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞术测定细胞P-糖蛋白表达水平以及细胞凋亡率.结果成功构建两个基因的shRNA干扰表达质粒.mdr1、mcl1 shRNA干扰表达质粒单独和联合转染K562/A02细胞可有效封闭相应基因表达,联合转染组mdr1基因和mcl1基因的mRNA相对表达水平分别是未转染细胞的52%,44%.mdr1、mcl1 shRNA干扰表达质粒单独和联合转染后K562/A02细胞耐药逆转率分别为63.8%,71.1%,83.1%,转染两种质粒组对K562/A02细胞耐药逆转率高,P糖蛋白相对表达量由未转染组的19.70±1.15降至6.40±0.92(P《0.01),阿霉素诱导的细胞凋亡率由(1.53±0.42)%提高至(7.77±0.42)%(P《0.01).联合转染两种质粒组和单独转染组比较,细胞对阿霉素敏感性和阿霉素诱导的细胞凋亡率差异亦有统计学意义(P《0.05).结论转染mdr1或mcl1基因的shRNA干扰表达质粒可有效抑制相应基因表达,皆不同程度逆转K562/A02细胞对阿霉素的耐药性;联合转染两种质粒可显著增加逆转耐药的效果.mcl1基因可能与K562/A02耐药相关.
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抗血管内皮生长因子发夹状核酶基因抑制白血病细胞裸鼠体内生长和肿瘤内血管生成
目的探讨抗血管内皮生长因子(VEGF)发夹状核酶基因对白血病细胞裸鼠体内生长和肿瘤内血管生成的影响.方法采用脂质体介导的方法将抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体pcDNA-RZ转染白血病细胞系K562,G418抗性筛选获得阳性克隆;抽提基因组DNA,用PCR方法验证核酶基因已转入K562细胞;荧光定量PCR和免疫印迹反应检测白血病细胞中VEGF mRNA和蛋白表达量的改变;将白血病细胞皮下接种BALB/c裸鼠,观察转染细胞在裸鼠体内成瘤及生长情况;组织形态学和免疫组织化学法检测裸鼠移植瘤微血管密度(MVD).结果抗VEGF发夹状核酶基因真核表达载体pcDNA-RZ转入白血病细胞系K562(K562/RZ),G418筛选两周获得阳性克隆,PCR检测证实核酶基因整合入白血病细胞基因组DNA;与K562及K562/PC细胞(转染空质粒的K562细胞)相比,K562/RZ细胞VEGF mRNA和蛋白的表达量明显降低.接种K562、K562/PC和K562/RZ细胞组小鼠肿瘤终体积分别为(3.21±0.89)cm3,(3.42±1.01)cm3,(1.71±0.94)cm3;肿瘤重量分别为(4.43±0.87)g,(3.96±0.94)g,(2.24±0.56)g;瘤体内MVD分别为4.70±1.25,4.67±1.31和1.80±1.55.以上各组之间的差异均有统计学意义(P《0.01).结论转导抗VEGF发夹状核酶基因能减少白血病细胞中VEGF的合成,细胞裸鼠致瘤能力明显减弱,瘤体内血管形成能力降低.
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急性髓系白血病和骨髓增生异常综合征患者NPM基因突变的研究
目的探讨染色体核型正常的急性髓系白血病(AML)和骨髓增生异常综合征(MDS)患者NPM基因突变.方法染色体核型正常的AML患者40例(初治28例,首次完全缓解期12例),MDS患者33例,用基因组DNA PCR法扩增NPM基因第12外显子,PCR产物纯化后直接测序,发现突变患者,将PCR产物克隆至pUCm-T载体,转化大肠杆菌DH5α,至少挑选5个以上重组克隆,小量制备质粒后进行测序.结果共发现NPM突变患者6例(AML 4例,MDS 2例),A型突变4例,B型突变1例,新发现突变1例(命名为R型).结论新发现了一个NPM突变类型,并在国内外首次证实MDS患者也存在NPM基因突变,为进一步研究NPM突变与AML及MDS发生的关系提供了重要线索.
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PY20抗体检测bcr-abl阳性细胞内磷酸化酪氨酸的临床应用
目的探讨酪氨酸磷酸化抗体PY20检测bcr-abl阳性细胞的特异性及其可能的临床应用.方法采用多色直接免疫荧光标记方法,同时标记膜CD45和胞质PY20抗体,应用流式细胞术检测bcr-abl阳性细胞系(K562、MEG-01)和阴性细胞系(Jurkat、MCF-7)的酪氨酸磷酸化水平.并利用bcr-abl蛋白酪氨酸磷酸化特异性阻断剂伊马替尼作用K562细胞和MEG-01细胞,观察PY20抗体的特异性.检测了49例白血病患者和3名正常人的骨髓细胞,包括慢性粒细胞白血病(CML)、Ph+急性淋巴细胞白血病(Ph+ALL)、Ph-ALL、急性髓系白血病、慢性淋巴细胞白血病.PY20+细胞占白血病细胞群的10%以上定义为阳性.以阳性细胞的平均荧光强度(MFI)表示其酪氨酸磷酸化水平.结果bcr-abl阳性细胞系、10例初诊CML和8例Ph+ALL患者PY20抗体均为阳性,而bcr-abl阴性细胞系、20例bcr-abl阴性白血病患者和3名正常人PY20抗体均为阴性.伊马替尼作用后K562细胞和MEG-01细胞的酪氨酸磷酸化水平随作用时间的延长逐渐下降.10例初诊和9例伊马替尼治疗有效的CML患者PY20+细胞占有核细胞的比例分别为(54.20±19.82)%和(14.84±6.17)%(P《0.05),而2例伊马替尼耐药者PY20+细胞比例分别为64.3%和57.2%.2例伊马替尼耐药患者和9例伊马替尼治疗有效患者的CML细胞的MFI分别为99.42±4.87和46.41±4.67(P《0.01).结论酪氨酸磷酸化抗体PY20对bcr-abl阳性细胞具有相对特异性,有可能应用于bcr-abl阳性疾病如CML和Ph+ALL的早期快速辅助诊断,同时有可能作为判断该类疾病对伊马替尼敏感性的一个辅助指标.
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吡柔比星联合化疗方案治疗初治高危、复发难治性急性白血病111例疗效分析
应用吡柔比星(Thp,深圳万乐药业有限公司产品)联合化疗方案治疗初治高危、复发难治性急性白血病共111例,现将结果报告如下.
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新疆生产建设兵团1997-1999年白血病死亡分布特征及潜在减寿年数分析
白血病为我国十大恶性肿瘤之一,病死率较高,危害较大,其病因和发病机制至今不明.我们对新疆生产建设兵团(以下简称兵团)1997至1999年白血病死亡分布特征及潜在减寿年数进行了分析,报道如下.
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CAG方案对急性髓系白血病细胞作用机制的研究
难治复发急性髓系白血病(AML)具有对化疗药物不敏感、完全缓解(CR)维持时间短、易复发等特点,其治疗目前仍是一大难题.1995年日本学者Yamada等[1]提出的CAG方案,即粒细胞集落刺激因子(G-CSF)与低剂量阿糖胞苷(Ara-C)和阿克拉霉素(ACR)联合使用,对治疗难治复发AML取得一定疗效[2～4].我们以AML细胞系U937、HL-60细胞及其耐药株HL-60/ADM细胞为模型,探讨CAG方案在难治复发AML联合化疗中的作用机制.
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K562/A02耐药细胞NF-κB活性测定及葛根素部分逆转耐药效应的初步研究
白血病细胞的多药耐药(MDR)的产生是导致化疗失败的主要原因.目前发现MDR的产生机制是多因素的,且有不同的耐药表型.核转录因子Kappa B(NF-κB)在细胞增殖和凋亡中起关键调控作用.为明确NF-κB是否与细胞MDR产生有关及葛根素是否通过抑制NF-κB活性而逆转耐药,我们观察了慢性粒细胞白血病急变细胞株K562及其耐药细胞株K562/A02的NF-κB活性,P糖蛋白(P-gp)、耐药相关蛋白(MRP)表达情况,以及葛根素干预前后NF-κB活性,P-gp、MRP表达的变化,为揭示白血病细胞耐药机制,寻求有效的逆转耐药药物提供实验依据.
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慢性淋巴细胞白血病的细胞遗传学研究
慢性淋巴细胞白血病(CLL)被认为是一种低度恶性的单克隆淋巴细胞增殖性疾病,临床分期和细胞遗传学结果与预后有很大关系.由于淋巴细胞较低的增殖活性,CLL的细胞遗传学检查有一定的难度.国内尚无关于CLL的大样本细胞遗传学研究报道.我院1990年1月至2005年7月初诊或病程中(包括进展阶段)93例CLL患者行染色体检查,现将有关情况进行分析.
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G-CSF对洛伐他汀诱导的K562细胞内酸碱度及凋亡的影响
重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)广泛用于防治放化疗后的粒细胞减少,但G-CSF可以抑制肿瘤细胞的凋亡[1].已有研究报道,细胞内碱性化,即细胞内酸碱度(pHi)值升高可以使DNA合成增加,细胞增殖,同时抑制细胞凋亡[2].我们对G-CSF在洛伐他汀(LOV)诱导K562细胞凋亡作用中的影响及其机制进行了初步探讨.
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伊马替尼体外对c-kit阳性急性髓系白血病患者骨髓细胞增殖和凋亡的影响
伊马替尼是一种2-苯胺嘧啶衍生物,除对bcr/abl融合基因阳性的慢性粒细胞白血病(CML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)细胞有明显的作用外,还可以抑制c-kit酪氨酸激酶.在急性髓系白血病(AML)中c-kit被异常磷酸化.我们用不同浓度的伊马替尼对c-kit+AML患者骨髓细胞进行体外处理,采用MTT法、RT-PCR法及流式细胞术探讨其对骨髓细胞凋亡的影响,旨在为临床应用伊马替尼治疗AML提供理论依据.
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淋巴瘤的靶向治疗进展
在美国NCCN颁布的淋巴瘤治疗原则中CHOP方案(环磷酰胺、阿霉素、长春新碱、泼尼松)仍是侵袭性淋巴瘤一线治疗方案,其CR率为45%～53%,长期无病生存率为30%～37%.对于难治、复发病例,美国MD Anderson肿瘤中心比较了ESHAP、EPOCH、MINE几种三线方案的疗效,发现多数患者于2年内因治疗失败而死亡[1].近20年来,人们发现正常淋巴细胞生长发育过程中所需的一些重要的调节通路和因子在淋巴瘤的肿瘤生长中起着关键作用,以此为靶点设计的特异性靶向治疗新药与传统细胞毒药物相结合带来了肿瘤治疗的变革[2].我们将全面综述恶性淋巴瘤靶向治疗的新进展.
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酪氨酸激酶获得性突变JAK2 Val617Phe与骨髓增殖性疾病
骨髓增殖性疾病(MPD)是克隆性造血干细胞疾病,以骨髓中一系或多系细胞增殖、外周血出现过多的成熟或幼稚细胞为特征.MPD主要包括下列一组疾病:真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多症(ET)、原发性骨髓纤维化(IMF)、慢性粒细胞白血病(CML)以及少见亚型如嗜酸粒细胞增多症(HES)、慢性嗜酸粒细胞白血病(CEL)等.已明确9号和22号染色体易位所产生的融合基因bcr-abl是CML发病的关键环节[1];近年来的研究表明,HES中也存在特征性分子遗传学改变--FIP1L1-PDGFRA融合基因[2,3].但PV、ET、IMF等其他bcr-abl阴性的MPD基础研究进展相对缓慢.2005年的几项研究表明,在大多数PV以及部分ET和IMF中存在高致病性的获得性突变--酪氨酸激酶JAK2Val617Phe.该突变的发现令人瞩目,为揭示MPD的发病机制提供了新的思路.
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甲磺酸伊马替尼治疗慢性粒细胞白血病需注意的问题
甲磺酸伊马替尼(Imatinib mesylate,简称Im)的问世是一个多世纪以来慢性粒细胞白血病(CML)治疗的重大突破.它是当今惟一可以使CML达到分子效应的药物.
| 年 | 期数 |
| 2019 | 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2017 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1997 | 02 |
