中华血液学杂志
Chinese Journal of Hematology 중화혈액학잡지
- 主管单位： 中国科学技术协会
- 主办单位： 中华医学会
- 影响因子： 1.17
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 0253-2727
- 国内刊号： 12-1090/R
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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体外转染JWA核酶逆转录病毒载体对人骨髓基质细胞黏附功能的影响
目的 探讨JWA核酶基因转染对人骨髓基质细胞(BMSC)黏附功能的影响.方法 设计合成JWA核酶基因并构建于逆转录病毒载体pLXSN上,转染体外培养的人BMSC(BMSC-JWARZ组),应用半定量RT-PCR法(sqRT-PCR)测定细胞内JWA mRNA的表达,流式细胞仪检测BMSC细胞间黏附分子-1(ICAM-1)和血管黏附分子-l(VCAM-1)的表达,并检测共培养条件下BMSC对Jurkat细胞的黏附率及Jurkat细胞增殖变化.以pLXSN空载体转染的BMSC(BMSC-pLXSN组)及未转染细胞(BMSC组)为对照.结果 BMSC-JWARZ组JWA mRNA表达量[吸光度(A)值]为0.187±0.045,较BMSC-pLXSN组(0.382±0.039)及BMSC组(0.366±0.048)显著降低;BMSC-JWARZ组细胞表面ICAM-1阳性细胞率为(16.11±3.93)%,较B-pLXSN组[(38.24±5.37)%]及BMSC组[(36.27±6.19)%]显著降低;BMSC-JWARZ组细胞表面VCAM-l阳性细胞率为(12.08±3.34)%,较BMSC-pLXSN组[(26.88±5.17)%]及BMSC组[(24.55±3.68)%]显著降低;B-JWARZ组细胞对Jurkat细胞的黏附率为(23.65±5.27)%,较BMSC-pLXSN组[(35.14±8.11)%]及BMSC组[(33.72±6.29)%]显著降低,与BMSC-JWARZ组细胞共培养的Jurkat细胞倍增时间为58.7 h,明显长于与BMSC-pLXSN组(44.1 h)及BMSC组(43.7 h)细胞共培养时.结论 JWA核酶基因转染可抑制人BMSC内JWA基因的表达,抑制骨髓基质细胞黏附功能.
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热休克蛋白90抑制剂17-AAG诱导K562细胞凋亡作用的研究
目的 研究热休克蛋白90(Hsp90)抑制剂17-AAG诱导人白血病细胞系K562细胞凋亡及其分子机制.方法 用17-AAG处理K562细胞,用四氮唑盐还原法(MTT法)检测17-AAG对K562细胞增殖抑制的剂量-时间-效应关系,瑞特-姬姆萨染色观察细胞形态学变化,Hoechst 33342荧光染色观察凋亡细胞核的变化,流式细胞仪检测细胞凋亡率和细胞周期变化,Western blot检测相关蛋白分子的变化.结果 17-AAG呈时间和剂量依赖性抑制K562细胞,5 μmol/L17-AAG作用24 h,K562细胞增殖抑制率接近50%,阻断细胞周期于G0/G1期.5μmol/L 17-AAG作用12 h G0/G1期细胞占47.22%;24 h占71.62%,并出现明显的凋亡峰.17-AAG可有效清除Hsp90底物蛋白,阻断Raf/MekErk及PI3K/Akt信号通路.结论 17-AAG通过抑制K562细胞中Hsp90的分子伴侣功能,清除其底物蛋白Bcr-Abl、Raf-1、Akt、Cdk4、XIAP、survivin等,导致细胞内与增殖和抗凋亡相关的Raf/Mek-Erk、PI3K/Akt信号通路被阻断,从而抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡.
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骨髓间充质干细胞诱导成骨细胞模拟造血龛支持造血干/祖细胞增殖
目的 探讨骨髓间充质干细胞(MSC)诱导的成骨细胞复合人源生物衍生骨,构建三维培养体系,观察模拟的造血龛(hematopietic niche)对脐血CD34+造血干/祖细胞(HSPC)增殖的支持作用.方法 分选人骨髓MSC及胎儿颅骨成骨细胞,将培养3代的MSC定向诱导为成骨细胞,分别将①MSC、②颅骨成骨细胞、③MSC与成骨细胞混合物(比例为1∶2)及④MSC诱导的成骨细胞作为饲养细胞复合在人源生物衍生骨上,构建三维培养体系,同时用相应的饲养细胞层构建对应的二维培养体系.免疫磁珠分选脐血CD34+细胞,接种于各培养体系,无外源性细胞因子条件下进行培养.显微镜下观察各饲养细胞与人源生物衍生骨复合情况,通过流式细胞术、半固体细胞集落培养观察比较各培养体系支持HSPC的增殖能力.结果 倒置相差显微镜、扫描电子显微镜以及免疫荧光标记观察结果显示,已成功地将MSC、颅骨成骨细胞、MSC和成骨细胞混合物及MSC诱导的成骨细胞复合在人源生物衍生骨上,构建了造血干细胞三维培养体系.在无外源细胞因子作用下,脐血 HSPC培养2周造血祖细胞集落(CFU-C)与长期培养起始细胞(LTC-IC)分析,三维培养体系各组(①～④)CFU-C明显多于相应二维培养体系各组(①681.00±44.43比438.20±64.24;②729.80±37.72比536.60±35.31;③697.80±54.09比464.80+41.53;④740.20±47.66比513.40±65.56),P＜0.05,但三维培养体系各组间差异无统计学意义(P＞0.05).三维培养体系各组LTC-IC也明显高于相应二维培养体系(分别为①68.00±5.11比26.00±3.73;②93.00±6.12比38.60±4.93;③83.40±5.85比36.20±4.52;④126.00±11.89比59.40±4.25),P＜0.05,且三维培养体系中MSC诱导的成骨细胞组(④)LTC-IC明显多于其他各组.脐血HSPC培养5周,二维培养体系中饲养细胞层已逐渐崩解、脱落、死亡;而三维培养体系中饲养细胞层生长情况较好.三维体系各组CFU-C集落分析显示,MSC诱导的成骨细胞组(④)与其他三组间差异有统计学意义(①112.00±14.21;②186.17±24.80;③126.67±11.52;④257.00±28.78),P＜0.05.结论 骨髓MSC诱导分化的成骨细胞复合人源生物衍生骨构建的三维培养体系,对于脐血HSPC体外培养具有类似体内造血龛的支持作用,成骨细胞对造血干/祖细胞生存、增殖具有重要的调控作用.
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MGMT基因导入对真核细胞保护作用的实验研究
目的 克隆六氧甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)基冈并构建表达载体,导入真核细胞表达,研究MGMT对真核细胞保护作用.方法 利用RT-PCR克隆人肝细胞MGMT基因并重组构建真核表达载体.脂质体法导入K562细胞及人外周血单个核细胞(PBMNC),用实时定量PCR法检测目的基因的表达.MTT法检测转基因细胞对烷化剂耐药性的改变.结果 成功克隆人MGMT基凶,转染K562细胞和PBMNC后,转基因组MGMT mRNA表达水平分别是转染空载体组的13.4倍(P＜0.01)和4倍(P＜0.01).Western blot结果显示MGMT蛋白表达在转基因组中明显高于转空载体组及对照组.耐药性实验结果显示目的基因导入后,K562稳定转染细胞和PBMNC瞬时转染细胞对烷化剂的半数抑制浓度分别提高到原来的7倍和2倍.结论 MGMT基因导入可使真核细胞对烷化剂的耐药性得到不同程度的增强,从而对细胞起到保护作用.
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经粒细胞集落刺激因子动员的正常供者自发性脾破裂一例——附文献复习
目的 讨论异基因外周血造血干细胞移植过程中粒细胞集落刺激因子(G-CSF)的不良反应及其动员的正常供者的安全问题.方法 报道国内第1例经G-CSF动员的正常供者自发性脾破裂,并进行相关文献复习.结果 本文供者和3例文献报道的供者,在G-CSF动员后脾脏均增大并发生自发性脾破裂;1例文献报道的供者,在G-CSF动员后脾脏未增大,但也出现自发性脾破裂.结论 供者在G-CSF动员、采集过程中、采集后出现腹痛、头昏时应警惕脾破裂的发生.
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再生障碍性贫血患者Tim-3、IFN-γ及IL-4 mRNA的表达及其临床意义
目的 探讨Tim-3、IFN-γ和IL-4基因在再生障碍性贫血(AA)患者的表达水平及其临床意义.方法 通过实时定量RT-PCR检测48例AA、13例其他血细胞数下降患者和30名正常对照骨髓及外周血单个核细胞中的Tim-3 mRNA、IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA的表达水平(达到阈值所需相对循环数).结果 ①AA患者Tim-3 mRNA的表达水平(-6.05±1.90)明显高于正常对照(-1.26±1.75)(P＜0.01)和其他血细胞数下降患者(-1.85±1.76)(P＜0.01).②AA患者IFN-γ mRNA检测阳性率为30例(62.5%),正常对照组仅测到1例阳性(3.3%),其他血细胞数下降组阳性2例(15.0%).③Tim-3 mRNA、IFN-γmRNA在重症AA中的表达水平分别为-7.12±1.73和-6.94±1.75明显高于慢性AA(分别为-5.38±1.74和-5.03±2.21)(P值均＜0.05);AA未缓解组Tim-3mRNA和IFN-γ mRNA表达水平(分别为-6.38±1.75和-5.86±2.23)显著高于缓解组(分别为-2.02±1.86和-2.46±1.89)(P值均＜0.01);Tim-3 mRNA在骨髓和外周血中的表达水平(-6.12±1.94和-6.13±1.94)差异无统计学意义(P＞0.05),IFN-γ mRNA在骨髓的表达(-7.09±1.59)明显高于外周血中的表达(-5.16±2.02)(P＜0.05).④AA患者IL-4 mRNA表达阳性4例,其他血细胞数下降组2例,正常对照组0例.结论 Tim-3 mRNA在AA患者中的表达明显高于正常人群和其他血液病患者,并与疾病的严重程度相关.
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伴有t(3;5)(q25;q34)的骨髓增生异常综合征急性髓系白血病变患者的分子特征
目的 研究t(3;5)(q25;q34)的分子特征.方法 R显带染色体核型分析和染色体涂染分析确定t(3;5)(q25;q34)存在.RT-PCR法检测患者NPM-MLF1融合基因、MLF1基因表达.PCR联合序列分析检测NPM基因突变.实时定量RT-PCR(Real-time PCR)检测Evi-1,MDS1/Evi-1表达.免疫组化染色确定MLF1和NPM-MLF1蛋白细胞定位分布.Western blot法检测bcl-2蛋白表达.结果 染色体核型分析和涂染分析均证实存在染色体t(3;5)(q25;q34),NPM-MLF1融合基因阳性,经诱导治疗获得完全缓解后转为阴性.患者白血病细胞仅表达MLF1基因非编码蛋白剪接体,不表达Evi-1基因,弱表达MDS1/Evi-1.无NPM基因突变,未检出bcl-2蛋白表达.MLF1蛋白定位于细胞质,而NPM-MLF1则主要定位于胞核.结论 t(3;5)(q25;q34)是髓系肿瘤的一种少见的染色体易位,该染色体易位导致形成NPM-MLF1融合基因是其发病的分子学基础.
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K562/MDR细胞与树突细胞融合诱导P170蛋白特异的细胞毒性T淋巴细胞应答
目的 通过细胞融合方法将P170抗原负载树突细胞(DC),探讨能否有效诱导P170蛋白特异的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)应答.方法 通过贴壁黏附获得外周血单核细胞,用GM-CSF+IL-4诱导培养DC,并以TNF-α促进DC成熟,于第7天收获DC,然后分3组:①DC与耐药细胞系K562/MDR细胞融合以负载P170抗原;②DC与K562/MDR细胞共培养;③单独DC培养.通过流式细胞术(FCM)检测PE-P170/FITC-HLA-ABC抗体双标细胞来评估融合率.将3组细胞分别与T细胞共同孵育5 d,通过MTT法比较各组T细胞对P170+靶细胞K562/MDR及HL-60/VCR的杀伤活性.结果 采用PEG-DMSO诱导的DC与K562/MDR细胞的融合效率为(22.39±2.55)%,融合细胞同时表达DC表型和P170分子,HLA-ABC和P170双阳性表达率为(26.90±3.63)%,明显高于共培养组的(4.52±1.77)%,融合细胞能激活T淋巴细胞,显示出对P170+靶细胞产生抗原特异细胞毒作用,效靶比为25∶1时,对K562/MDR细胞的杀伤率为(65.75±4.65)%,明显高于共培养组[(22.15±2.40)%].结论 K562/MDR与DC融合能够诱导P170蛋白特异的CTL应答,可用于多药耐药白血病的免疫治疗.
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流感疫苗对急性髓系白血病患者骨髓细胞来源树突细胞功能的影响
树突细胞(DC)因其强大的抗原呈递功能,具有激活针对肿瘤抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)的作用,已成为白血病及肿瘤生物治疗的重要研究领域.白血病细胞来源的DC携带有自体已知或未知的多个肿瘤抗原,在HLA限制性和肿瘤特异性上具有独特的优势.
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母体内微量子代细胞嵌合体在HLA半相合造血干细胞移植中的意义
HLA不全相合的血缘关系移植解决了异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)的供者来源,但供受体间的HLA差异屏障限制了其广泛应用.近年来发现在妊娠结束后,部分母亲体内可以检测到长期存在的微量子代细胞(FMC).
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人类ERMAP基因在不同胎龄胚胎组织中的表达
人类ERMAP(human erythroid membrane associated protein,hERMAP)基因是从人胎肝cDNA文库中筛选出来的新基因.通过Northern blot检测,提示其高度特异表达于胎肝、成人骨髓等造血组织以及K562细胞;通过荧光蛋白转染试验证实其定位于293T细胞膜和其他胞质小体上;通过对其所编码的蛋白分子的分析显示其为一跨膜蛋白分子,属免疫球蛋白超家族成员.
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脐血红细胞生成素与红细胞免疫功能的关系
为了探讨胎儿脐血及成人外周血中红细胞生成素(EPO)对红细胞在体外的支持作用,我们对脐血与成人外周血的EPO及红细胞免疫功能进行对比研究,为临床脐血移植及脐血红细胞的输注提供依据.
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磷脂酰肌醇聚糖A类基因逆转录病毒载体的构建及表达
阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)是一种获得性良性克隆性造血干细胞疾病,研究发现PNH患者体内存在磷脂酰肌醇聚糖A类(PIG-A)基因异常,导致患者血细胞表而糖基磷脂酰肌醇锚蛋白(GPI-AP)缺乏,临床上出现血管内溶血等一系列表现.
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慢性特发性骨髓纤维化伴椎管内髓外造血一例
患者,男,65岁,因腹部不适、黏膜潮红2个月于2005年3月8日入我院血液科.查体:颜面皮肤潮红,腹部饱满,无明显压痛及反跳痛,脾大,甲乙线9 cm,甲丙线12 em,丁戊线+1 cm,腹部移动性浊音阴性.
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内皮前体细胞研究进展及其应用
内皮前体细胞(EPC)是一类能分化成为血管内皮细胞(EC)的干细胞,包括成血-血管干细胞和内皮干/祖细胞.由于内皮前体细胞在人体内骨髓、外周血、脐血中均可获得,自体来源无免疫排斥,参与出生后血管发生,能在体外扩增并进行基因修饰等特点,在组织工程、血管新生与疾病治疗中有广泛的用途,现就其来源、表面标志、出生后体内分布与获得、生理病理意义和临床应用研究作一综述.
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中华医学会第九次全国血液学学术会议纪要
中华医学会第九次全国血液学学术会议于2006年10月20至22日在江苏省南京市召开.会议由中华医学会、中华医学会血液学分会主办,江苏省医学会承办,江苏省血液研究所、南京医科大学第一附属医院、东南大学附属中大医院协办.
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| 2019 | 02 |
| 2018 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
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| 2016 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2015 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2014 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2013 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2012 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2011 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2010 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2009 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2008 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 z1 |
| 2007 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2006 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2005 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2004 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2003 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2002 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2001 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 2000 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1999 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1998 | 01 02 03 04 05 06 07 08 09 10 11 12 |
| 1997 | 02 |
