siRNA沉默Annexin Ⅱ对淋巴瘤细胞系Jurkat细胞增殖和趋化能力的影响

目的 观察沉默Annexin Ⅱ(AnxA2)基因对淋巴瘤细胞系Jurkat细胞增殖、趋化能力的影响.方法 应用实时荧光定量RT-PCR和流式细胞术鉴定小干扰RNA(siRNA)对人淋巴瘤细胞系Jurkat细胞的转染效果,应用MTT法检测AnxA2 siRNA对Jurkat细胞增殖的作用,应用Transwell检测对细胞趋化能力的影响.结果 AnxA2 siRNA干扰组在24、48、72 h细胞生长抑制率分别为(17.4±2.3)%、(22.4±3.8)%和(37.6±1.5)%,与阴性对照组[分别为(-1.3±5.1)%、(-5.5±4.4)%和(-10.8±5.5)%]比较差异有统计学意义(P<0.05),AnxA2 siRNA干扰对Jurkat细胞增殖起抑制作用;AnxA2 siRNA干扰组细胞趋化能力(11.3±4.2)显著低于阴性对照组(54.3±8.7,P<0.01),AnxA2 siRNA干扰可显著降低细胞趋化能力.结论 siRNA沉默AnxA2基因可抑制Jurkat细胞增殖、趋化能力.

骨髓侵犯和不同治疗方案对弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后的影响

目的 探讨骨髓侵犯和不同治疗方案对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)患者预后的影响.方法 回顾性分析83例有、无骨髓侵犯DLBCL患者的不同I临床特点及预后影响因素,比较不同治疗方案对DLBCL的疗效.结果 有骨髓侵犯者LDH升高、ECOG评分≥2分、IPI和aaIPI评分为中/高危、B症状、肝脾肿大、血红蛋白减少、血小板减少、白蛋白降低较无骨髓侵犯者多见,多因素分析显示骨髓侵犯为独立不良预后闪素.全组患者3年总生存(0S)和无进展生存(PFS)率在利妥昔单抗联合化疗组(单抗组)分别为78.1%和64.3%,增强化疔组为33.3%和25.7%,CHOP组为23.6%和21.8%,单抗组显著高于增强化疗组(P值均为0.002)和CHOP组(P值均为0.000),增强化疗组和CHOP组间差异无统计学意义(P=0.411和P=0.694).有骨髓侵犯者中单抗组、增强化疗组和CHOP组的3年OS率分别为57.1%、29.5%和13.9%,3年PFS率分别为57.1%、16.8%和14.1%.单抗组均显著高于增强化疗组(P=0.029和P=0.012)和CHOP组(P值均为0.001),增强化疗组和CHOP组间亦差异无统计学意义(P=0.226和P=0.376).单抗组中无骨髓侵犯者3年0S率和PFS率分别为86.7%和67.3%,与有骨髓侵犯者的57.1%和57.1%比较差异无统计学意义(P=0.645和P=0.965).结论 骨髓侵犯是DLBCL的独立预后影响因素.利妥昔单抗联合化疗可显著提高DLBCL的疗效,并改善骨髓侵犯对DLBCL预后的不良影响.

ALL-2005方案治疗158例儿童急性淋巴细胞白血病诱导缓解期疗效评价及中期随访报告

目的 在保证有效治疗的同时,降低儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)诱导缓解期治疗风险.初步评价ALL-2005方案的临床疗效.方法 ALL-2005方案是在ALL-XH-99方案的基础上作出修改,结合患儿诱导治疗第35、55天骨髓微量残留病(MRD)检测结果 ,按低危、中危和高危分组,分别予以不同强度的化疗.统计2005年5月1日至2007年4月31日初发ALL患儿158例,分析其诱导缓解率、诱导治疗相关并发症、诱导治疗第35天、55天MRD水平及随访结果 .结果 根据分组标准,158例患儿中低危组59例,中危组93例,高危组6例.35 d诱导缓解率为98.1%.139例(88.0%)患者可找到MRD检测标志,诱导治疗第35天时137例患儿中94例MRD≤0.01%,占68.6%.43例(27.2%)患儿诱导期出现发热等感染征象;合并重症感染进入ICU 2例(1.3%).诱导期因合并症死亡1例(0.6%).4例在治疗缓解状态下失访,失访率2.5%.全组复发17例,占10.8%,危组4例,中危组11例,高危组2例.诱导治疗第35天MRD≤0.01%组复发者占4.3%(94例中4例),MRD>0.01%组复发者占23.3%(43例中10例),两组间差异有统计学意义(P:0.003).至2008年3月31日,中位随访时间为20(12～35)个月.预计30个月总体无病生存率为(81.6±4.5)%,低危组为(94.1±3.3)%.中危组为(82.8±4.4)%;诱导治疗第35天MRD≤0.01%组无病生存率为(91.0±5.4)%,>0.01%组为(67.1±9.5)%;第55天MRD≤0.01%组为(89.1±5.3)%,>0.01%组为(46.9±15.6)%.结论 ALL-2005方案诱导治疗期患儿的感染率和治疗相关死亡率低,诱导缓解率和无病生存率均较高.诱导治疗第35天和第55天MRD水平对患儿预后有影响.

16例伴19p13异常急性淋巴细胞白血病患者的临床和实验室研究

目的 分析伴19p13异常的急性淋巴细胞白血病(ALL)患者的临床和实验室特征:方法 对16例伴19p13异常的ALL患者的细胞形态学、免疫学、细胞遗传学和临床特点进行回顾性分析,并对t(1;19)组和der(19)组的临床和实验室资料进行对比分析.结果 伴19p13异常的ALL占同期ALL的4.02%,其中t(1;19)(q23;p13)15例[平衡易位t(1;19)(q23;p13)8例,不平衡易位der(19)t(1;19)(q23;p13)7例],t(17;19)(q22;p13)1例,t(1;19)组的外周血门细胞汁数和骨髓原始幼稚淋巴细胞比例明显高于der(19)组,而der(19)组的预后较t(1;19)组好.结论 19p13异常是ALL的一个非随机的染色体改变;伴有该异常的ALL患者具有独特的I临床特征和小良预后.

野生型p53基因对K562细胞中心体数量和蛋白的影响

目的 研究重组腺病毒介导的野生型p53基因(Ad5wtp53)对人慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞系中心体数量和中心体蛋白表达的影响.探讨应用重组腺病毒p53基因对CML进行基因治疗的可行性.方法 分别将含有野生型p53基因、突变型p53基因和绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒表达载体(AdSwtp53、Ad5mtp53和Ad5GFP)反复扩增,联合多聚季胺共同感染K562细胞.观察感染效率.MTT法确定适重组腺病毒感染滴度和感染时间.然后用RT-PCR和Western blot检测p53 mRNA和蛋白的表达.后应用间接免疫荧光染色法对中心体γ-微管蛋白和纺锤体α-微管蛋白同时进行标记,在激光共聚焦显微镜下观察中心体γ-微管蛋白的表达和有丝分裂,并对中心体进行计数.结果 多聚季胺可显著提高腺病毒载体对K562细胞的感染效率.多聚季胺的剂量选择为4μg/ml;感染K562细胞的适腺病毒滴度为20 000 MOI,感染时间为72 h;Ad5wtp53和AdSmtp53转染的K562细胞均可表达p53 mRNA和蛋白.Ad5wtp53感染K562细胞后,中心体数量减少,γ-微管蛋白的表达降低.结论 重组腺病毒介导的野生型p53基因能够在白血病K562细胞中持续表达;野生型P53蛋白能够降低K562细胞中心体数量及中心体γ-微管蛋白的表达.

135例骨髓增殖性肿瘤患者JAK2基因突变的定量研究

目的 研究JAK2基因突变在骨髓增殖性肿瘤(MPN)中的发生率和突变类型.并对突变转录本水平进行定量分析,初步探讨其临床意义.方法 采用突变序列扩增系统PCR(ARMS-PCR)法检测JAK2突变的发生率及其突变类型;采用毛细管电泳法定量分析JAK2突变转录本水平.结果 135例MPN患者共检出95例JAK2V617F阳性,总阳性率为70.4%;真性红细胞增多症(PV)患者JAK2V617F突变发生率为97.4%,原发性血小板增多症(ET)为59.6%,3例特发性骨髓纤维化(IMF)中2例阳性;95例突变患者中纯合突变36例,杂合突变59例,其中PV患者纯合突变发生率为47.3%,高于ET患者的18.1%(P<0.05).纯合突变者其JAK2V617F突变转录本水平高于杂合突变者(P<0.05),杂合型PV患者的JAK2V617F突变转录本水平高于杂合型ET患者(P<0.05);JAK2V617F突变高表达组(转录本水平为70%～100%)的平均年龄高于低表达组(转录本水平为47.3%～70.0%),且两者年龄均较JAK2V617F阴性组为高(P<0.05);年龄<60岁者其JAK2V617F转录本水平低于≥60岁者(P<0.001);PV患者中,JAK2V617F高表达组其白细胞计数高于低表达组(P<0.001),ET患者中,JAK2V617F高表达组其白细胞计数高于低表达组(P<0.05),且二者均较阴性组为高(P<0.05),血红蛋白水平在高表达组与低表达组间差异无统计学意义(P>0.05),但二者均较阴性组为高(P<0.05).101例患者进行了染色体检查,未发现核型异常与JAK2V617F突变之间存在相关性.结论 ARMS-PCR可作为检测JAK2V617F突变较灵敏的方法 ,结合毛细管电泳可用于此突变的定量分析以及临床MPN的诊断和微量残留病的检测.

倒位PCR技术在血友病A基因诊断中的应用及改进

目的 对倒位PCR(I-PCR)技术进行改进并应用于血友病A凝血因子Ⅷ(FⅧ)基因倒位突变的检测,探讨其产前诊断价值.方法 选取了8个无血缘关系的血友病A家系,应片j已改进的I-PCR技术直接检测FVS基因第22内含子倒位.对2名孕妇分别于妊娠22及26周抽取胎儿脐静脉血,在检测脐血血浆FⅧ活性的同时应用I-PCR技术进行产前FⅧ基因突变检测.结果 8个家系中检出4个家系为FⅧ基因倒位;根据FⅧ活性及基因突变检测结果 ,2名胎儿均诊断为正常胎儿.1名已出生.经随访与产前诊断结果 相符合.结论 应用I-PCR技术可以快速有效地进行血友病A FⅧ基因倒位突变的检测并可作为产前诊断的辅助手段.

成人Ph染色体和(或)bcr-abl阳性急性淋巴细胞白血病患者细胞遗传学及预后分析

目的 分析成人Ph染色体和(或)bc-abl阳性(Ph+/bor-abl+)急性淋巴细胞白血病(ALL)患者细胞遗传学改,变的特点,探讨其对预后的影响.方法 回顾性分析1996年1月至2007年12月就诊并行染色体检杏的100例成人Ph+/bcr-abl+ALL.患者的临床资料,总结其染色体畸变的类型、分布和频牢特点,并进行分组研究,探讨不同组之间的临床特点及预后差异.结果 ①72例检出染色体异常,22例为单纯Ph染色体阳性或其变异型,44例Ph阳性伴附加染色体异常,常见的异常有+Ph、-7、+21、-20、+8、9p-、del(22)等.②染色体数目分组比较:假二倍体组和高二倍体组初诊时白细胞计数明显高于正常核型组,而正常核型组总生存(OS)率较业二倍体和假二倍体组高,无复发生存(RFS)期较亚二倍体和假二倍体组长.③染色体畸变类型分组比较:Ph阳性组初诊时白细胞计数明显高于Ph阴性组,而OS率较Ph阴性组低,RFS期较Ph阴性组短;单纯Ph阳性组与Ph阳性伴附加染色体异常组在临床特征、OS率和RFS期间的差异均无统计学意义.同时Ph阳性伴附加染色体异常组的OS期和RFS期也明显短于Ph阴性组.④核型分组比较:全部核型正常组(NN)患者较正常与异常核型共存组(AN)年龄轻,初诊时白细胞计数低,融合基因表达以P190为主,髓系抗原表达率高,RFS率和OS率高;NN组较全部核型异常组(AA)初诊时白细胞计数低,髓外浸润重,RFS率和OS率高.而AA与AN组之间各项差异均无统计学意义.⑤双Ph染色体组融合基因P190比例低于非双Ph染色体组,OS期短于非双Ph染色体组.结论 成人Ph+/bcr-abl+ALL患者染色体改变复杂,假二倍体和高二倍体提示预后不良,双Ph染色体可能提示预后不良.

14143名育龄人群β-地中海贫血检查结果分析

地中海贫血(简称地贫)是广东地区的高发遗传病.其发病机制是由于珠蛋白肽链合成障碍.造成肽链数量的不平衡而导致溶血性贫血.

K562细胞药物诱导性耐药的机制探讨

在白血病细胞多药耐药(MDR)产生机制的研究中,mdr1基因编码的P精蛋白(P-gp)高表达是研究深入的机制之一.阿霉素是临床常用的化疗药物之一,属蒽环类,抗瘤谱广,它能抑制DNA和RNA的合成,属周期非特异性药物.临床工作中,化疗药物诱导的肿瘤细胞耐药时常发生,我们以阿霉素作用于人白血病细胞系K562细胞.观察阿霉素诱导细胞耐药产生的规律,初步探讨耐药形成的机制.

CHOP序贯DICE方案与标准CHOP方案治疗高危弥漫大B细胞淋巴瘤的随机对照研究

弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是临床上常见的中度恶性淋巴瘤.虽然CHOP(环磷酰胺、长春新碱、泼尼松、阿霉素)方案一直被认为是标准的一线方案,但是对于lPI评分>3分的患者远期疗效较差,复发率高[1].近年来有研究报道DICE(地塞米松、异环磷酰胺、顺铂、足叶乙甙)方案对于中、高度恶性淋巴瘤有较好的疗效[2],2001年7月至2004年3月我们采用CHOP序贯DICE方案治疗IPI评分>3的DLBCL患者,并同标准的CHOP方案进行比较,以期找到对晚期高危DLBCL赢者可为右特的治疗方法.

骨髓增生异常综合征病态造血细胞克隆起源的FISH研究

40%～70%的骨髓增生异常综合征(MDS)患者可以检出再现性克隆性染色体异常,其中以5q-/-5,7q-/-7,+8.20q-和-Y等为常见.骨髓细胞病态造血现象是MDS形态学的一个重要特征;染色体异常则是MDS恶性克隆的标志,二者均是诊断MDS的重婴依据.然而.病态造血改变究竟是恶性克隆本身的表现还是正常造血细胞对恶性克隆的一种反应,目前仍有争议.为明确MDS中病态造血细胞的克降起源问题,我们采用骨髓形态学检测结合问期荧光原位杂交技术(FISH)方法对8例伴有克隆性核型异常的MDS病例进行了研究.

绒毛状淋巴细胞的脾边缘区B细胞淋巴瘤一例

患者,女,33岁.因发热、乏力、左上腹疼痛40 d于2007年11月13日入院.原有慢性乙型肝炎病史10年.入院前曾在上海瑞金医院进行骨髓检查,骨髓象:骨髓增生明显活跃,粒红比略下降.粒、红、巨三系细胞增生活跃,粒、巨二系细胞伴成熟障碍,血小板散在少见.结合病史考虑脾功能亢进.

异基因造血干细胞移植治疗难治复发NK/T细胞淋巴瘤一例

患者,女,31岁.于2004年11月开始反复感冒,伴低热、鼻塞,检查发现鼻腔上端息肉,行鼻腔息肉切除术.病理检查结果示新鲜组织被鳞状上皮覆盖,溃疡形成.间质水肿,明显坏死.

同胞姐弟先后患再生障碍性贫血

例1,男,12岁,因面黄、鼻出血伴发热1周于1994年5月17 日入住我院.查体:贫血貌,双下肢散在出血点和瘀斑.浅表淋巴结不大,心、肺未见明显异常,肝脾肋缘下未触及,无躯体畸形.血常规:Hb 49g/L,WBC 1.7 × 109/L,中性粒细胞0.04×109/L,BPC 11 × 109/L,网织红细胞(Ret)0.0043.髂骨骨髓象:未见骨髓小粒,油滴(+ + +),增生重度减低,粒系、红系增生减低,巨核细胞1个/片,淋巴细胞、浆细胞相对增多,形态大致正常.胸骨骨髓象大致同髂骨.

CXCL12/CXCR4轴与微环境的相互作用及其在白血病治疗中的应用

间叶组织来源的基质细胞是骨髓微环境的主要调控细胞.其分泌的基质细胞衍生因子-1(CXCLl2/SDF-1),通过相应受体CXCR4对白血病的进展发生着直接或间接的影响.临床前实验已证实CXCR4的拮抗剂可控制白血病细胞的耐药、转移及复发.所以阻断CXC L12/CXCR4轴与白血病细胞之间的相互作用以应对白血病的微量残留病(MRD)从而预防其复发及预防、治疗髓外器官浸润有重要的意义.

骨髓增生异常综合征预后积分系统研究进展

骨髓增生异常综合征(MDS)是一组恶性克隆性干/祖细胞性疾病,其主要特征为无效造血所致的难治性血细胞减少和易于发展为急性白血病.

八例成人骨髓增生异常/骨髓增殖性疾病不能分类临床分析

为了更好地定义疾病实体,2001年WHO修改了造血和淋巴系统肿瘤的分类标准.定义了一种新的类型,即骨髓增生异常/骨髓增殖性疾病(MDS/MPD).其兼有MDS和MPD的临床和主要血液学特点,即一系或多系髓系细胞具有MDS的无效造血和病态造血,外周血出现该系血细胞减少,又具有另一系或多系髓系细胞出现MPD的有效增殖,引起外周血该系血细胞增多.MDS/MPD包括四种独立的疾病:慢性粒.单核细胞白血病(CMML)、不典型慢性粒细胞白血病(aCML)、幼年型粒.单核细胞自血病(JMML)和MDS/MPD不能分类(MDS/MPD-U)[1].

少量造血细胞RNA提取方法学探讨

骨髓中的造血细胞是一个包括了从多能造血干细胞至成熟细胞不同分化阶段及粒系、淋系等不同分化系列的复杂群体.为了解不同细胞群体各种基因的表达情况,需要采用流式细胞术或磁珠分选出特定的细胞群,再进行RNA提取、PCR等过程.不过造血干/祖细胞等细胞群往往数目不多.而'TRIzol等常规RNA提取方法要求细胞数应该在105以上,因此需要采用特殊的少量细胞RNA提取方法.我们将对两种少量细胞RNA提取方法作一比较.

第三届全国深部真菌感染学术会议纪要

由中华医学会血液学分会、感染学分会和呼吸病学分会共同主办,北京大学血液病研究所和中南大学湘稚医院承办的第三届全同深部真菌感染学术会议于2009年3月26日至29日在湖南省长沙市隆重召开.中华医学会会长钟南山院士特意为大会录影致词,中华医学会血液学分会主任委员阮长耿院十也为大会发来贺信.

欢迎投稿