Raf蛋白激酶与肿瘤治疗相关研究的现状

目的:讨论Raf蛋白激酶在肿瘤治疗中的作用.方法:使用PubMed和万方数据库检索,以Raf激酶、抗肿瘤为关键词检索出82篇文章,以与ERK通路、BAY 43-9006、ISIS 5132、LErafAON和MCP1具有相关性的和2006、2007年内发表的为限制筛选25篇文章,以这些文章为基础并扩展文章的参考文献进行讨论.结果:多种拮抗Raf激酶的生物分子的临床研究已深入到不同的阶段,并且得到了较大的进展,其中包括Raf激酶抑制剂-BAY 43-9006,反义寡核苷酸ISIS5132、LErafAON、Raf去稳定剂-格尔德霉素以及Ras-Raf 的衔接抑制物-MCP1.结论:对于不同部位的肿瘤治疗,Raf激酶可作为单独的攻击靶点或者与传统的化疗方案相结合,而且这两种方式都产生了较有效的作用.

肿瘤基因治疗的研究进展

目的:综述分析国内外肿瘤基因治疗研究现状的文献,为基础与临床研究提供研究方向、思路和资料.方法:应用MEDLINE、CA、CBMdisc、CMCC、CJFD和CSTPCD等数据检索系统及数据库,以"肿瘤基因治疗"等为关键词,检索1998-01～2007-06与肿瘤基因治疗相关的文献.纳入标准:1)肿瘤基因治疗的动物及临床试验研究,包括方法、效果及进展;2)肿瘤基因治疗与其他生物疗法疗效、不良反应及优缺点的比较.根据纳入标准,粗选143篇文献,后17篇文献纳入综述分析.结果:基因治疗作为肿瘤治疗的新手段是随着DNA重组技术的成熟而发展起来的,是以改变遗传物质为基础的生物医疗技术,它通过将正常基因或有治疗作用的基因导入靶细胞来纠正突变或有缺陷的基因,以达治疗目的.基因沉默疗法、自杀基因疗法、免疫基因疗法、基因替代疗法、反义基因疗法、多药耐药相关基因治疗、抗肿瘤新生血管治疗和抗端粒酶治疗等均取得显著进展.结论:不同的肿瘤基因治疗方法各有利弊,随着治疗方法与病毒载体的不断改造和完善,基因的转移率、靶向性与安全性不断提高.

吉西他滨联合卡培他滨治疗耐药转移性乳腺癌56例临床分析

为了评估吉西他滨(GEM)和卡培他滨(CAP)3周联合化疗方案在蒽环类和(或)紫杉类耐药的转移性乳腺癌(MBC)患者中的有效性和毒性 ,对56例既往用过蒽环类和紫杉类的MBC患者给予GEM 1 000 mg/m2,静脉滴入30 min,d1、d8;CAP 2 000 mg/m2,分2次口服,d1～d14,每3周为1个周期.所有患者均评估毒性,至少用过2个周期的患者评估疗效.结果:56例患者共完成196个周期化疗,中位化疗周期数为3.5个周期.完全缓解4例,部分缓解22例,稳定18例,进展12例,有效率为46.4%(26/56).常见的毒副反应为骨髓抑制和手足综合征.初步研究结果提示,GEM和CAP联合化疗方案在既往接受过蒽环类和紫杉类药物的MBC患者中是安全有效的,血液学和非血液学毒性都可耐受.

肺癌放疗所致放射性肺损伤的相关因素分析

目的:分析肺癌三维适形放疗中与放射性肺损伤相关的各种因素,并探讨预测价值.方法: 对70例接受三维适形放疗的非小细胞肺癌患者根据是否发生放射性肺损伤进行回顾性对照研究,将放射性肺损伤相关临床因素大致分为患者一般情况与系统病变、肿瘤自身因素、放疗除外其他治疗和放疗相关因素4类,并进行单因素和多因素分析.结果:单因素分析显示:仅大体肿瘤体积(P=0.009)和部分剂量体积参数如患者平均肺受量(P=0.017)、患肺V20(P=0.036)和全肺平均肺受量(P=0.034)对放射性肺损伤有显著影响,而其他因素影响不显著.多因素分析显示:剂量体积参数中仅平均肺受量(P=0.019)为放射性肺损伤独立相关因素.结论:参考剂量体积参数和大体肿瘤体积有助于预测放射性肺损伤的发生.

艾易舒注射液治疗老年非小细胞肺癌的临床观察

化疗是治疗晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的主要手段之一,临床常用化疗药物绝大多数属于免疫抑制剂,在杀伤癌细胞的同时,也抑制了机体的骨髓功能和免疫功能,从而进一步降低机体的免疫功能,影响机体的主动抗肿瘤能力.本研究探讨艾易舒在老年人NSCLC旳疗效与安全性.

塞来昔布对SK-N-SH细胞增殖和凋亡影响的研究

目的:探讨特异性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂塞来昔布(celecoxib)对人神经母细胞瘤细胞系SK-N-SH细胞生长的影响及其分子生物学作用机制.方法:不同浓度塞来昔布(12.5、25、50和75 μmol/L)用不同时间(24、48和72 h)处理SK-N-SH细胞,MTT法检测细胞增殖,DNA ladder法及AO/EB染色法分析细胞凋亡,Western blot检测COX-2、Bcl-2蛋白表达.结果:MTT法显示,12.5、25、50和75 μmol/L组在3个时间点对细胞的抑制率分别为(7.38±1.12)%、(10.33±1.97)%和(25.16±5.58)%;(34.46±6.76)%、(30.12±6.71)%和(57.54±3.06)%;(61.85±4.01)%、(50.78±2.85)%和(85.67±2.17)%;(83.85±5.56)%、(90.06±5.71)%和(98.04±4.43)%.组间差异均有统计学意义,P<0.05.结论:塞来昔布抑制SK-N-SH细胞的生长并诱导其凋亡,其机制除了抑制COX-2外还可能与抑制Bcl-2有关,有一定的临床应用价值.

雷公藤甲素诱导人肺腺癌A549细胞凋亡机制的研究

目的:探讨雷公藤甲素(TP)诱导肺腺癌A549细胞凋亡的机制.方法: 体外细胞培养,待细胞处于对数生长期时加入4.0 μg/mL TP处理24和48 h;Western blot检测Survivin、Bcl-2和Fas蛋白质表达;Caspase检测试剂检测Caspase-3和Caspase-9活性.结果:4.0 μg/mL TP呈时间依赖性降低Survivin和Bcl-2的表达(与对照组比较P<0.05),升高Fas的表达(与对照组比较P<0.05),TP作用后Caspase-3和Caspase-9活性增强,作用24、48 h后Caspase-3活性分别为1.32±0.07和1.46±0.03,Caspase-9活性分别为2.36±0.06和2.41±0.03,与对照组比较,P<0.01.结论: 降低Survivin和Bcl-2表达,促进Fas表达可能是TP诱导A549细胞凋亡的机制之一.

BTG2基因对胃癌细胞系生物学特性影响的研究

目的:初步探讨细胞增殖抑制基因BTG2对于胃癌细胞生长、增殖状态、细胞周期和凋亡状态等生物学特性及成瘤、侵袭转移能力等恶性表型的影响.方法:将BTG2基因插入载体PCDNA3.1构建PC-BTG2真核表达载体.以脂质体介导转染MKN45胃癌细胞,经G418压力筛选法筛出稳定表达的阳性克隆,经流式细胞仪、生长曲线法、平板克隆形成和细胞迁徙等实验分析稳定表达株相关生物学特性变化,每种检测实验均设立PC-BTG2稳定转染细胞组、PCDNA3.1稳定转染细胞组和空白MKN45细胞组.结果:与转染PCDNA3.1空载体及空白MKN45胃癌细胞相比:1)转染PC-BTG2载体的稳定表达细胞株生长速度提高,开始计数后第3、4、5、6和7天PC-BTG2转染组平均细胞计数均显著低于其他两组,F=350.83,P＜0.05;2)细胞周期检测显示,PC-BTG2转染组G0～G1期比例显著高于其他两组,F=18.70,P＜0.05,而G2～M(F=35.36)、S期(F=20.94)比例显著低于其他两组,P＜0.05;3)细胞凋亡检测显示,PC-BTG2转染组凋亡比例显著高于其他两组,F=37.34,P＜0.05;4)平板克隆形成实验结果显示,PC-BTG2转染组平均克隆形成率显著低于其他两组,F=54.3,P＜0.05;5)细胞迁徙实验结果提示,PC-BTG2转染组穿膜率显著低于其他两组,F=46.1,P＜0.05.结论:BTG2基因有较显著的抑制细胞生长增殖作用,同时可影响细胞周期,减少分裂期细胞,促进细胞凋亡,并具有降低肿瘤细胞侵袭转移能力的作用.

放射性肺损伤形成过程中一氧化氮与转化生长因子-β1的协同作用研究

目的:观察一氧化氮(NO)与转化生长因子-β1(TGF-β1)在放射性肺损伤形成过程中的协同作用.方法:实验兔分为对照组和L-NAME组,采用6 MV X线对左全肺进行照射, 25 Gy,1次.将2组动物再各自随机分为3组,分别于照射后1、3和6个月各自处死一组动物,照射前及处死前进行双肺血流同位素扫描及左肺肺泡灌洗.进行灌洗液NO及TGF-β1测定及肺组织病理分期.结果:在照射后1个月,对照组及L-NAME组的NO含量分别为(0.48±0.26)和(0.30±0.11) μmol/L,均明显高于放疗前水平,L-NAME组的升高幅度低于对照组.在照射后1、3和6个月,对照组的TGF-β1含量分别为(0.58±0.15)、(0.30±0.10)和(0.59±0.28) ng/mL,均明显高于放疗前水平, L-NAME组TGF-β1的升高幅度低于对照组.放疗后肺血流呈持续下降趋势.对照组放射性肺炎发生率(5/5)高于L-NAME组(2/5).结论:NO在放疗早期的明显升高放疗后肺血流的持续下降是放射性肺损伤的发病机制之一;NO与TGF-β1在放射性肺损伤的形成过程中具有协同作用.

顺维甲酸体外诱导肺腺癌细胞A549凋亡的研究

目的:探讨9-顺维甲酸(9-cis-RA)对人肺腺癌细胞A549的诱导凋亡作用.方法:体外培养肺腺癌细胞株A549,用MTT法观察9-cis-RA对细胞的生长抑制作用,采用电镜、流式细胞仪等方法检测9-cis-RA对细胞的诱导凋亡作用.结果:9-cis-RA对A549细胞有生长抑制效应,抑制率随着9-cis-RA浓度、作用时间的增加而增加.9-cis-RA明显诱导A549细胞的凋亡,可观察到凋亡小体和凋亡峰,药物作用48 h后,9-cis-RA浓度为5、10 μmol/L的细胞凋亡率分别为7.2%和13.3%,细胞凋亡率呈现量效关系.结论:9-cis-RA可能通过诱导肺癌细胞凋亡抑制肺癌细胞增殖,发挥其抗癌作用.

基因芯片技术筛选非小细胞肺癌A549细胞顺铂耐药相关基因的研究

目的:采用基因芯片技术筛选人非小细胞肺癌(NSCLC)耐顺铂(DDP)A549细胞与A549细胞之间的差异表达基因,为进一步研究其耐DDP相关分子机制提供资料.方法: 分别抽取耐DDP A549细胞与A549细胞的总RNA,采用逆转录的方法,制成cDNA链,并以2种荧光Cy5和Cy3标记后作为探针,与含有17 101条人类16KcDNA基因表达谱芯片进行杂交,扫描荧光强度,并用计算机进行分析,寻找两组差异表达基因.结果:在17 101条基因中,3株A549/DDP和3株A549细胞共同差异表达基因24条,其中上调基因12条,下调基因12条.结论: A549细胞发生DDP耐药过程中有多个基因参与, 两者共同差异表达的24条基因可能参与其耐DDP分子机制.

结直肠癌及淋巴结组织CEA mRNA表达的实时荧光定量检测

目的:建立检测CEA mRNA表达水平的实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-PCR)方法,并探讨结直肠癌及淋巴结组织中CEA mRNA表达的应用价值.方法:应用SYBR Green Ⅰ作为荧光染料,以GAPDH作为内对照,建立检测CEA mRNA的FQ-PCR方法,并对56例结直肠癌组织、淋巴结组织CEA mRNA的表达水平进行检测.结果:CEA mRNA在结直肠癌组织中均表达,但表达水平在不同病理分化程度(P＝0.866 1)及不同Duke分期(P＝0.298 6)中无明显变化;在检测的231个淋巴结中,共有137个淋巴结CEA mRNA表达为阳性,表达水平为18.31±36.85,其阳性表达率为59.3%(137/231),明显高于常规病理检测[29.4%(68/231)],χ2＝41.749 7,P＝0.000 1;CEA mRNA在Duke C+D期淋巴结中表达水平(32.85±53.49)显著高于Duke A+B期(6.54±14.57),P＝0.000 1.结论:FQ-PCR方法简便、特异和可靠;比常规病理检查更加敏感,可有效补充常规病理检查的不足,在预测肿瘤微转移方面具有重要的临床应用价值.

肺癌组织Survivin和CD105表达与预后关系的探讨

目的:探讨Survivin和CD105在肺癌组织中的表达与预后的关系.方法:应用免疫组化检测化疗组(35例)和非化疗组(35例)的肺癌患者中Survivin和CD105的表达水平,比较Survivin和CD105的表达与生存率的关系.结果:Survivin和CD105在肺癌组织中的阳性表达率分别为74.3%(52/70)和67.1%(47/70),两者呈正相关,χ2=0.525, P=0.000;化疗组Survivin和CD105不同表达的患者与非化疗组的中位生存时间(MST)差异有统计学意义,χ2=57.978, P=0.000;化疗组中Survivin和CD105表达阴性者生存时间明显长于阳性表达者.结论:Survivin与CD105在肺癌组织中表达是判断化疗疗效和预后的重要指标.

Twist基因检测对大肠癌临床病理诊断价值的探讨

目的:探讨转录调节因子Twist在大肠癌组织中的表达及其在临床病理诊断中的应用价值.方法:应用鼠抗人Twist单克隆抗体采用SP免疫组织化学方法检测112例大肠癌组织及40例正常肠黏膜组织中Twist的表达,并与临床病理指标进行比较.结果:在112例大肠癌组织中,Twist基因阳性表达78例(69.6%),正常组织中为15例(17.5%),两者比较差异有统计学意义,χ2=11.21,P=0.001;进一步结合临床病理资料分析,Twist在大肠癌组织中表达与肿瘤的分化程度(χ2=9.575,P=0.008)、肿瘤浸润(χ2=8.183,P=0.017)、淋巴结转移(χ2=4.05,P=0.044)和Duke分期(χ2=11.114,P=0.011)有关;而与患者年龄(P=0.286)、性别(P=0.887)无关.结论:Twist基因表达对大肠癌临床病理学诊断有明确的指导作用.

非小细胞肺癌组织COX-2和p53表达及其临床意义的研究

目的:探讨非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)组织中环氧化酶-2(cyclooxygenase-2, COX-2)和p53表达与病理特征和预后之间的关系.方法:将88例NSCLC及10例正常肺组织标本制作成组织芯片,应用免疫组织化学SP法检测COX-2和p53的表达,并与临床病理特征及长期生存率进行比较分析.结果:COX-2胞质和p53胞核阳性表达率分别为71.6%(63/88)和35.2%(31/88),而正常肺组织均为阴性.NSCLC患者的COX-2(χ2=20.045, P=0.000)和p53表达(χ2=5.153, P=0.028)均明显高于正常肺组织.COX-2和p53表达无相关性,P=0.694.COX-2在女性(χ2＝8.213,P=0.005)、不吸烟(χ2=5.086,P=0.027)、腺癌(χ2=12.137,P=0.001)、淋巴结转移阳性(χ2=9.475,P=0.003)和Ⅲ期(χ2=6.761,P=0.017)患者中表达升高,与年龄、分化程度和肿瘤大小无关.COX-2表达者生存时间短,χ2=5.986,P=0.014.p53表达与年龄等临床参数和生存期均无关,P均>0.05.多因素分析显示,COX-2和p53不是影响NSCLC预后的独立危险因素.结论:COX-2阳性表达者预后差,可能在预后判定中有重要作用.

肺癌生长抑素受体表达与其靶向显像的相关性研究

目的:探讨肺癌组织生长抑素受体(SSTR)表达水平与99Tcm-depreotide生长抑素受体显像对肿瘤的靶向诊断价值及两者的相关性.方法:46例肺癌患者(纤支镜或CT引导下穿刺确诊)静脉推注99Tcm-depreotide (740±60) MBq后4～6 h行平面及胸部断层SPECT显像,重建后获得发射-透射图像.勾画感兴趣区,计算肿瘤和对侧相应部位正常肺组织的放射性比值(T/N),所有病灶均经病理检查确诊.用SP法检测肿瘤组织SSTR的表达水平,对其表达水平与T/N比值进行相关性分析.结果:43例肺癌患者清晰显影,瘤组织有较高的局灶性放射性浓聚;3例显像阴性.6 h小细胞肺癌(SCLC)和非小细胞肺癌(NSCLC) 组T/N分别为1.948±0.282、1.280±0.160,SCLC 对99Tcm-depreotide 的摄取明显高于NSCLC,t=0.130, P<0. 05.免疫组化表明,肿瘤组织有SSTR表达,与肿瘤显像阳性者T/N比值呈正相关,r=0.853, P<0.01和r=0.615, P<0.05.结论:99Tcm-depreotide受体显像对肺肿瘤有很好的靶向诊断价值; 肺癌组织有SSTR表达.99Tcm-depreotide肿瘤摄取程度同SSTR表达水平正相关.

舒芬太尼和吗啡术后静脉自控镇痛对恶性骨肿瘤患者T淋巴细胞亚群影响的观察

目的:观察舒芬太尼和吗啡用于恶性骨肿瘤患者术后静脉自控镇痛对T淋巴细胞亚群的影响.方法: 32例ASAⅠ～Ⅱ级择期恶性骨肿瘤根治术患者,随机分为舒芬太尼组(Ⅰ组)和吗啡组(Ⅱ组),每组16例.术毕行舒芬太尼和吗啡自控静脉镇痛,于麻醉前、术毕和术后4、24及72 h测定各组T淋巴细胞亚群,并用VAS法评价两组的镇痛效果.结果: 与麻醉前比较,两组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+在术毕和术后4 h降低,但两组比较差异无统计学意义,P<0.05;术后24 hⅠ组恢复至术前水平,Ⅱ组上述指标仍较低,两组比较差异有统计学意义,P<0.05;术后72 h两组上述指标恢复至基础水平.两组镇痛效果相似.结论: 对用于恶性骨肿瘤根治术患者的术后镇痛,舒芬太尼对T淋巴细胞亚群的抑制比吗啡小,两者镇痛效果相似.

靶向EGFR的RNA干扰诱导非小细胞肺癌细胞A549凋亡的研究

目的:探讨短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)介导的靶向EGFR基因的RNA干扰(RNA interference, RNAi)对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC) 细胞A549的凋亡诱导作用.方法:构建靶向人EGFR基因的表达shRNA的质粒(pShEGFR),转染A549细胞,应用RT-PCR分析EGFR mRNA的表达情况,采用MTT法检测A549细胞的生长状况,通过流式细胞仪以及PI染色法进行细胞凋亡的定量检测和形态学分析.结果:pShEGFR转染组A549细胞中EGFR mRNA的表达水平,较转染同一载体连接无关序列的对照组(pShNEG组)、单纯脂质体组及PBS阴性对照组A549细胞均明显降低,F=425.640, P=0.000,其中较PBS阴性对照组细胞降低了74.5%.转染pShEGFR的A549细胞与3种不同对照组细胞相比,生长受到明显抑制,F=107.428, P=0.000,生长抑制率达54.9%,而转染pShNEG组和单纯脂质体组的A549细胞生长抑制率则分别为20%和3.1%.流式细胞仪检测结果显示,pShEGFR组细胞存在32.8%的凋亡率,PI荧光染色可见pShEGFR组细胞呈现出典型的凋亡形态学变化.结论:质粒介导的靶向人EGFR基因的pShEGFR能够有效地干扰NSCLC细胞系A549中EGFR基因的表达,进而抑制肿瘤细胞的生长,诱导肿瘤细胞的凋亡.

早期胃癌及癌前病变组织Survivin表达及其临床意义的研究

目的:探讨Survivin在早期胃癌及癌前病变组织中的表达和临床意义.方法:免疫组化SABC法检测Survivin基因蛋白在30例正常胃黏膜,20例不完全型大肠化生,93例轻、中、重度不典型增生,54例早期胃癌组织中的表达.结果:Survivin在正常胃黏膜不表达(0/30),在不完全型大肠化生的阳性表达率为5.00%(1/20);在轻、中、重度不典型增生的阳性率分别为6.25%(2/32)、8.57%(3/35)和65.73%(17/26),其中轻(χ2=31.152)、中(χ2=22.051)度不典型增生与重度不典型增生的差异有统计学意义,P<0.001;早期胃癌组织中Survivin阳性表达率为68.51%(37/54),与轻(χ2=31.435)、中(χ2=25.507)度不典型增生的差别有统计学意义(P<0.05),而与重度不典型增生的差异无统计学意义, χ2=0.116, P＞0.05.结论:Survivin基因在早期胃癌的发生过程中可能起重要作用,Survivin表达越高,早期胃癌的分化程度越低.

绝经前乳腺癌组织雌激素受体与血清雌激素水平相关性的初步探讨

目的:探讨绝经前乳腺癌雌激素受体(ER)表达与患者血清雌激素(E2)水平的关系.方法:使用全自动免疫分析仪化学发光分析法检测84例乳腺癌患者血清性激素6项(LH、FSH、PRL、E2、P和T)水平,免疫组化EnVision二步法检测乳腺癌ER表达状态.据ER检测的结果,分为阳性及阴性两组,对其对应的雌激素数值进行统计学分析.结果:在P临界值设定为0.05水平下,进行t检验,t=-1.599 12, P=0.113 64,两组样本中显现的E2水平差异无统计学意义.结论:绝经期前乳腺癌患者ER表达可能与雌激素水平无关.

胃黏膜癌前病变和胃癌组织相关癌基因和抑癌基因表达差异的研究

目的:探讨胃黏膜癌前病变与胃癌组织中Bcl-2、Bax、p16和p53蛋白的表达和意义.方法:用免疫组化法检测Bcl-2、Bax、 p16和p53产物在79例胃癌、23例胃黏膜不典型增生和21例肠上皮化生组织中的表达.结果:Bcl-2在胃癌和不典型增生组织中的阳性率分别为73.4%(58/79)和78.2%(18/23),差异无统计学意义,P＝0.273;但是显著高于肠上皮化生组织(38.1%,8/21),P＜0.01.Bax、 p16和p53在胃癌和不典型增生及肠上皮化生组织中的阳性率分别为41.8%(31/79)、69.6%(18/23)、80.9%(17/21)和45.6%(36/79)、65.2%(15/23)、76.1%(16/21)及82.3%(65/79)、39.1%(9/23)、28.6%(6/21),差异有统计学意义,P＜0.01.结论:Bcl-2 对胃黏膜细胞凋亡有明显的负性调节作用,而抑癌基因Bax 表达对Bcl-2 的抑制凋亡功能有对抗调节作用;p16基因直接参与细胞生长增殖的负调节,突变的p53基因通过抑制细胞凋亡而参与胃癌的发生.

<中华肿瘤防治杂志>稿约

非小细胞肺癌纵隔淋巴结清除的20年研究

半个多世纪以来,早期及部分局部晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)的手术治疗标准是完全性手术切除.尽管手术技巧和手术器械在不断进步,但其术后5年生存率一直徘徊在30%左右,即使是早期肺癌,手术后仍有部分患者出现局部复发和转移.