中华肿瘤防治杂志
Chinese Journal of Cancer Prevention and Treatment 중화종류방치잡지
- 主管单位： 齐鲁肿瘤杂志；肿瘤防治杂志；当代肿瘤学杂志
- 主办单位： 国家卫生和计划生育委员会
- 影响因子： 1.29
- 审稿时间： 1-3个月
- 国际刊号： 11-5456/R
- 国内刊号： 左文述
- 论文标题 期刊级别 审稿状态
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结直肠癌组织胸苷磷酸化酶表达临床意义研究的现状
目的:总结近年来关于胸苷磷酸化酶(TP)在结直肠癌组织中表达临床意义的研究现状.方法:应用PubMed、Elsevier Sciencedirect、CNKI及万方全文数据库检索系统,以胸苷磷酸化酶和结直肠癌为关键词,检索2005-01-2011-06发表的相关文献.纳入标准:1)TP在结直肠癌及转移组织中的表达及其促血管新生、抗细胞凋亡等生物学作用.2)TP与5-氟尿嘧啶(5-FU)前体类药物靶向治疗的关系.根据纳入标准分析文献29篇.结果:TP对于结直肠癌的影响是双重性的,其在肿瘤血管新生、转移、复发以及抗细胞凋亡等过程中均发挥重要作用,高表达TP的患者往往预后不良.另外,TP又在5-FU前体药物的化疗过程中起着关键作用,增加TP的表达很可能可以增强5-FU前体药物的化疗效果.结论:TP在结直肠癌组织中的表达对结直肠癌靶向治疗和预后有着非常重要的临床意义.
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胃癌和转移淋巴结组织ADAMTS1表达及其生物学意义的探讨
目的:探讨含(I)型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶( ADAMTS1)在胃癌及转移淋巴结组织中的表达,分析其与胃癌浸润深度、分化程度及淋巴结转移等临床病理学参数的关系.方法:免疫组化法检测72例成对胃癌组织、癌旁组织及胃周淋巴结组织标本ADAMTS1的表达,半定量评分系统评估染色,分析ADAMTS1表达与胃癌临床病理学参数的关系.结果:ADAMTS1在胃癌组织中弱阳性率、阳性率及强阳性率分别为37.5％(27/72)、4.2％(3/72)和1.4％(1/72),在癌旁组织中分别为58.3％(42/72)、25.0％(18/72)和11.1％(8/72),在转移淋巴结组织中分别为55.9％(33/59)、20.3％(12/59)和3.4％(2/59),在无转移淋巴结组织中分别为46.2％(6/13)、0(0/13)和0(0/13).胃癌组织ADAMTS1表达明显低于癌旁组织,z=-6.481,P＜0.000 1；转移淋巴结组织ADAMTS1表达明显高于胃癌组织(z=4.164,P＜0.000 1)和无转移淋巴结组织(z=2.130,P=0.033).ADAMTS1在有淋巴结转移的胃癌组织中表达明显高于无淋巴结转移的胃癌组织,z=2.045,P=0.041.结论:ADAMTS1在胃癌原发灶中呈现低表达,在转移淋巴结中呈现高表达.ADAMTS1在胃癌中表达与淋巴结转移有关,表明ADAMTS1基因表达在胃癌原发肿瘤生长及转移中可能存在不同的作用机制,可能与肿瘤微环境有关.
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胃癌组织Cystatin SN mRNA表达及其临床意义的探讨
目的:研究半胱氨酸蛋白酶抑制剂1 (Cystatin SN)在胃癌组织中的表达及临床意义.方法:荧光定量PCR方法检测40例胃癌组织和40例癌旁组织中Cystatin SN的表达.结果:胃癌组织中Cystatin SN mRNA的表达水平为5.370 0±3.034 5,相应的癌旁组织为1.705 0±0.738 8,癌组织显著高于癌旁组织,t=8.297,P=0.000.Cystatin SN的表达与肿瘤大小(t=-0.646,P=0.001)、淋巴转移(t=3.393,P=0.002)、TNM分期(t=-3.798,P=0.001)和浸润程度(t=4.904,P=0.000)相关,与肿瘤的分化程度、患者年龄和性别无关,P＞0.05.结论:Cystatin SN在胃癌组织中的高表达与胃癌的发生发展密切相关.
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食管鳞癌组织血管生成拟态和HIF-1α表达及其生物学意义的探讨
目的:探讨血管生成拟态(VM)和低氧诱导因子-1α(HIF-1α)在食管鳞癌组织中的表达及意义.方法:收集临床病理资料完整的食管鳞癌组织170例,进行PAS及CD34双重染色,观察食管鳞癌中是否存在VM;免疫组化SP法检测HIF-1α蛋白的表达,并计数微血管密度(MVD).结果:在食管鳞癌组织中VM和HIF-1α表达阳性率分别为12.4％(21/170)、64.1％(109/170),显著高于正常食管黏膜组织,P＜0.01.VM在低分化食管鳞癌组织中(25.9％)高于高-中分化组(9.8％),与TNM分期、淋巴结转移和MVD有关,P＜0.05.HIF-1α的表达也与TNM分期、淋巴结转移及MVD有关,P＜0.05；VM与HIF-1α蛋白表达相关,r=0.206,P＜0.05.结论:在食管鳞癌组织中存在VM,HIF-1α高表达可能促进VM.VM与HIF-1α高表达可能是食管鳞癌浸润、转移重要生物学标志.VM与HIF-1α联合检测对食管鳞癌的进展及预后判断有重要意义.
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食管鳞癌组织MTA2表达与淋巴结转移相关性的探讨
目的:探讨食管鳞状细胞癌(ESCC)组织中转移相关基因2(MTA2)的表达与淋巴结转移的关系及其临床意义.方法:免疫组织化学(SP)方法及流式细胞技术检测102例ESCC标本反12例癌旁正常黏膜组织中MTA2蛋白的表达,统计分析其表达与ESCC淋巴结转移的关系.结果:MTA2在癌旁正常食管黏膜组织中无表达,在部分ESCC组织中呈阳性表达,阳性率为68.6％(70/102),其中强阳性28例；ESCC组织中淋巴结转移组与未转移组MTA2蛋白表达的强阳性率分别为68.2％(15/22)、27.1％(13/48),差异有统计学意义,P=0.003; MTA2的阳性表达与ESCC的淋巴结转移数目及淋巴结转移率均呈正相关,P值分别为0.006、0.001;流式细胞技术结果显示,淋巴结转移组与非转移组MTA2蛋白相对含量分别为252.11±30.22、161.42±22.89,差异有统计学意义,t=15.11,P=0.000.结论:MTA2蛋白的阳性表达与SCC的淋巴结转移密切相关,MTA2可能是ESCC一种新的标志及治疗靶点.
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β-catenin和Nanog表达与结肠癌术后复发转移的相关性分析
目的:探讨结肠癌组织中β-catenin和Nanog表达及其对复发转移的预测作用.方法:采用免疫组化方法检测80例结肠癌组织β-catenin和nanog表达,RT-PCR检测20例冷冻标本肿瘤及癌旁组织中Nanog表达.结果:在80例患者中,35例出现复发转移,β-catenin和Nanog在转移组中表达率分别为65.7％(23/35)和60.0％(21/35),在非转移组中分别为31.1％(14/45)和26.7％(12/45),差异有统计学意义(x2=9.483,P=0.002；x2 =9.026,P=0.003).结肠癌原发灶分化程度不同,β-catenin和Nanog表达存在差异,但是同T和N分期没有明显联系.生存分析结果显示,不同表达状态其远处转移出现时间差异有统计学意义(P=0.000 2),两者均为阳性表达其转移率明显高于均为阴性表达.RT-PCR分析下结果显示,20例肿瘤组织中Nanog阳性表达率为35.0％(7/20),明显高于癌旁组织,P=0.018.结论:肿瘤组织中β-catenin和Nanog表达同结肠癌术后复发转移发生相关,两者联合检测有助于评估肿瘤转移的可能.
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直肠癌组织PI3K和Survivin及VEGF表达与肿瘤侵袭转移相关性的探讨
目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、存活素(Survivin)及血管内皮生长因子(VEGF)蛋白在人直肠癌组织中的表达,及其与直肠癌临床分期、组织学分级和侵袭转移的相关性及意义.方法:免疫组化SP法检测PI3K、Survivin和VEGF蛋白在60例直肠癌、30例直肠腺瘤及10例正常直肠组织中的表达.结果:PI3K在直肠癌、腺瘤和正常组织中的异常表达率分别为81.7％(49/60)、36.7％(11/30)和30.0％(3/10),差异有统计学意义,x2=17.86,P=0.001；Survivin的阳性表达率分别为90.0％(54/60)、80.0％(24/30)和20.0％(2/10),差异有统计学意义,x2=9.54,P=0.002；VEGF的异常表达率分别为71.7％(43/60)、43.3％(13/30)和30.0％(3/10),差异有统计学意义,x2=5.68,P=0.025.PI3K、Survivin及VEGF的异常表达均与临床分期及转移密切相关,P值均＜0.05.VEGF在直肠癌组织中染色阳性者(11.04±1.68)微血管密度(MVD)较染色阴性者(7.66±1.22)高,t=7.53,P＜0.05.在直肠癌组织中PI3K与Survivin(r=0.396,P=0.001)和VEGF (r=0.417,P=0.000 5)表达呈正相关,Survivin与VEGF表达呈正相关,r=0.332,P=0.005.PI3K和Survivin及VEGF蛋白协同阳性表达的侵袭转移率为55.0％(33/60),其中Ⅳ期远处转移率为93.8％(15/16).结论:PI3K和Survivin及VEGF蛋白的表达与临床分期及肿瘤侵袭转移密切相关,提示PI3K和Survivin及VEGF信号转导通路在人直肠癌侵袭转移中起重要作用.
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还原型谷胱甘肽对蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡影响的研究
目的:探讨还原型谷胱甘肽在启动蛋白酶体抑制剂诱导甲状腺癌细胞凋亡中的作用.方法:选取4种人甲状腺未分化癌细胞系ARO、FRO、KTC2和8305C,分别设空白对照组、万珂处理组；流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡；测定还原型谷胱甘肽(GSH)含量、谷氨酸半胱氨酸合成酶(GCL)和谷胱甘肽合成酶(GS)的活性；实时定量PCR法检测GCL和GS mRNA的水平.结果:与对照组相比,蛋白酶体抑制剂万珂对人甲状腺癌细胞系FRO和KTC2具有很强的细胞凋亡诱导作用；万珂处理24 h时,FRO、KTC2细胞中GSH水平下降,差异有统计学意义,P＜0.01；ARO和8305C细胞中GSH水平显著增加,差异有统计学意义,P＜0.01.万珂处理组FRO和KTC2甲状腺癌细胞中,GCL的活性没有变化而GCL mRNA也仅有轻度增加,P＞0.05；但在ARO和8305C细胞中,万珂作用8h后,GCL的活性及mRNA的表达显著增加,差异有统计学意义,P＜0.01；而GS活性及mRNA水平在各组细胞中的变化差异均无统计学意义,P＞0.05.结论:蛋白酶体抑制剂可诱导耐药的甲状腺癌细胞中GCL转录和活性增高,提高GSH在细胞中的表达,导致蛋白酶体抑制剂诱导的肿瘤细胞凋亡受抑.
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c-erbB-2-siRNA对结肠癌HT-29细胞放射敏感性影响的研究
目的:观察单纯放射及放射联合应用siRNA对细胞增殖、细胞周期、凋亡和放射增敏性的影响.方法:分别用X射线单纯放射和放射合并转染c-erbB-2-siRNA质粒的结肠癌细胞(分别分为3组pGenesil-erbB-2实验组、阴性质粒对照组和转染试剂对照组),MTT法、平板克隆形成实验检测细胞增殖和放射敏感性,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡.结果:6、8GyX射线照射组较0、2和4 Gy组的吸光度A值分别为0.314±0.035、0.117±0.009和0.721±0.044、0.608±0.018、0.584±0.041,6、8 Gy组显著低于0、2和4 Gy组,P=0.000 1；放射合并c-erbB-2-siRNA组在0、2、4、6和8 Gy照射组的吸光度A值分别为0.741±0.024、0.611±0.071、0.538±0.041、0.245±0.029和0.117±0.011,均显著低于其他两组,P=0.000 1.4、6、8组和0、2 Gy组G2/M期细胞数分别为12.19±0.41、15.02±0.38、18.56±0.94及6.50±0.43、5.26±0.71,前者显著高于后者,P=0.000 1;4 Gy X射线照射合并c-erbB-2-siRNA组、转染试剂对照组及阴性质粒对照组G0/G1期细胞数分别为79.93±0.79、69.34±1.17和69.40±0.84,实验组显著高于其他两组,P=0.000 1.0、2、4、6和8 GyX射线照射诱导HT-29细胞发生凋亡的无明显差别,P=0.065;4 Gy X射线照射合并c-erbB-2-siRNA组、阴性质粒对照组和转染试剂对照组的细胞凋亡率分别为19.21±3.54、6.82±0.74和7.56±0.35,实验组显著高于其他两组,P=0.000 1.放射合并c-erbB-2-siRNA组的放射增敏比为1.283和1.242,均＞1.结论:放射联合应用c-erbB-2-siRNA对结肠癌HT-29细胞具有抑制细胞增殖、诱导凋亡和放射增敏作用.
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热疗联合顺铂与多西他赛化疗治疗晚期胃癌腹水的临床观察
为了探讨热疗联合化疗治疗晚期胃癌腹水的临床疗效,对9例伴有腹水的晚期胃癌患者,利用内生场局部热疗仪治疗腹部转移病灶,加温至41℃,持续1h,配合顺铂40 mg/m2腹腔给药,多西他赛30 mg/m2静脉滴入化疗,均每周1次,连续3周为1个周期.观察腹水疗效、腹部实体病灶缓解程度和热化疗后的不良反应.结果热化疗后9例患者中有3例腹水消退,6例腹水得到控制；腹部可测量病灶部分缓解4例,稳定2例；没有出现热化疗不良反应叠加.初步研究结果提示,热疗联合顺铂腹腔给药与多西他赛静脉滴入能够较好控制晚期胃癌腹水,并可获得较好的局部病灶缓解.
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三维适形与调强放疗治疗食管癌的临床对照研究
目的:探讨三维适形(3D-CRT)与调强放疗(IMRT)治疗T4期食管癌的疗效及预后因素.方法:170例T4期食管癌接受3D-CRT或IMRT,放疗剂量DT 54～70 Gy.采用前程常规后程3D-CRT者35例,全程3D-CRT者88例,IMRT者47例.SPSS 11.5软件进行预后分析.结果:全组放疗后食管造影评价CR 52例,PR 105例,NR 13例,总有效率(CR+PR)为92.4％(157/170);1、3年总生存率分别为61.2％和25.2％,中位生存期15.4个月.后程3D-CRT、全程3D-CRT和IMRT组1、3年生存率(x2=0.89,P=0.641)和局部无复发生存率(x2=0.24,P=0.886)差异均无统计学意义.分层分析结果显示,仅有淋巴结转移者后程3D-CRT与IMRT(x2=4.91,P=0.027)、胸中下段癌后程3D-CRT与全程3D-CRT(x2 =4.25,P=0.039)以及后程3D-CRT与IMRT(x2=4.35,P=0.033),亚组间1、3年生存率差异有统计学意义；其余各因素3组间比较生存率差异均无统计学意义,P＞0.05.全组预后COX分析结果显示,仅食管原发肿瘤部位、淋巴结转移和近期疗效为独立预后因素.结论:IMRT与3D-CRT治疗T4食管癌,生存优势不明显；原发肿瘤部位、淋巴结转移及近期疗效影响T4食管癌预后,结果有待进一步前瞻性研究证实.
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后纵隔支气管囊肿二例报告
1病例报告病例1:女,50岁.因咳嗽、咳痰3个月于2011-01-05入院,无发热,无夜间憋喘.查体未见异常.支气管镜检查未见异常.入院后CT检查示,左肺下叶近脊柱旁示一类椭圆形软组织密度影,大小约2.8 cm×2.0 cm×4.0 cm,与隔肌胸膜关系密切,边界清,其内可见点状及斑片状致密影,CT值20～40HU,未见明显强化,纵隔内未见肿大淋巴结,考虑左肺下叶良性病变(图1A).入院5d后予手术切除,术中所见,肿瘤位于左后下纵隔近左下肺韧带处,大小约3.0 cm×4.0 cm,质软,呈囊性,包膜完整,与周围边界清晰,内含黄白色胶壮液体.术后病理:支气管源性囊肿.
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芥菜子对DMH诱导大鼠大肠癌预防作用的体内研究
目的:探讨芥菜籽(MS)对1,2-二甲基肼(DMH)诱导的大鼠大肠癌的预防作用.方法:用DMH腹腔注射诱导大鼠发生大肠癌,观察MS对诱癌率及胸腺指数和脾指数等的影响.结果:用DMH成功诱导大鼠大肠癌模型,正常对照组未见肿瘤发生,DMH组腺癌发生率为83.33％ (10/12),腺瘤发生率为16.67％(2/12),总肿瘤发生率为100％(12/12),肝及淋巴结转移率为58.33％(7/12).5％MS和7.5％MS组腺癌发生率比DMH组分别降低了58.33％和75.00％(X2=15.662,P=0.000),肝及淋巴结转移率分别降低了41.66％和50.00％(x2 =8.585,P=0.014),总肿瘤发生率[66.67％(8/12),41.70％(5/12)]亦显著低于DMH组(x2=9.687,P=0.008),而腺瘤发生率[41.67％(5/12),33.33％(4/12)]则高于DMH组.7.5％MS组大鼠胸腺指数和睥指数均明显大于DMH组,P值分别为0.013和0.037；同时5％MS组胸腺指数也显著大于DMH组,P=0.039.结论:MS对DMH诱导的大肠癌有预防发生及减少转移的作用,并能改善机体免疫功能.
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血清PG和G-17及幽门螺杆菌抗体表达与胃癌发病率相关性分析
目的:探讨福建省胃癌高、中、低发地区居民血清胃蛋白酶原(PG)Ⅰ、PGⅡ、胃泌素(G-17)水平及幽门螺杆菌(Hp)感染的分布趋势.方法:选择长乐市江田镇、同安区大同镇和福安市赛歧镇分别代表福建省胃癌的高、中、低发地区,以ELISA检测3地区居民(共725人)的血清PGⅠ、PGⅡ、G-17含量及Hp IgG抗体,统计学检验比较各指标在3地区间的差异.结果:长乐江田镇、同安大同镇和福安赛歧镇PGⅠ中位数分别为110.75、131.00和107.32 μg/L,PGⅡ为13.90、14.70和7.79μg/L,PGⅠ/PGⅡ比值为7.91、8.66和13.09,G-17为2.90、1.10和1.00 ρmol/L,Hp感染率分别为49.6％、33.5％和29.3％.各指标在3个地区间的差异均有统计学意义,z值为47.15～121.76,x2=22.47,P值均＜0.001.3地区居民血清指标异常者(PGI＜25 μg/L、PGⅠ/PGⅡ比值＜2.5或G-17≥2 ρmol/L)所占的比例差异有统计学意义,x2值为13.45～94.46,P值均≤0.001.Hp感染阳性者的血清PGⅠ、PGⅡ和G-17均高于阴性者,而PG Ⅰ/PGⅡ比值则低于阴性者.无论Hp阳性或阴性,3个地区居民的血清学指标差异都有统计学意义,z值为-3.32～70.36,P值均＜0.05.结论:福建省胃癌高、中、低发地区居民血清PGⅠ、PGⅡ、G-17水平及Hp感染率分布有明显的地区差异,提示这些血清学指标的变化可能与胃癌的发生密切相关.
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基因表达谱芯片胃癌差异表达基因的筛选
目的:利用基因表达谱芯片研究胃癌组织中差异表达的基因,从多基因角度研究胃癌发生的分子机制.方法:抽提6例胃癌组织和相应的癌旁组织的总RNA,反转录成cDNA同时进行标记.将标记的cDNA与基因表达谱芯片杂交,经过芯片的扫描和数据处理,分析出胃癌组织和癌旁组织之间差异表达的基因.结果:通过对胃癌组织和癌旁组织的基因表达谱的比较分析,发现在胃癌组织中表达差异＞2倍的基因共有696个,其中表达上调的基因318个,表达下调的基因378个.差异表达的基因主要参与信号转导、免疫反应和细胞运动等生物学过程.结论:胃癌组织与癌旁组织的表达谱存在较大差异,利用基因表达谱芯片可筛选出胃癌差异表达的基因,从而有利于在临床上对肿瘤的诊断和治疗.
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siRNA靶向沉默hyrdC基因对胃癌细胞SGC-7901生长作用的研究
目的:观察RNA干扰靶向沉默hyrdC基因对胃癌SGC-7901细胞生长的影响.方法:将已成功构建的携带hyrdC基因以及沉默hyrdC基因的重组腺病毒Ad-hyrdC、Ad-shyrdC分别转染胃癌SGC-7901细胞,台盼蓝细胞计数和MTT法观察各组胃癌细胞生长情况,将胃癌细胞接种裸鼠皮下构建裸鼠荷瘤模型观察各组胃癌瘤体的生长情况.结果:Ad-shyrdC组细胞生长明显慢于Ad-hyrdC、Ad-null和正常对照组,差异有统计学意义,P=0.02；Ad-shyrdC组细胞的MTT值明显低于Ad-hyrdC、Ad-null和正常对照组,P=0.03；Ad-shyrdC组胃癌瘤体生长率较Ad-hyrdC、Ad-null组以及正常对照组明显减慢,P=0.02.结论:hyrdC基因具有促进胃癌细胞生长的功能,而沉默hyrdC基因可抑制胃癌细胞的生长,hyrdC基因有望成为胃癌基因治疗领域的新靶点.
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直肠癌术前三维适形放疗和五野调强放疗的剂量学比较研究
目的:探讨直肠癌术前三维适形放疗(3D-CRT)和五野调强放射治疗(5F-IMRT)计划的剂量学特点,及其术前放疗较佳的放疗技术.方法:对27例拟行术前放疗的直肠癌患者进行3D-CRT和IMRT 2套治疗计划设计,比较2种放疗计划的靶区剂量学特点以及小肠、膀胱和双侧股骨头等正常组织的受照射剂量及体积.结果:5F-IMRT计划中适形指数(CI)为(0.805±0.050),大于3D-CRT(0.698±0.060),P＜0.001;2种计划的GTV均匀指数(HI)值均非常接近1,差异无统计学意义;5F-IMRT计划中HICTV和HIPTV值均分别小于3D-CRT计划,P＜0.05.5F-IMRT计划中小肠D5、Dmin和Dmax与3D-CRT相应参数差异无统计学意义,但Dmean低于3D-CRT,P＜0.05；5F-IMRT计划中小肠V30高于3D-CRT,而V50则前者低于后者,差距也有统计学意义,P=0.041.类似的结果也见于膀胱.5F-IMRT计划中左、右股骨头Dmin和Dmax均低于3D-CRT,V40也明显小于3D-CRT,P＜0.05.结论:直肠癌术前放疗5F-IMRT计划剂量分布适形性及均匀性明显优于3D-CRT,且能更好地保护直肠周边邻近的正常组织器官.
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食管癌细胞株高侵袭力亚系的建立及其生物学特性研究
目的:建立具有不同转移潜能的高侵袭能力食管癌细胞株亚系并研究其生物特性.方法:利用Transwell侵袭小室从人食管鳞癌Eca-109细胞株筛选高侵袭能力食管癌亚系,HE染色比较细胞形态；四甲基偶氯唑蓝(MTT)法检测细胞增殖能力的变化；流式细胞术( FCM)检测细胞周期；蛋白质印迹法检测与侵袭能力相关基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和金属蛋白醇组织抑制因子-2(TIMP-2)蛋白表达.结果:利用Transwell侵袭小室从食管癌Eca-109细胞株中筛选出高侵袭能力食管癌细胞株亚系,命名为Eca-109 T4.2个细胞系细胞形态没有明显差异.MTT法检测显示,亚系Eca-109 T4增殖能力强.细胞周期显示,增殖指数(PI)高,PI=41.0％,且MMP-2蛋白表达相比增高,P=0.023;TIMP-2蛋白表达相比增高,但差异无统计学意义,P=0.392.结论:建立了不同转移潜能的高侵袭能力食管癌细胞株亚系,将可以用于探讨食管癌转移机制的研究.
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人MUC4启动子驱动的HSV-TK重组腺病毒靶向杀伤SGC-7901胃癌细胞的实验研究
目的:构建人粘蛋白( MUC4)启动子驱动下的单纯疱疹胸苷激酶基因(HSV-TK)重组腺病毒,研究其对SGC-7901胃癌细胞的靶向杀伤作用.方法:克隆MUC4启动子区625 bp活性序列,构建重组荧光素酶报告基因载体pGL3-MUC4,检测其在SGC-7901胃癌细胞及NIH3T3成纤维细胞中的转录活性.以AdEasyTM腺病毒系统为载体,构建MUC4启动子驱动下的HSV-TK重组腺病毒rAdeno-MUC4-TK,感染SGC-7901及NIH3T3,经更昔洛韦(GCV)处理,MTT法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡.结果:成功扩增出大小为625 bp的MUC4启动子序列.pGL3-MUC4在SGC-7901细胞中具有强转录活性,转录活性高于强启动子SV40 6.6倍,而NIH3T3成纤维细胞系中几乎无转录活性.构建重组腺病毒rAdeno-MUC4-TK,MTT法和TUNEL检测结果显示,其与GCV联合能够诱导SGC-7901细胞凋亡,产生靶向细胞毒作用.结论:人MUC4启动子驱动下的HSV-TK重组腺病毒联合GCV对SGC-7901胃癌细胞具有靶向杀伤作用,MUC4启动子可以作为胃癌靶向基因治疗的工具.
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一氧化氮对食管癌细胞放射增敏效应及其机制的探讨
目的:探讨一氧化氮(NO)对食管癌细胞株TE-1的放射增敏影响及其可能的机制.方法:四甲基偶氮唑蓝比色实验(MTT法)观察NO及放射线对细胞增殖的抑制作用,并分析NO、TE-1的放射增敏作用.流式细胞法(FCM)观察NO、放射线对细胞凋亡及周期的影响.逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹法研究NO对锰超氧化物歧化酶( MnSOD) mRNA及蛋白表达的影响.结果:0.1～4 mmol/L NO及1、2、4、6和8 Gy放射线处理后,TE-1细胞生长抑制率明显增加.1.0 mmol/L NO联合1、2、4和6 Gy放射线处理后,放射增敏比值为2.68,说明NO有放射增敏作用.细胞凋亡实验显示,NO联合放射线作用的凋亡细胞比率为(10.7±0.7)％,与NO、放射线单独作用相比,差异有统计学意义,P＜0.05.细胞周期实验显示,NO联合放射线使G0+ G1期[(29.00±1.20)％]、S期[(29.80±1.10)％]细胞数减少,G2 +M期[(41.20±2.50)％]细胞数增加,与NO、放射线单独作用相比,差异有统计学意义,P＜0.05.RT-PCR显示,NO联合放射线作用的TE-1细胞MnSOD mRNA表达量为0.12±0.03,与NO、放射线单独作用相比,差异有统计学意义,P＜0.05.蛋白质印迹法结果显示,NO联合放射线作用的TE-1细胞MnSOD蛋白表达量为0.13±0.1,与NO、放射线单独作用相比,差异有统计学意义,P＜0.05.结论:NO可能通过影响TE-1细胞周期,降低MnSOD mRNA及蛋白的表达,从而抑制食管癌细胞凋亡,增强放射线对食管癌细胞的杀伤作用.
