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益骨汤对去势大鼠骨组织Wnt/β-catenin经典信号通路的影响

林晓芳;姚新苗;李威;陈贤彪;方芳

摘要: [目的]观察益骨汤对去势大鼠骨组织中Wnt/β-catenin经典信号通路的影响,探讨益骨汤防治骨质疏松症(osteoporosis,OP)的作用机制.[方法]将44只12周龄雌性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、补佳乐组、益骨汤组,每组11只.除正常组外,模型组、补佳乐组、益骨汤组大鼠切除双侧卵巢,建立OP模型.从造模成功第13周起,正常组、模型组以10mL·kg-1的双蒸水灌胃,补佳乐组、益骨汤组分别以0.36mg·kg-1补佳乐、 10mL·kg-1的益骨汤水溶液灌胃,均为1次/d,共12周.12周后,以双能X线骨密度仪测定各组大鼠股骨骨密度(bone mineral density,BMD),HE染色检测股骨病理学改变,实时荧光定量PCR检测细胞外因子10b(Wnt10b)、β-链蛋白(β-catenin)、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor2, Runx2)、成骨细胞特异性转录因子(Osterix,OSX)和Dickkopf相关蛋白1(Dickkopfl,DKK1)基因表达量,免疫组化和Western blot检测 Wnt10b、β-catenin、Runx2、OSX蛋白表达量.[结果](1)与模型组比较,补佳乐组、益骨汤组BMD均升高(P<0.05,P<0.01);与补佳乐组比较,益骨汤组BMD升高,但差异无统计学意义(P>0.05).(2)与模型组比较,补佳乐组Wnt10b、β-catenin基因表达量升高(P<0.01,P<0.01);益骨汤组 Wnt10b、β-catenin、Runx2基因表达量升高(P<0.01,P<0.01,P<0.01),DKK1基因表达量降低(P<0.05).益骨汤组 Wnt10b、β-catenin、Runx2基因表达量高于补佳乐组(P<0.05,P<0.05,P<0.05).(3)免疫组化检测提示,与模型组比较,补佳乐组Wnt10b)、β-catenin、OSX蛋白表达量升高(P<0.01,P< 0.05, P<0.01),益骨汤组Runx2、OSX蛋白表达量升高(P<0.05,P<0.05);与补佳乐组比较,益骨汤组各蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05).(4) Western blot检测提示,与模型组比较,补佳乐组Wnt10b、β-catenin、Runx2、OSX蛋白表达量升高(P<0.01,P<0.01,P<0.01,P<0.01),益骨汤组 Runx2、OSX蛋白表达量升高(P<0.01,P<0.01).与补佳乐组比较,益骨汤组各蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05).[结论]激活经典Wnt/β-catenin信号通路可能是益骨汤防治OP的作用机制.

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