NDY1shRNA真核表达质粒构建及其在卵巢癌A2780细胞中的稳定表达
摘要: 目的:构建NDY1 shRNA真核表达载体,并获得稳定表达shNDY1质粒的卵巢癌A2780细胞。方法根据Gen‐Bank数据库提供的NDY1基因核苷酸序列,设计并合成靶向干扰NDY1基因的小发夹RNA(shRNA)序列,插入表达载体获得重组质粒pGPU6/GFP/Neo‐shNDY1。重组质粒测序鉴定正确后,脂质体介导转染A2780细胞,经G418筛选及有限稀释法获得稳定转染细胞,采用实时定量聚合酶链反应法(RT‐qPCR)和蛋白免疫印迹法分别检测A2780稳定转染细胞NDY1 mRNA及蛋白表达。结果重组质粒测序正确,转染shNDY1后,A2780细胞mRNA及蛋白表达水平分别下降(72.89±4.83)%及(55.85±4.84)%,与对照组相比差异有统计学意义( P<0.05)。结论成功构建 pGPU6/GFP/Neo‐shNDY1真核表达质粒,并获得shNDY1稳定转染的卵巢癌A2780细胞,为细胞水平研究NDY1与卵巢癌的关系奠定实验基础。
-
网状弹力绷带在足部亚急性湿疹患者氧化锌糊包敷治疗中的应用效果
目的 评价网状弹力绷带在足部亚急性湿疹患者氧化锌糊包敷治疗中的应用效果.方法 选取荆州市某三甲医院皮肤科病房收治的足部亚急性湿疹患者96例为研究对象,按照入院时间的先后将其分为对照组(2017年1-6月入院)和试验组(2018年1-6月入院),每组48例.患者在足部均匀涂抹氧化锌糊并覆盖无菌纱布后,对照组采用纱布绷带外固定法,试验组采用网状弹力绷带外固定法.评价两组患者固定成本、固定时间、纱布固定情况、舒适度及治疗效果.结果 试验组患者固定成本和固定时间均低于对照组(P<0.05),纱布有效固定情况、包敷30 min和24 h的舒适度均优于对照组(P<0.05),包敷总有效率高于对照组(P<0.05).结论 在足部亚急性湿疹氧化锌糊包敷治疗中,使用网状弹力绷带可以节省固定成本,缩短固定时间,减少纱布滑脱,提高患者舒适感和治疗效果,值得临床推广.
-
1例重症风湿性心脏病合并心力衰竭患者行ECMO联合PE的效果分析
目的 探讨重症风湿性心脏病(简称风心病)合并心力衰竭患者行体外膜肺氧合(ECMO)联合血浆置换术(PE)的临床效果.方法 选取入住胸外科重症风心病合并心力衰竭患者1例为研究对象,对患者采用ECMO联合PE辅助治疗,分析其临床疗效.结果 术后第4天,患者成功脱机,继续呼吸机辅助呼吸,吸氧浓度5 L/min,经皮血氧饱和度100%,生命体征平稳,可适当下床活动,体温37.3℃,呼吸18次/分,血压137/57 mm Hg,心率98次/分,肝肾功能指标明显下降,部分指标趋于正常.结论 ECMO联合PE治疗重症风心病合并心力衰竭临床疗效明显.
-
2015年某院细菌耐药监测结果分析
目的 了解临床分离细菌对抗菌药物的耐药性.方法 收集2015年包头医学院第一附属医院临床分离的病原菌1396株,采用自动化仪器法和纸片扩散法相结合进行药敏试验,依据CLSI 2015版标准判读药敏结果.结果 (1)菌种分布:2015年收集1396株非重复的临床分离菌株,革兰阴性菌占71.5%,革兰阳性菌占28.5%.分离比例较高的菌株有大肠埃希菌(26%)、铜绿假单胞菌(15%)、肺炎克雷伯菌(10%)及金黄色葡萄球菌(10%).(2)药敏结果:在肠杆菌科中,大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的阳性率分别为50.1% 、21.9%,产ESBLs的菌株对多数抗菌药物的耐药率比非产ESBLs的菌株高.在非发酵菌中,铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别是15.4% 、11.5%;而鲍曼不动杆菌除对替加环素的耐药率为10.1%,对其他抗菌药物的耐药率多数超过50.0%.在革兰阳性菌中,金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率分别是18.4% 和67.5%,尚未发现对替考拉宁、万古霉素、利奈唑胺耐药的葡萄球菌.而肠球菌属对多数常用的抗菌药均有较强的耐药性,但目前未发现对替考拉宁、万古霉素和利奈唑胺耐药的肠球菌.结论 包头医学院第一附属医院的临床常见耐药菌仍以革兰阴性细菌为主,首次检出耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌,耐药情况不容忽视,应当加强细菌的耐药性监测,加强管理临床对抗菌药物的合理使用.
-
三角韧带修复与下胫腓联合螺钉固定治疗三角韧带损伤的 旋后外旋型Ⅳ度踝关节骨折的近期疗效观察
目的 探讨三角韧带修复与下胫腓联合螺钉固定治疗三角韧带损伤的旋后外旋型Ⅳ度踝关节骨折的临床疗效.方法 回顾分析2010年8月至2016年12月收治的三角韧带损伤的旋后外旋型Ⅳ度踝关节骨折患者32例的临床资料,分为三角韧带修复组15例和下胫腓联合螺钉固定组17例.记录并比较两组患者手术时间、骨折愈合时间及术后内侧关节间隙(MCS)、下胫腓关节间隙(TFCS)、胫腓骨重叠(TFO)、美国矫形足踝协会(AOFAS)评分等情况.结果 术后两组患者随访时间13~18个月,平均14个月.下胫腓联合螺钉固定组1例因术后出现位置不佳重新手术治疗,1例出现下胫腓联合螺钉断裂,但并无不适症状.两组患者骨折均骨性愈合,骨折愈合时间比较差异无统计学意义(t=1.044,P=0.172).两组患者创伤性关节炎发生率及末次随访时MCS、TFCS、TFO及AOFAS评分比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 三角韧带修复和下胫腓联合螺钉固定的方法治疗三角韧带损伤的旋后外旋型Ⅳ度踝关节骨折,均可取得满意疗效,术者可根据自己对手术方式的熟练程度合理选择治疗方式.
-
影响维吾尔族非小细胞肺癌预后的因素分析
目的 分析影响维吾尔族非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后因素.方法 选取2005-2014年在该院就诊的453例维吾尔族NSCLC患者为研究对象,对患者的临床分期、病理类型、驱动基因等临床资料进行对比分析及随访.结果 随访时间截止2017年12月31日,明确死亡患者369例,其中死于肺癌的患者343例,26例患者死于包括心脑血管疾病在内的其他疾病.单因素分析显示:女性(P=0.010),TNM分期(P=0.000),有EGFR突变(P=0.000),有吸烟史(P=0.014),与维吾尔族NSCLC患者的预后相关;多因素分析中仅提示TNM分期(P=0.000)与预后相关.结论 维吾尔族NSCLC患者有其民族的特点,TNM分期是影响维吾尔族NSCLC患者预后的独立因素.
-
88例Rh(D)阴性血妊娠晚期孕妇储存式自体输血的效果分析
目的 观察Rh(D)阴性血妊娠晚期孕妇储存式自体输血采血、回输前后血液指标变化情况及新生儿结局.方法 选取江西省妇幼保健院2015年1月至2018年7月收治的88例Rh(D)阴性妊娠晚期的孕妇,应用预存式自体输血病例进行研究,与预产期前1~2周采血200~400 mL,储存于储血冰箱,待分娩中使用及分娩后回输.分别比较采血前后及回输前后血红蛋白(Hb)、血细胞比容(Hct)、血小板(PLT)水平变化情况、采血及回输的不良反应以及新生儿结局.结果 88例孕妇均顺利采血,采血过程中仅2例出现轻微头晕,1例主诉口渴,其余均无不良反应.88例Rh(D)阴性孕妇产前预存式采血后Hb、Hct、PLT水平较采血前比较,差异无统计学意义(P>0.05),25例孕妇进行自体血回输,回输前后Hb、Hct、PLT水平变化差异无统计学意义(P>0.05).新生儿剖宫产率接近平均水平,Apgar评分平均为(9.86±0.41)分.结论 预存式自体输血在Rh(D)阴性血妊娠晚期孕妇人群中应用安全有效.
-
持续血液滤过联合生长抑素治疗重症急性胰腺炎的临床疗效分析
目的 探讨持续血液滤过联合生长抑素治疗重症急性胰腺炎(SAP)的临床效果.方法 选取2013年1月至2015年11月在陕西省汉中市中心医院住院治疗的110例SAP患者为研究对象,分为观察组和对照组,每组55例.对照组采用持续血液滤过治疗,观察组采用持续血液滤过联合生长抑素治疗.比较两组患者临床疗效、临床症状改善时间、肠黏膜功能、血清生化指标及不良反应发生率.结果 观察组患者总有效率(94.5%)明显高于对照组(72.7%),差异有统计学意义(P<0.05).观察组患者腹痛缓解、腹胀消失、恶心呕吐消失时间,以及住院时间均明显少于对照组(P<0.05).观察组患者胃肠道功能评分、二胺氧化酶(DAO)、D-乳糖(D-lactate)、内毒素(ET),以及血清脂肪酶(LPS)、淀粉酶(AMY)、白细胞(WBC)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均明显低于对照组(P<0.05).两组患者不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05).结论 持续血液滤过联合生长抑素可有效改善SAP患者的肠道黏膜功能,降低炎性指标,缓解临床症状.
-
结肠癌干细胞在结肠癌组织的表达及其对肿瘤线粒体呼吸链的影响
目的 探讨结肠癌干细胞在结肠癌组织的表达及其对肿瘤线粒体呼吸链的影响.方法 选取人结肠癌HCT-116细胞、HT-29细胞及人新鲜结肠癌组织,以磁珠法分离结肠癌干细胞,流式细胞仪检测CD44及CD133表达;β-actin为内参照,采用实时荧光定量PCR法检测ND1、COXⅠmRNA的表达水平.结果 分选新鲜结肠癌细胞、HT-29细胞、HCT116细胞中CD44+分别为2.1%,4% 及4.6%,CD44及CD133表达同时阳性细胞百分率仅为0% 、1.8% 及2.1%.与CD44-比较,CD44+的结肠癌细胞、HCT-116细胞ND1、COXⅠmRNA的表达水平升高(P<0.05),而HT-29细胞无明显变化(P>0.05).结论 结肠癌干细胞线粒体呼吸氧化系统酶指标明显升高,阻断ND1或COXⅠ的表达有可能会抑制肿瘤细胞的生长.
-
三乙醇胺防治婴幼儿浅表型血管瘤放射治疗后 发生急性放射性皮炎的疗效及安全性研究
目的 探讨婴幼儿浅表型血管瘤放射治疗后发生急性放射性皮炎在使用三乙醇胺后的临床疗效及安全性.方法 研究对象为青岛市海慈医疗集团2015年2月至2018年2月收治的80例婴幼儿浅表型血管瘤放射治疗患儿,采用随机数字表法分成研究组与对照组,每组40例.研究组采用90Sr-90Y敷贴器治疗+三乙醇胺治疗,对照组采用90Sr-90Y敷贴器治疗+外涂生理盐水治疗.比较实施不同治疗措施对急性放射性皮炎发生率、治疗效果、恢复时间及安全性的影响.结果 研究组有15例发生急性放射性皮炎,占37.50%,对照组有33例发生急性放射性皮炎,占82.50%,研究组明显低于对照组(χ2=16.875,P<0.05).研究组发生Ⅰ ~Ⅳ级的累积辐射量与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).研究组治愈27例,有效13例,无效0例,对照组治愈24例,有效16例,无效0例,差异无统计学意义(P>0.05).研究组急性放射性皮炎出现时间较对照组明显延长,恢复时间明显缩短(P<0.05).两组均未出现明显不耐受的不良反应,研究组仅出现1例敷药后轻微疼痛,后自行缓解.结论 三乙醇胺应用于婴幼儿浅表型血管瘤放射治疗,不仅能明显预防急性放射性皮炎,还能起到较好的治疗效果,缩短症状消失时间.
关键词: 婴幼儿浅表型血管瘤 放射性皮炎 90Sr-90Y敷贴器 三乙醇胺 -
肺癌患者围化疗期血清CYFRA21-1、NSE和 CA125水平变化的临床价值
目的 探讨肺癌患者围化疗期血清细胞角质蛋白21-1片段(CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和糖类抗原125(CA125)水平变化的临床价值.方法 选取该院2015年12月至2017年12月收治的肺癌患者97例为研究对象,同期收治肺部良性病变患者80例为对照.采用电化学发光法检测患者外周静脉血CYFRA21-1、NSE和CA125水平,分析其变化的临床价值.结果 研究组血清CYFRA21-1、NSE和CA125水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05).Ⅰ ~ Ⅱ期和Ⅲ ~ Ⅳ期化疗后血清CYFRA21-1、NSE和CA125水平较化疗前明显下降(P<0.05);Ⅲ ~ Ⅳ期化疗前和化疗后血清CYFRA21-1、NSE和CA125水平高于同期Ⅰ ~ Ⅱ期(P<0.05).完全缓解(CR)+部分缓解(PR)和稳定(SD)+进展(PD)化疗后血清CY-FRA21-1、NSE和CA125水平较化疗前明显下降(P<0.05);SD+PD期化疗前和化疗后血清CYFRA21-1、NSE和CA125水平高于同期CR+PR(P<0.05).结论 肺癌患者血清CYFRA21-1、NSE和CA125水平明显升高,且随着病情加重升高越明显,化疗后其水平下降.
关键词: 肺肿瘤 围化疗期 细胞角质蛋白21-1片段 磷酸丙酮酸水合酶 CA-125抗原