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活血熄风方对局灶性脑缺血大鼠脑组织中Caspase-3蛋白及mRNA表达的影响

高红莉;刘昭纯

摘要: 目的:观察活血熄风方对局灶性脑缺血大鼠脑组织中Caspase-3蛋白及mRNA表达的影响.方法:光化学法建立局灶性脑缺血大鼠模型,免疫荧光与激光共聚焦技术检测大脑缺血皮层Caspase-3表达荧光强度和阳性细胞计数,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测Caspase-3mRNA表达.结果:与模型组比较,活血熄风方治疗组的Caspase-3蛋白及mBNA表达明显降低(P<0.05或P<0.01).结论:活血熄风方对大鼠局灶性脑缺血损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制Caspase-3蛋白及mRNA表达有关.

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    作者:余伟邦;金忠明;简怡飞;金晶;黄民

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    作者:李小妹;贺君宇;李爽;陈刚;张永峰;李小琴;石孟琼;杨文雁;张继红

    目的:研究木瓜总三萜对非甾体抗炎药(NSAIDs)诱导小肠损伤模型大鼠内源性超氧化物歧化酶/谷胱甘肽过氧化物酶1/过氧化氢酶(SOD/GPX1/CAT)抗氧化系统、细胞外信号调节激酶/核因子2相关因子2/血红素氧合酶-1(ERK/Nrf2/HO-1)和线粒体凋亡信号通路的影响.方法:实验大鼠随机分为正常组、模型组、木瓜总三萜(25、50和100mg/kg)组和雷贝拉唑肠溶片100mg/kg组,各组大鼠灌胃给予相应的药物,每天1次,连续1周,末次给药后禁食,次日再次给药1次;1小时后,除正常组外,其余各组灌胃给予吲哚美辛45mg/kg 1次.24小时后取血,进行血液中SOD、GSH-Px、CAT和MPO、MDA水平检测;取小肠组织进行溃疡指数和组织形态学分析;实时定量PCR检测小肠组织中SOD1、SOD2、SOD3、GPX1、CAT、Bcl-2、Bax、Caspase-3、Caspase-9基因表达;Western blot检测小肠组织中ERK1/2、p-ERK1/2、胞浆Nrf2以、胞核Nrf2、Bcl-2和Bax蛋白表达.结果:木瓜总三萜(25、50和100mg/kg)可显著降低吲哚美辛诱导小肠黏膜损伤大鼠小肠溃疡指数、病理学评分,改善小肠黏膜溃疡、黏膜及黏膜下层肿胀和炎性浸润,显著升高血液中内源性抗氧化酶活性,显著上调受损小肠组织中SOD1、SOD2、SOD3、GPX1、CAT和p-ERK1/2、胞核Nrf2、HO-1、Bcl-2表达,显著下调Bax和Caspase-3、Caspase-9表达,且随着剂量的增加,其作用效果更明显.结论:木瓜总三萜对NSAIDs诱导大鼠小肠损伤具有较好的保护作用,调节内源性SOD/GPXl/CAT抗氧化系统功能及ERK/Nrf2/HO-1和线粒体凋亡信号通路可能是其作用机制之一.

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    目的:观察升清降浊制动颗粒对多发性抽动症行为学及脑组织内GABA、Glu、ASP含量影响,探讨升清降浊制动颗粒治疗多发性抽动症的作用机制.方法:将70只雄性SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、氟哌啶醇0.2mg/kg组、升清降浊制动颗粒258mg/kg、129mg/kg组5组,每组14只,除空白对照组注射生理盐水,其余各组腹腔注射IDPN 150mg/kg建立TS大鼠模型,药物干预3周后,断头取脑,采用高效液相色谱-四级杆离子阱串联质谱仪检测脑组织内GABA、Glu、ASP的含量.结果:在实验中5只始终未达到造模标准,死亡大鼠6只,终59只大鼠参与统计分析,治疗后氟哌啶醇0.2mg/kg组、升清降浊颗粒258mg/kg、129mg/kg组,与模型组比较,运动行为及刻板行为明显减少,中央格停留时间缩短、跨格次数显著减少,攀网时间延长,脑组织GABA含量显著升高,Glu、ASP含量显著降低.结论:升清降浊制动颗粒能够改善大鼠运动行为、刻板行为、动物中枢兴奋性及协调性,其作用机制可能是通过调节脑内兴奋性氨基酸Glu、ASP与抑制性氨基酸GABA平衡实现的.

  • 两种卷柏属植物对人单核细胞白血病U937细胞的增殖和凋亡影响

    作者:金旭东;钟佳美;卢轩;史丽颖;冯宝民;于大永

    目的:研究垫状卷柏、翠云草两种卷柏属植物对体外培养的人单核细胞白血病细胞U937细胞的增殖和凋亡的影响.方法:分别采用95%乙醇对两种植物采用冷浸和热提取两种提取方法,回收溶剂后萃取得乙酸乙酯和石油醚萃取物.采用噻唑兰比色法(MTT)检测不同浓度样品作用于U937细胞24h后的细胞增殖情况,Hoechst33342染色分析细胞形态学变化,Western Bolt检测凋亡蛋白表达情况.结果:MTT法分析表明垫状卷柏、翠云草提取物均对U937细胞的增殖抑制成剂量依赖性关系.其中垫状卷柏热提物效果佳,其乙酸乙酯和石油醚萃取物均有良好抑制效果,乙酸乙酯萃取部位抑制作用更强;Hoechst33342染色发现随着提取物浓度升高,凋亡细胞增多;Western印记分析凋亡相关蛋白,其中Bax蛋白表达量增加,Bcl-2蛋白表达量减少,Caspase-3和Caspase-8蛋白表达量减少.结论:两种卷柏均能有效抑制U937细胞增殖,并且热提总提物抑制效果优于冷漫总提物,其中垫状卷柏热提总提物的乙酸乙酯萃取层初步认为可能是垫状卷柏抗肿瘤的有效部位,其诱导U937细胞凋亡与Caspase依赖性线粒体途径相关.

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    目的:观察赤芍总苷与白芍总苷对给予不同预收缩刺激的大鼠肠系膜上动脉的舒张作用.方法:高效液相检测白芍总苷和赤芍总苷中主要有效成分比例;采用DMT Myograph肌动描计系统记录离体血管张力.观察赤芍总苷与白芍总苷(10-6~10-2g/L)对基础状态和用K+ (60mM)、PE(105M)、5-HT(10-5M)分别预收缩的内皮完整血管的舒张作用;观察赤芍总苷与白芍总苷(10-6~10ag/L)对用K+ (60mM)、PE(10-5M)、5-HT(10-5M)分别预收缩的去内皮血管环的舒张作用.结果:赤芍总苷中主要有效组分氧化芍药苷、芍药内酯苷和芍药苷含量分别为24.72%、19.66%、41.24%;白芍总苷中主要有效组分氧化芍药苷、芍药内酯苷和芍药苷含量分别为5.54%、21.38%、11.78%;在内皮完整的血管上,赤芍总苷与白芍总苷对基础状态的血管没有舒张作用;在不同物质刺激预收缩的内皮完整及去内皮的血管上,赤芍总苷在(10-4~10-3g/L)剂量区间范围内对用K+、PE及5-HT预收缩的血管均有显著舒张作用,而白芍总苷的舒血管作用不明显.结论:用同样工艺流程提取的赤芍总苷和白芍总苷其舒血管作用有明显差别,可能与其有效组分芍药苷、氧化芍药苷和芍药内酯苷等物质的含量差别有关.

  • 黄芩苷通过增强自噬介导顺铂对宫颈癌C-33A/cis细胞敏感性的影响

    作者:陈璐;张娟;栾丽平

    目的:探究黄芩苷对顺铂耐受的宫颈癌C-33A细胞(C-33A/cis)顺铂化疗敏感性的影响,并初步探究其分子机制.方法:使用不同浓度(10、30、100 μmol/L)顺铂作用宫颈癌C-33A细胞和C-33A/cis细胞,CCK-8法检测细胞增殖情况;使用不同浓度(20、40μmoL/L)黄芩苷协同不同浓度(10、30、100 μmol/L)顺铂作用宫颈癌C-33A/cis细胞,设置顺铂单用组和黄芩苷协同组,CCK-8法检测细胞增殖情况.使用不同浓度(20、40 mol/L)黄芩苷协同30 μmol/L顺铂作用宫颈癌C-33A/cis细胞,设置顺铂单用组和黄芩苷协同组,自噬特征蛋白MAPLC3II/MAPLC3I比例评价细胞自噬水平;实时定量PCR检测自噬相关基因Bedin-1、At#和Atgl2的表达.结果:顺铂对C-33A细胞的IC5o值为28.32 μmol/L,对C-33A/ci细胞的IC50值为78.95 μmol/L,C-33A/cis细胞耐药指数为2.79;20、40 μmol/L黄芩苷协同10、30μmol/L顺铂时,对C-33A/cis细胞的抑制率明显高于顺铂单用组;20、40 μmol/L黄芩苷协同30μmol/L顺铂时,C-33A/cis细胞MAPLC3II/MAPLC3I比值明显高于顺铂单用组,自噬水平明显提高;30 μmol/L顺铂作用时,C-33A细胞与C-33A/cis细胞自噬基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达没有明显差别;20、40 μmol/L黄芩苷协同30 μmol/L顺铂时,C-33A/cis细胞自噬基因Beclin-1、Atg5和Atg12的表达均高于顺铂单用组.结论:黄芩苷能明显增强宫颈癌C-33A细胞对顺铂化疗敏感性,其机制与增强细胞自噬水平有关.

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    作者:李小平;闫忠辉;别雨薇;邱俊铭;刘煜

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    目的:研究沙棘红曲胶囊对家兔实验性高脂血症、老年小鼠肝脏脂肪含量的影响,从而为该产品研究与开发提供一定的实验依据.方法:采用高脂饲料喂养实验性家兔造成高脂血症模型,通过检测血清脂蛋白、血浆氧自由基SOD、MDA和GSH-Px以及肝脏TC含量的变化情况,观察不同剂量的沙棘红曲胶囊对高脂血症家兔的影响;给予老年小鼠沙棘红曲胶囊高、低剂量,通过检测老年小鼠肝脏组织脂肪含量,观察不同剂量的沙棘红曲胶囊对老年小鼠肝脏脂肪含量的影响.结果:沙棘红曲胶囊1.8、0.9g/kg组均能显著降低高脂血症家兔血清TC、TG和LDLc,也能降低血浆MDA水平,明显升高血浆SOD活力,并且沙棘红曲胶囊能显著降低高脂血症家兔肝脏TG含量;沙棘红曲胶囊3.6、1.8g/kg均可明显降低老年小鼠肝脏脂肪.结论:沙棘红曲胶囊具有调节家兔血脂代谢以及抗氧化的作用,并抑制TC在肝脏中的沉积和脂肪组织生长.

中药药理与临床

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