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血清物质对人肝癌Bel-7402细胞存活及白蛋白mRNA表达的影响

崔莉;刘沛;马力

摘要: 目的 研究血清物质对人肝癌Bel-7402细胞生长抑制率及白蛋白(ALB)mRNA表达的影响.方法 用重型肝炎合并Ⅱ期肝性脑病患者血清对Bel-7402细胞进行干预,四氮唑蓝比色分析法(MTT法)染色后测出A值,根据A值计算出细胞生长抑制率.根据细胞培养上清中ALT、乳酸脱氢酶(LDH)释放率推断细胞膜的受损情况.细胞培养24 h后提取细胞内总mRNA,反转录成cDNA,用PCR法扩增得到ALB mRNA的特异电泳带,通过凝胶成像系统,测得电泳带光密度和面积,计算AIB mRNA的相对量.结果 (1)MTT实验表明,实验组血清对Bel-7402细胞的生长抑制率随血清浓度升高而增加,当血清浓度高达50.0%时培养48 h后细胞生长抑制率为73.14%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).(2)25.0%血清浓度作用下,不同时间段检测细胞培养上清液中ALT、LDH释放率,实验组与对照组差异均无统计学意义(P>0.05).(3)25.0%血清浓度作用24 h后,用RT-PCR法测得实验组血清培养后细胞内ALB mRNA表达明显减少(P<0.01).结论 发生Ⅱ期以上肝性脑病的重型肝炎患者血清对肝细胞的生长有抑制作用,可能通过抑制肝细胞内ALB mRNA的表达使肝细胞的生长受到抑制,但在肝细胞生长过程中对细胞膜无直接破坏作用.

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