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磁珠法提取乳汁乙型肝炎病毒-DNA在实时荧光定量聚合酶链反应检测中的应用价值

杨波;刘金国;丘文干

摘要: 孕妇病毒性肝炎的发病率是非孕妇的6~8倍,以乙型肝炎病毒(HBV)常见。母乳中含有大量营养成分及保护因子,对新生儿成长具有重要作用,但是母乳中的HBV同样会通过喂养导致新生儿感染乙型病毒性肝炎,中国每年约有80万儿童通过乳汁感染而成为HBV携带者,约占中国婴幼儿HBV感染的1/3[1]。乳汁为非均相液体,含有大量脂肪和蛋白质,对HBV核酸的提取有较大影响,因而如何提高乳汁中HBV核酸提取率对乙型病毒性肝炎诊断具有非常重要的意义[2]。目前,国内实验室主要采用恒温加热法,其提取效率较高,但干扰因素较多,对于低浓度标本提取重复性差,容易产生假阴性[3]。磁珠法是一种较新的将分离技术和富集技术有机结合为一体的核酸提取方法,适用范围较广,可从大多数生物标本中提取DNA或RNA。该技术在乳汁HBV-DNA检测中的应用尚少见报道,本研究拟应用磁珠法及加热法检测82份乙型病毒性肝炎产妇母乳HBV-DNA 含量,比较分析两者结果,探讨磁珠法在实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测乳汁HBV-DNA中的应用价值。

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