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脐血单个核细胞体外定向分化为神经干细胞及其致瘤性的实验研究

向静;王昌铭;王景周

摘要: 目的:探讨人脐血单个核细胞的分离培养和诱导后神经干细胞标志物mRNA的表达,并观察其致瘤性.方法:使用密度梯度离心法得到脐血单个核细胞,用体外贴壁生长的方法获得脐血间质干细胞(MSCs).观察培养过程中脐血MSCs形态的变化,通过流式细胞仪检测干细胞表面抗原的表达.使用NGF和RA联合诱导后,用RT-PCR方法鉴定诱导前后神经干细胞(NSCs)标志物巢蛋白(Nestin)及Musashi-1蛋白mRNA的表达;收集培养后7 d的MSCs,接种于裸鼠皮下,观察是否有增生物的出现,并观察细胞组织形态学变化.结果:脐血单个核细胞贴壁生长后大部分细胞呈梭形,诱导后可分化为神经元样细胞.流式细胞仪检测该细胞不表达CD34,CD11a和CD11b,强表达CD29,符合MSCs特征.诱导后,NSCs表面标志Nestin及Musashi-1表达明显增强(P<0.05),48 h达高峰,然后逐渐减弱;细胞接种后12周,在裸鼠皮下不能形成肿瘤,与对照组相比,细胞形态学未出现恶性变化.结论:脐血中存在MSCs,分离后可以体外扩增,诱导后分化为神经元样细胞,并表达NSCs表面标志.在裸鼠体内不具有成瘤性.脐血能够成为NSCs的新来源.

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