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CD47抗体对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌细胞损伤的保护作用

戴有金;付鹤玲;鲍丹;郑媛;侯道荣

摘要: 目的 观察CD47抗体对异丙肾上腺素(ISO)诱导大鼠原代心肌细胞损伤的保护作用.方法 分离培养40只1~3日龄的SD大鼠心肌细胞,使用ISO诱导原代大鼠心肌细胞损伤模型.采用随机数字表法将大鼠心肌细胞分为正常对照组(Control组)、模型组(ISO组)、治疗组(Anti-CD47+ISO组).Control组,心肌细胞常规培养基培养;ISO组,常规培养基培养,加入ISO(10-5 mol/L)继续培养48 h;Anti-CD47+ISO组,常规培养基加入CD47抗体(7 μg/mL)培养12 h后,加入ISO(10-5 mol/L)继续培养48 h.测定培养细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量;使用Annexin-V与PI双染法及流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;超氧化物阴离子荧光探针(DHE)染色检测心肌细胞活性氧(ROS)水平;Western blot检测心肌细胞CD47、Bcl-2和Bax蛋白的表达.结果 与Control组比较,ISO组心肌细胞的凋亡率明显升高(P<0.01);与ISO组比较,Anti-CD47+ISO组可显著降低细胞凋亡率(P<0.01).与Control组比较,ISO组LDH、CK、MDA和ROS水平显著升高(P<0.01),SOD和NO水平显著降低(P<0.01);与ISO组比较,Anti-CD47+ISO组SOD和NO水平显著提高(P<0.01),LDH、CK、MDA以及ROS水平显著降低(P<0.01).Western blot结果显示,与Control组比较,ISO组CD47和Bax表达显著升高(P< 0.05、P<0.01),Bcl-2表达显著降低(P<0.01);相比于ISO组,Anti-CD47+ISO组CD47和Bax表达明显降低(P< 0.01),Bcl-2表达明显升高(P<0.05).结论 CD47抗体可能通过抑制ROS的产生、调节Bcl-2/Bax蛋白表达比例来抑制心肌凋亡,从而对ISO诱导的大鼠原代心肌细胞损伤产生保护作用.

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