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益气补肾方调控胃癌干细胞 niche 及Notch 信号通路抗转移分子机制研究

刘云霞;徐叶峰;蒋沈君;姚勇伟;王娜

摘要: [目的]探讨益气补肾方调控胃癌肿瘤干细胞(cancer stem cells, CSC)niche 及 Notch 信号通路抗胃癌增殖转移的分子机制,为临床应用提供实验依据。[方法]采用人胃癌细胞株 NCI-N87建立胃癌 CSC 富集裸鼠荷瘤模型。裸鼠随机分为阴性对照组、模型对照组、氟尿嘧啶组(5-Fu 组)、益气补肾方组(益气补肾组)及益气补肾方+氟尿嘧啶组(协同组)。每组药物干预6周,观察裸鼠体质量变化及瘤体生长情况,比较各组肿瘤增殖及远处转移情况;采用 ELISA 法检测瘤体血管内皮生长因子受体-1(vascular endothelial growth factor receptor-1, VEGFR-1)、骨桥蛋白(osteopontin, OPN)、缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)、CXC 趋化因子受体4(CXC chemokine receptor 4, CXCR4)表达;采用免疫组化法检测肿瘤组织中 CD24、CD44、上皮细胞粘附分子(epithelial cell adhesion molecule,EpCAM)的表达;采用 Western blot 检测肿瘤组织 Notch1、Jagged1蛋白表达。[结果]给药6周后,益气补肾组、协同组及阴性对照组裸鼠体质量均明显重于模型对照组、5-Fu 组,差异均有统计学意义(P<0.01);模型对照组与阴性对照组裸鼠的瘤体均重于5-Fu 组、益气补肾组及协同组,差异有统计学意义(P<0.01)。5-Fu 组、益气补肾组及协同组裸鼠的肝脏、腹壁、淋巴结及肺的总转移率明显少于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型对照组比,5-Fu 组、益气补肾组及协同组瘤体内 VEGFR-1、OPN、HIF-1α、CXCR4的表达下调,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。益气补肾组与协同组 CD24、CD44的表达均低于模型对照组及5-Fu 组,差异有统计学意义(P<0.05)。益气补肾组 EpCAM 的表达低于模型对照组及5-Fu 组,差异有统计学意义(P<0.05)。益气补肾组及协同组瘤体组织中 Notch1、Jagged1蛋白表达均低于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]益气补肾方具有显著的抗胃癌细胞增殖转移的作用,其机制可能是通过调控 CSC niche 及 Notch 信号通路,进而下调胃癌 CSC 表面标志物 CD24、CD44、EpCAM 的表达,诱导胃癌 CSC 良性分化,从而降低瘤体内 CSC 比例。

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