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表皮细胞培养条件的优化

孙曙光;程大胜;王良喜;王静;毛学飞;曹淑琴

摘要: 目的探讨生长因子(EGF)在人表皮细胞无血清培养中的作用,寻找较好组合,以期加快表皮细胞成皮.方法选择EGF、胰岛素、霍乱毒素、氢化考的松4个实验因素,每个因素设立4个浓度水平.利用L16(4×4)正交表设计试验,考察不同培养条件对表皮细胞生长情况、克隆形成率的影响.结果EGF在无血清培养中对培养人表皮细胞的生长及增殖有明显促进作用(P<0.01),在一定范围内(5~20ng/ml)随EGF浓度提高,效应加强;胰岛素浓度在5g/ml时对培养细胞的生长及增殖影响大;霍乱毒素浓度在4.2ng/ml时作用好;氢化考的松作用不明显.EGF、胰岛素、霍乱毒素、氢化考的松分别取20ng/ml、5μg/ml、8.4ng/ml、0.2μg/ml浓度时细胞生长及增殖效果好.结论采用此优化的培养方法,表皮细胞的生长比较迅速,分化不太明显,可保持较旺盛的增殖力.

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