您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
hMSH2 RT-PCR文献资料
-
hMSH2基因cDNA保守区域的T载体克隆及序列分析
目的 构建含限制性内切酶位点Pst Ⅰ、Kpn Ⅰ的hMSH2基因cDNA保守区域的pGEM-T-S载体，比较分析序列的变化，为以后的毒理学研究提供实验材料。方法 从人胚肺成纤维细胞HLF中抽提总RNA进行RTPCR扩增，直接与T载体连接后转化大肠杆菌DH5α，用蓝/白斑试验筛选阳性克隆，抽提质粒进行酶切鉴定，再行序列分析。结果 经RT-PCR获得631 bp含限制性内切酶位点的阳性产物，T载体克隆、酶切鉴定及序列分析后证实，克隆片段与genbank中该基因的序列同源性为99.5％。结论 本文成功地构建了含hMSH2基因cDNA保守区域的T载体克隆，该克隆可为DNA错配修复缺陷与致癌关系研究提供工具。
关键词： hMSH2 RT-PCR T载体 序列分析
