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体外培养人晶状体上皮细胞HSP27的表达
背景:晶状体独特的解剖位置使其长期暴露于应激环境中.但环境应激能否引起人晶状体上皮细胞中热休克蛋白表达增加?并且这种合成的增加是发生在转录水平,还是在翻译水平,至今尚不知.目的:观察在高温、氧化应激条件下,HSP27在人晶状体上皮细胞中的表达和定位情况.探讨白内障的发病机制.方法:体外培养人晶状体上皮细胞,分别在高温(45℃)、氧化(50 mmol/LH_2O_2)条件下培养30min后,恢复至正常条件.于0,2,4,6,16,24 h不同时间段,采用免疫细胞化学、RT-PCR法检测HSP27的表达情况.结果与结论:晶状体上皮细胞在生理和应激情况下均有HSP27的表达.热休克和氧化应激后2 h导致HSP27mRNA和蛋白表达明显增加,6 h达高峰,16 h仍维持在较高水平.应激导致的HSP27蛋白阳性颗粒由胞浆转移至胞核,并随着时间逐渐转移回胞浆.证实晶状体上皮细胞中存在HSP27.应激情况下,诱导HSP27合成增加,其作为一种对抗应激的蛋白质可能对晶状体上皮细胞起着重要的保护作用.
关键词: 应激 热休克蛋白27 晶状体上皮细胞(LEC-B3) 眼组织工程 体外培养 -
HSP27在培养的人晶状体上皮细胞中的应激表达
目的观察在高温、氧化应激条件下,热休克蛋白27(HSP27)在人晶状体上皮细胞中的表达和定位情况.探讨白内障的发病机制.方法体外培养人晶状体上皮细胞,分别在高温(45℃)、氧化(50 mmol/L H2O2)条件下培养30 min后,恢复至正常条件,于不同时间段(0、2、4、6、16、24 h)采用免疫细胞化学、RT-PCR法检测HSP27的表达情况.结果晶状体上皮细胞在生理和应激情况下均有HSP27的表达.热休克和氧化应激后2 h导致HSP27 mRNA和蛋白表达明显增加,6 h达高峰,16 h仍维持在较高水平.应激导致的HSP27蛋白阳性颗粒由胞浆转移至胞核,并随着时间逐渐转移回胞浆.结论晶状体上皮细胞中存在HSP27.应激情况下,诱导HSP27合成增加,其作为一种对抗应激的蛋白质可能对晶状体上皮细胞起着重要的保护作用.
关键词: 应激 热休克蛋白27 晶状体上皮细胞(LEC-B3)