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深低温保存羊膜在结膜重建中的临床应用
目的:分析深低温保存羊膜移植重建结膜手术成功的基本条件和具体手术方法,评价手术疗效.方法:用深低温保存的羊膜治疗43例结膜损伤患者.包括无眼球结膜囊狭窄10例,大面积结膜肿瘤13例,睑球粘连9例,翼状胬肉7例,并尝试对少数(4例)义眼座暴露病例进行羊膜修补.结果:随诊6～18个月,总治愈率达88.64%,无眼球结膜囊狭窄的治愈率为80%,睑球粘连的治愈率达88.89%,大面积结膜肿瘤和复发性胬肉的治愈率皆为100%,而应用深低温保存羊膜修补义眼座暴露,治愈率只有50%.结论:深低温保存羊膜移植重建结膜手术成功的基本条件是受体眼有一定量的健康结膜.
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眼烧伤睑球粘连分离后结膜重建的临床疗效分析
目的 比较羊膜与唇黏膜移植重建烧伤眼睑球粘连分离后结膜眼表的手术效果.方法 对98例102只眼因酸、碱和热烧伤引起的睑球粘连进行粘连分离,再联合羊膜(52例53只眼73次手术)或唇粘膜移植(46例49只眼61次手术).结果 术后随访0.5～18年,平均(15.2±21.0)个月.在重度粘连的病例中,两种手术效果差异有显著意义(x2=8.240,P=0.016),行唇黏膜移植手术效果较好.眼烧伤后第一次手术的病例中,如行羊膜移植,则中度睑球粘连患眼在不同时间段的手术效果有显著差异(x2=18.980,P=0.001),12个月后手术效果好;而唇黏膜移植的手术效果和手术时间关系不明显.距原发烧伤时间6～12个月内,两种手术效果差异有显著意义(x2=6.949,P=0.031),行唇黏膜移植手术效果较好.其他情况下两种手术之间的疗效比较差别均没有统计学意义.结论 唇黏膜移植可以获得和羊膜移植与对重建睑球粘连分离后的结膜眼表一样的疗效.但羊膜移植的手术效果与手术时机的选择有关,而唇黏膜移植则关联不明显.对于重度粘连患者和距离原发烧伤时间较短或太长的患者,唇黏膜移植效果可能更好.
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羊膜移植在结膜重建中的应用
目的研究羊膜移植(amniotic membrane transplantation,AMT)在结膜重建中的作用.方法回顾性分析AMT修复结膜表层者12例13眼,其中组1有5眼复发性翼状胬肉,组2有5眼化学伤、热灼伤早期,组3有3眼化学伤、热灼伤后睑球粘连.结果经4～21 m(平均13.7m)的随访,术前后视力无明显变化,P＞0.05.组1的5眼经AMT后4眼痊愈,失败的1眼经结膜移植治愈.组2的5眼经AMT后3眼痊愈,1眼部分愈合,1眼失败.组3的3眼经AMT后1眼痊愈,另2眼失败经结膜移植后痊愈.结论AMT可作为复发性翼状胬肉、眼部烧伤早期结膜上皮重建、眼部烧伤晚期结膜囊重建的首选方法,而结膜移植可用于AMT失败者.
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新鲜和深低温保存人羊膜重建兔眼结膜的研究
目的对比新鲜与深低温保存人类羊膜重建兔眼结膜后的组织改变,分析新鲜羊膜在重建结膜中的应用价值.方法 24只新西兰白兔等分成两组.剪去双眼上方球结膜形成结膜缺损,一组右眼行深低温保存人羊膜移植,另一组右眼行新鲜人羊膜移植,两组的左眼行自体球结膜移植.于术后1、3、5、12周处死动物,每组3只,连带巩膜切除术区,进行组织学(HE和PAS)检查,12周标本行透射电镜检查.光镜下对术区炎症细胞计数,数据统计学处理.结果新鲜羊膜植片在术后早期(少1周)自身羊膜上皮细胞存活;3周后,新鲜或保存羊膜植片皆被有杯状细胞分化的结膜上皮覆盖;12周时羊膜被吸收,植片成为正常眼表的一部分;新鲜和保存羊膜移植在术后早期炎症反应高于球结膜移植眼(p＜0.05),又以新鲜羊膜移植者略强烈(p＜0.05),但无任何治疗的情况下,皆可自行平息.结论人羊膜作为一种异种异体移植材料,可成功重建兔眼结膜.新鲜羊膜在正确取材、清洗彻底的条件下,可以与深低温保存羊膜同样应用于结膜重建.
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壳聚糖静电纺丝膜对兔球结膜损伤的促修复作用
目的 评价壳聚糖/明胶静电纺丝膜对球结膜损伤后组织的促修复作用及抗瘢痕化作用.方法 利用静电纺丝技术制备壳聚糖/明胶静电纺丝膜,采用钨灯丝扫描电子显微镜观察静电纺丝膜纤维表征.采用随机数字表法将30只新西兰白兔随机分为模型组、羊膜修复组和静电纺丝膜修复组,每组10只.各组实验兔右眼均接受手术切除6 mm×8 mm的球结膜,用弱酸灼伤损伤部位和角膜缘,制备兔球结膜损伤动物模型,羊膜修复组和静电纺丝膜修复组均于术中在伤口处结膜与巩膜之间平铺生物膜.分别于术后4、8、14、28 d行裂隙灯显微镜检查,观察兔眼手术伤口炎症反应及球结膜修复情况. 结果 扫描电子显微镜下可见静电纺丝膜纤维呈立体网状结构,与生物羊膜空间结构相似,纺丝直径均匀,为0.1 ～0.5 μm.裂隙灯显微镜下观察发现,术后4d各组兔实验眼均未见明显炎症反应;术后8d模型组兔眼球结膜水肿、糜烂,黏性分泌物较多,羊膜修复组和静电纺丝膜修复组兔球结膜轻度充血;术后14 d模型组兔球结膜水肿、充血,羊膜修复组和静电纺丝膜修复组兔球结膜均未见炎症反应;术后28 d模型组兔球结膜可见新生血管,羊膜修复组和静电纺丝膜修复组兔球结膜完全修复.组织病理学观察结果显示,模型组兔眼在术后4d时伤口处球结膜组织游离,术后8d球结膜根部贴附巩膜,术后14d球结膜组织增厚,术后28 d大量纤维组织填充伤口,结膜上皮化.羊膜修复组兔眼术后4d羊膜贴附于巩膜与球结膜之间,术后8d羊膜开始消融,术后14d纤维组织生长且球结膜上皮化,术后28 d球结膜组织修复,瘢痕组织填充较少.术后4d静电纺丝膜修复组可见静电纺丝膜孵育于结膜与巩膜之间,静电纺丝膜消融,术后8d球结膜上皮沿巩膜长入损伤部位,术后14d结膜下组织生长,术后28 d结膜完全修复.结论 与单纯球结膜损伤缝合相比,羊膜或壳聚糖/明胶静电纺丝膜修补对损伤的球结膜有促进修复的作用,且可减轻组织瘢痕化,壳聚糖/明胶静电纺丝膜的促组织修复作用优于羊膜.
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羊膜移植重建结膜的组织学基础
目的研究羊膜、结膜在光镜、超微结构、免疫组织化学上的异同点.方法新鲜羊膜、甘油冷冻保存羊膜及结膜,分别做HE染色、透射电镜、层粘连蛋白(LN)及IV型胶原(C IV)的免疫组织化学染色.新鲜结膜及结膜下组织铺片后,分别染色观察杯状细胞及胶原纤维和弹性纤维.结果电镜下,羊膜与结膜基底膜的超微结构相似,网状层中胶原纤维的直径相同.LN和C IV在羊膜、结膜的基底层染为连续的颗粒状棕色,羊膜的着色明显深于结膜.结论人羊膜和结膜具有超微结构相似的基底膜层.羊膜与结膜的基底膜具有共同的LN和C IV,且以前者为强.
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表皮干细胞基质膜用于结膜重建的实验研究
目的 利用表皮干细胞与结膜去细胞基质膜体外构建复合基质膜组织,移植于实验动物眼表,评价其在结膜重建应用的可行性及价值.方法 新西兰白兔20只,随机分为4组,完全剪除右眼球结膜,并在上方巩膜处植入体外构建的表皮干细胞复合基质膜组织,分别于1、2、3、4周后取移植的复合基质膜组织行冰冻切片,标本分别行PAS染色、人结膜上皮细胞特异性标记蛋白K13抗体、MUC5A/C抗体免疫组化鉴定.结果 体外移植后的复合基质膜组织在移植后2、3、4周K13抗体、MUC5A/C抗体表达阳性,并在3、4周呈杯细胞PAS染色阳性.结论 利用表皮干细胞与结膜去细胞基质膜共建的复合基质膜组织,在临床结膜重建治疗中可作为一种新型的替代移植物.
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甘油保存羊膜在结膜重建中的临床应用
目的:分析甘油保存羊膜移植重建结膜的基本条件和手术方法,并评价手术疗效.方法:对11例不同眼部疾病患者采用甘油保存人羊膜进行移植手术以重建结膜.其中4例为无眼球结膜囊狭窄,2例为眼球萎缩结膜囊狭窄,1例为大面积结膜肿瘤,2例为眼球粘连,2例为下眼睑基底细胞癌.结果:在11例中无1例感染,10d后移植的羊膜透明,缝合处结膜向羊膜上爬行,1mo后新生的结膜上皮完全覆盖移植区,3mo后2例眼球粘连患者重新出现不同程度的睑球粘连,治疗率为91%.结论:甘油保存人羊膜移植手术可有效重建结膜,但其基本条件为受体眼有一定量的健康球结膜及有血液供应的植床与羊膜植片紧密贴附.
