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EcoRⅠ文献资料
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限制性内切酶KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切条件的优化
目的：探讨KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。方法 KpnⅠ和EcoRⅠ不同的酶切体系，酶切含有上述两种限制性内切酶酶切位点的载体pEGFP-Ano2，DNA琼脂糖凝胶电泳检测酶切结果，以获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的优化条件。结果50μL酶切体系，KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切的适宜条件：首先在1×L缓冲液情况下，应用1μL KpnⅠ酶切1μg质粒1 h，再加入1×H缓冲液和0．01％BSA，应用1μL EcoRⅠ继续酶切1 h。结论获取KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切质粒的适宜条件，为今后应用KpnⅠ和EcoRⅠ双酶切实验提供科学的参考依据。
关键词： KpnⅠ EcoRⅠ 双酶切 优化 DNA琼脂糖凝胶电泳
