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  • 一种新的基因克隆方法--消减杂交差异显示分析方法

    作者:郭榕;李勇

    消减杂交差异显示分析方法(subtractive hybridization difference display,SHDD)是近年来在cDNA代表性差异分析方法(cDNA Representational Difference Analysis,cDNA RDA)和mRNA差异显示分析方法(mRNA Differential Display,mRNA DD)的基础上发展而来的一种克隆基因的新方法.SHDD方法结合了cDNA RDA的特异性特点与mRNA DD在双向筛查差异片段和较高的检测灵敏度方面的优势.在具体技术路线设计上,SHDD大的特点就是在两样本间双向一轮与二轮均衡、温和消减杂交基础上引入了同位素mRNA DD差异显示技术,使得该方法在克隆低丰度信息及较弱差异信息、提高差异分析结果的特异性、减少假阳性、减少重复差异结果,提高差异分析的信息量同时又降低工作量等方面明显优于经典的mRNA DD和cDNA RDA方法.

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