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  • 一种快速、经济提取外周凝血基因组DNA方法的建立

    作者:许丽娟;马骁;王洋阳;王静;潘晴;刘梅

    目的:建立一种经济、快速且高质量提取人体外周凝血DNA的方法.方法:摸索佳的匀浆条件,对外周凝血块进行匀浆,采用KI法对匀浆液进行基因组DNA的提取,通过凝胶电泳、单重PCR和多重PCR检测凝血基因组DNA的提取产量和质量,并分别与常规的凝血基因组DNA提取方法,即蛋白酶K消化法,以及提取抗凝血基因组DNA的KI法进行比较分析.结果:佳的匀浆条件为:39000 rmp,15秒.在此条件下提取的基因组DNA完整性好,纯度和产量与蛋白酶K消化法提取凝血DNA和KI法提取抗凝血DNA的结果相比,没有统计学差异.单重PCR和多重PCR也获得了理想的扩增结果.结论:与常规的外周凝血提取方法相比(蛋白酶K消化法),本方法节省了时间和成本,能快速、经济、有效地提取外周凝血基因组DNA,可用于后续的科研和临床诊断需要,解决了部分科研机构血液基因组DNA的样本来源问题.

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