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心脏骤停复苏猪心肌闰盘超微结构变化的研究
目的 观察室颤致心脏骤停猪复苏存活24 h后心室心肌细胞肌节排列和细胞间闰盘结构的变化,探讨钙蛋白酶(Calpain)对心肌超微结构的影响及通过调节缝隙连接蛋白43(Cx43)影响心肌信号传导通路的机制.方法 健康家猪14只,随机分为假手术组(n=5)和复苏组(n=9).复苏组经电刺激建立猪心脏骤停模型,室颤9 min后进行胸外按压CPR,复苏成功5只,存活24 h处死,取心室肌游离壁.透射电镜观察超微结构变化,免疫荧光法观察Cx43表达水平和分布的变化;RT-PCR检测Cx43和Calpain mRNA水平;Western Blot检测p-Cx43、Cx43和Calpain的蛋白表达改变.结果 与假手术组比较,复苏组心肌纤维、肌节排列和闰盘分布较紊乱;心肌细胞间Cx43端-端分布减少、侧-侧分布增多;复苏组Calpain mRNA及蛋白水平均明显增高(P<0.01),Cx43 mRNA及蛋白水平均明显降低(P<0.01),p-Cx43蛋白水平明显降低(P<0.01);p-Cx43/Cx43差异无统计学意义(P>0.05).结论 心脏骤停复苏猪心肌Calpain mRNA水平及蛋白表达的增高,促进了对结构蛋白的分解,造成心肌纤维排列异常,同时影响了缝隙连接内Cx43的表达及分布,而通过总Cx43中p-Cx43水平的增加,复苏后心肌细胞间缝隙连接有代偿性的功能恢复.