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双酚A对人胚肝细胞凋亡的影响
[目的]研究双酚A(BPA)对人胚肝L-02细胞的凋亡的影响.[方法]以MTT来分析不同浓度BPA对人胚肝L-02细胞的细胞存活率的影响;用流式细胞术分析不同浓度BPA对细胞凋亡的影响;通过RT-PCR分析BPA引起的生长抑制、DNA损伤基因GADD45、GADD153、GADD34表达水平的变化.[结果]BPA处理后,L-02细胞的生存率随着BPA浓度的增加而下降,在≥50 μmol/L,细胞的存活率显著降低(P＜0.01).随着BPA浓度升高,细胞凋亡率增加,≥50 μmol/L可显著升高L-02细胞的凋亡率(P＜0.01).生长抑制DNA损伤基因GADD45、GADD153、G4DD34表达水平随着BPA浓度增加表达量也增加,100μmol/L BPA组显著高于正常对照组,但在100μmol/L BPA+VitC组三种GADD基因表达量均稍降低.[结论]BPA对L-02细胞具有细胞毒性作用,可导致细胞凋亡率升高,与细胞生长调控和DNA损伤相关的GADD45、G4DD153、GADD34基因表达升高,VitC可减缓BPA对DNA的损伤作用.
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双酚A对人胚肝细胞DNA损伤和修复功能的影响
[目的]研究双酚A(Bisphenol A,BPA)对人肝L-02细胞DNA损伤修复功能的影响.[方法]分别以1、10、50、100μmol/L BPA和100μmol/L BPA+30μg/L Vit C处理L-02细胞,比较处理和未处理的人胚肝L-02细胞在DNA损伤程度、切除修复鼠缺陷交叉互补蛋白1(ERCC1)、尿嘧啶DNA糖基化酶(UDG)、错配修复hMSH2基因(hMSH2)、DNA依赖蛋白激酶复合物(DNA-PKcs)及O6-甲基鸟嘌呤甲基转移酶(MGMT)表达水平的差异.每组细胞数均为1×106个/ml.[结果]BPA处理后,彗星试验显示BPA在低剂量(10μmol/L)时即具有DNA损伤作用(P＜0.05),随着剂量增大,DNA损伤效应增加.100μmol/L BPA+30μg/L VitC组DNA损伤效应降低,显示抗氧化剂VitC可减缓BPA所致的DNA损伤效应,氧化损伤是BPA所致DNA损伤的方式之一.5种DNA损伤修复酶表达水平在1 μmol/L、10 μmol/L、50 μmol/L剂量组依次降低,在100μmol/L、100μmol/L+VitC组依次增加,50 μmol/L组各种DNA损伤修复酶表达水平低.BPA 50μmol/L组与溶剂对照比较,5种DNA损伤修复酶均有明显降低,差异具有显著性(P＜0.05).100μmol/L组的表达水平均高于50μmol/L组,100μmol/L+Vit C组均高于100μmol/L组.除DNA-PKcs与hMSH2外,其他DNA损伤修复酶在100μmol/L+Vit C组与溶剂对照组比较差异均无显著性(P＞0.05).[结论]BPA对L-02细胞具有氧化损伤作用,并可导致DNA损伤,多种DNA损伤修复酶参与修复双酚A所导致的DNA损伤.Vit C可减缓双酚A的DNA损伤作用.
