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用麻疹活疫苗制备抗麻疹病毒单克隆抗体及其应用
[目的] 制备抗麻疹病毒(MV)的单克隆抗体(单抗,McAb),并用该单抗研制捕获法ELISA检测MV-IgM的诊断试剂金. [方法] 以MV减毒活疫苗免疫Balb/c小鼠,其脾细胞与SP2/0细胞融合,筛选分泌抗MV的杂交瘤细胞株,以获得该单抗,并对用其研制的检测抗MV-IgM试剂盒进行考核. [结果] 获得的杂交瘤细胞株中,B2能稳定分泌高滴度抗MV单抗.经考核,用该单抗酶结合物研制的检测抗麻疹-IgM试剂盒特异性和稳定性良好,与同类商品试剂盒比较,其检出麻疹病例血清抗MV-IgM的时间较早. [结论] 应用麻疹减毒活疫苗成功地制备了小鼠杂交瘤细胞,其中B2株能稳定分泌高效的抗MV单抗,用于研制检测抗MV-IgM捕获法ELISA试剂盒,其敏感性、特异性和稳定性令人满意.
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自制捕获法ELISA抗麻疹病毒-IgM诊断试剂盒的初步评价
目的 初步评价应用自制抗麻疹病毒(抗MV)单克隆抗体(McAB;单抗)及其酶结合物研制的捕获法ELISA抗MV-IgM诊断试剂盒.方法 考核本试剂盒的特异性和稳定性;比较其与同类商品试剂盒的临床检测结果,以评估检测血清抗MV-IgM的敏感性.结果 ①本试剂盒仅与抗MV-IgM阳性血清发生反应,而与抗甲型肝炎病毒-IgM(抗HAV-IgM)、抗乙型脑炎病毒-IgM(抗JEV-IgM)、抗乙型肝炎病毒核心-IgM(抗HBc-IgM)、抗巨细胞病毒-IgM(抗CMV-IgM)、抗EB病毒-IgM(抗EBV-IgM)及类风湿因子(RF)阳性血清均无反应;试剂盒放置37 ℃ 3 d,检测血清抗MV-IgM的活性,无明显降低.②在39例临床疑似麻疹的56份血清中,两种试剂盒仅对8例的8份血清抗MV-IgM检测结果不一致,其中6例的首份血清,本试剂盒阳性,商品试剂盒阴性(第2份血清两种试剂盒均阳性),1例的首份血清(未采到第2份血清),本试剂盒为临界值,商品试剂盒阴性.另1例的第2份血清本室试剂盒阳性,商品试剂盒阴性(两种试剂盒首份血清均阴性,第3份血清均阳性).结论 本实验室研制的捕获法ELISA抗MV-IgM诊断试剂盒具有良好的特异性、稳定性和敏感性,适于麻疹病毒感染的临床诊断和流行病学监测.
