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人趋化因子受体5文献资料
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人趋化因子受体5 N端膜外第一襻的克隆与表达及其特异抗体的制备
目的:获得人β趋化因子受体5(huCCR5)N端膜外第一襻基因片段的序列,并构建表达huCCR5 N 端膜外第一襻的重组体,实现其有效表达及其特异抗体的鉴定.方法:计算机分析比较趋化因子超家族部分成员,定位超家族中同源性低的N端膜外第一襻结构域.PCR扩增出该结构域114个核苷酸序列基因片段,构建融合表达载体pGEX-IN/NR5 ,经测序确定基因片段正确后,在大肠杆菌中表达.表达产物经纯化后免疫新西兰兔.ELISA鉴定CCR5 N端肽段特异性抗体.结果:序列测定结果与文献报道一致,经计算机作图分析ELISA实验数据证明得到抗huCCR5 N端肽段的特异性抗体.结论:本方法采用pGEX-IN在大肠杆菌DE3中有效表达CCR5 N 端膜外第一襻基因片段,并实现了对其特异性抗体的鉴定,为进一步的研究奠定基础.
