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不均一性核糖核蛋白A2/B1在脂多糖诱导的血管内皮细胞通透性增加中的作用
目的 探讨不均一性核糖核蛋白A2/B1(heterogeneous ribonucleoprotein A2/B1,hnRNP A2/B1)在脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激的人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)通透性中的作用.方法以HUVECs为研究对象,筛选出具有hnRNP A2/B1基因沉默作用的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),按不同处理方法实验分为转染阴性对照siRNA组(NC siRNA组)、 转染hnRNP A2/B1 siRNA组(hnRNP A2/B1 siRNA组)、 转染阴性对照siRNA组并进行LPS干预组(NC siRNA组-LPS组)、转染hnRNP A2/B1siRNA组并进行LPS干预组(hnRNP A2/B1 siRNA组-LPS组),分别给予或不给予LPS(1 mg/L)刺激,检测不同时间点(0、6、12、24 h)各组细胞跨膜电阻抗(transendothelial electrical resistance,TEER)值,检测LPS刺激12 h后细胞表面血管内皮钙黏蛋白(vascular endothelial cadherin,VE-cadherin)及细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)蛋白表达变化.结果在相同剂量LPS诱导下,hnRNP A2/B1 siRNA-LPS组HUVECs的TEER在12 h低于NC siRNA-LPS组(P<0.05);在LPS刺激12 h后,hnRNP A2/B1 siRNA-LPS组HUVECs表面VE-cadherin表达明显低于NC siRNA-LPS组,ICAM-1表达明显高于NC siRNA-LPS组(P<0.05).结论hnRNP A2/B1可能通过调节VE-cadherin及ICAM-1蛋白表达影响血管内皮细胞的通透性,发挥血管内皮屏障保护功能.
