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纤毛形成文献资料
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BC022687基因真核表达质粒的构建及在CHO细胞内的蛋白表达和定位
目的:BC022687可能是调节纤毛形成的蛋白.本研究构建BC022687基因真核表达载体并探讨融合蛋白在细胞内表达及定位. 方法:以小鼠睾丸cDNA文库为模板,PCR扩增全长BC022687编码序列,测序后亚克隆至携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的pEGFP-C1真核表达载体中.将构建的重组质粒转染到CHO细胞中,提取细胞蛋白进行Western印迹检测.利用共聚焦激光扫描显微镜观察BC022687/GFP融合蛋白在CHO细胞内定位. 结果:翻译BC022687蛋白的cDNA序列克隆到了真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段大小950 bp.Western印迹检测到相对分子质量约为64 000的融合蛋白表达.BC022687/GFP融合蛋白在细胞内定位以细胞质为主,并在中心体、纤毛形成的模板表达. 结论:成功构建BC022687全长基因真核表达载体,为进一步研究该蛋白的功能奠定了基础.
关键词： BC022687基因 中心体 纤毛形成 CHO细胞 -
纤毛内转运蛋白20的研究进展
纤毛内转运蛋白20(intraflagellar transport protein 20,IFT20)是细胞纤毛内转运蛋白B类中的一种,定位于高尔基体,在纤毛内蛋白转运、纤毛组装和维持纤毛正常形态等多种生理功能的调节中具有关键性作用.IFT20的异常表达与肿瘤、多囊肾、免疫紊乱等多种疾病的发生有关,可能是一些重大疾病防治的分子靶点.
