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C-6'位氨甲基化文献资料
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庆大霉素C-6 '位氨甲基化修饰基因的研究
探索庆大霉素C-6'位氨甲基化修饰作用的基因.首先构建用于genT基因缺失的同源重组质粒pFT104,利用接合转移导入绛红色小单孢菌G1008,筛选获得一株genT基因缺失工程菌GT106(△genT).其次构建用于GT106上genN基因缺失的重组质粒pFTN203,通过接合转移导入GT106,筛选获得一株工程菌GTN205(△genT+ genN).后在genK基因已经明确为C-6'位甲基化酶基因的基础上,在GTN205中敲除genK基因,筛选获得到一株工程菌GTNK308(△genT+ genN+ genK).工程菌发酵产物经质谱分析结果表明,与出发菌G1008相比,GT106组分未发生变化,而GTN205不再合成庆大霉素C1,产物主要积累在庆大霉素C1a和C2,GTNK308未检测到庆大霉素C2b.结果说明,genN基因缺失阻断了庆大霉素C1与C2b的合成,表明genN基因参与修饰绛红糖胺C-6'位氨甲基化,而genT并不参与修饰绛红糖胺C-6'位氨甲基化.
