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携带突变型人IκBαDN cDNA重组嵌合腺病毒Ad5F35的制备与表达
目的 制备携带突变型人核转录因子κB抑制蛋白α(IκBα)cDNA的重组5型和35型嵌合腺病毒(Ad5F35),并分析其表达.方法 应用DNA重组技术,从含有突变型人IκBα(IκBαDN)cDNA的重组逆转录病毒载体pCLX-IκBαDN克隆IκBαDN cDNA到pDC316载体以构建pDC-IκBαDN并随即制备携带IκBαDN cDNA的重组嵌合腺病毒Ad5F35.转染HL-60细胞后,通过实时定量PCR分析IκBα的表达.结果 通过DNA重组技术,将IκBαDN cDNA成功克隆到pDC316载体.DNA序列测定显示,重组pDC-IκBαDN载体内携带有无其它突变并具有正确阅读框架的人IκBαDN cDNA.转染HL-60细胞48h后,HL-60细胞IκBα mRNA表达增加.结论 成功制备到含有人IκBαDN cDNA的重组嵌合腺病毒Ad5F35,并能够在HL-60细胞有效表达IκBα.
关键词: 腺病毒 核转录因子κB抑制蛋白α 突变 -
琐琐葡萄黄酮对阿尔茨海默病大鼠NF-κB/IκB-α信号通路的影响
目的 探讨琐琐葡萄黄酮对阿尔茨海默病大鼠海马组织NF-κB/IκB-α信号通路的影响及可能的作用机制.方法 SD大鼠分为对照组、多奈哌齐组、AD模型组、VTF低、中、高剂量组,采用海马双侧注射Aβ25-35造模,通过免疫组化、免疫印迹及RT-PCR检测NF-κBp65、IκB-α在实验大鼠海马组织内的磷酸化水平、蛋白和基因表达情况.结果 VTF对Aβ25-35诱导的NF-κB激活起到了一定的抑制作用.结论 VTF通过抑制IκB-α的磷酸化实现对NF-κBp65核转位的抑制,从而保护大脑神经细胞.
关键词: 阿尔茨海默病 琐琐葡萄黄酮 核转录因子κB 核转录因子κB抑制蛋白α