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单管巢式实时 PCR文献资料
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单管巢式实时 PCR 检测麻风杆菌方法的建立及初步应用
目的::明确单管巢式实时 PCR 检测麻风杆菌的特异性、灵敏性和重复性。方法:以麻风杆菌 hsp18基因为靶基因设计引物和探针,建立单管巢式实时 PCR 方法检测麻风杆菌并与抗酸染色及普通 PCR 进行特异性和灵敏性的比较。结果:单管巢式实时 PCR 检测下限为2.1 fg 质粒 DNA,普通PCR 为21 fg 质粒 DNA,敏感性高10倍;与8种非麻风杆菌无交叉反应;批内相对标准偏差(RSD)为0.24%~1.08%,批间 RSD 为0.09%~2.8%。对比检测54例麻风疑似标本中,抗酸染色、普通 PCR 和单管巢式实时 PCR 的敏感性分别为81.3%(26/32)、87.5%(28/32)和96.9%(31/32)。结论:单管巢式实时 PCR 特异性强、敏感性高且重复性好。
关键词: 麻风杆菌 单管巢式实时 PCR hsp18