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白花香莲解毒颗粒对HBV全基因组1.3倍体细胞模型病毒复制与表达的影响
目的:观察白花香莲解毒颗粒对HBV全基因组1.3倍体HepG2细胞模型(HBV 1.3P)病毒复制与表达的影响.方法:按照白花香莲解毒颗粒优提取工艺制备稠膏,并使用无菌纯水配制为0.1g稠膏/ml母液,滤纸及0.45μM、0.22μM孔径PVDF超滤膜依次过滤后,应用MEM完全培养基稀释为8个浓度梯度的细胞干预液.CCK-8法测定细胞干预液对HBV 1.3P增殖的抑制率;qPCR法检测干预24h、48h后细胞上清液中HBV DNA水平;化学发光法检测细胞上清液中HBsAg、HBeAg表达量;免疫荧光法测定细胞内HBsAg表达强度.结果:①白花香莲解毒颗粒的去乙酰车叶草酸甲酯含量为1.23mg/g.②CCK-8法的佳检测时间是加入试剂后2h,适宜细胞数范围是2×103~1.2×104个.在0.04~0.625mg/ml范围内白花香莲解毒颗粒对HBV 1.3P增殖无明显抑制作用;在1.25~5mg/ml范围内则会显著抑制HBV 1.3P增殖.③0.625mg/ml是白花香莲解毒颗粒的佳药物浓度,其干预48h HBV DNA的抑制率达(41.86±5.35)%,并能显著降低细胞上清液及细胞内HBsAg、HBeAg的表达.结论:白花香莲解毒颗粒体外具能较强地抑制HBV复制及HBsAg、HBeAg表达的生物活性.