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Toll样受体4小干扰RNA通过影响酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1的表达以抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移
目的 观察在体外实验中,Toll样受体4(TLR4)对人结直肠癌细胞HT29和SW480酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)表达的影响及其癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响.方法 通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法检测TLR4和ACAT1在结直肠癌组织和细胞株中的表达水平.利用TLR4小干扰RNA(siRNA)特异性沉默TLR4后,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和Transwell小室检测并评估人结直肠癌细胞HT29和SW480的增殖、侵袭和迁移能力的变化.采用RT-PCR和Western blot法研究TLR4和ACAT1之间的关系.结果 相对于癌旁组织,结直肠癌组织TLR4和ACAT1 mRNA和蛋白表达明显增高(TLR4 mRNA:2.395 0±0.247 7比1.093 0 ±0.075 8,P=0.000;ACAT1 mRNA:2.1960 ±0.189 5比1.093 0±0.075 8,P=0.000);人结直肠癌细胞株HT29、SW480、Caco-2和DLD-1相对于正常人结直肠细胞株FHC TLR4和ACAT1表达也均表达上调.TLR4 siRNA抑制TLR4的表达,可抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移.同时,TLR4 siRNA在结直肠癌细胞HT29中可降低ACAT1的表达(mRNA:0.3500±0.1457比1.0170±0.1450,P=0.032;蛋白:0.523 3 ±0.052 1比1.1400±0.105 8,P=0.006),而利用ACAT1的慢病毒基因过表达载体pLV-Neo-ACAT1使ACAT1过表达后,可解除TLR4 siRNA对结直肠癌的这一抑制作用.结论 TLR4 siRNA在结直肠癌细胞中通过影响ACAT1的表达以抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移.
关键词： Toll样受体4 小干扰RNA 结直肠癌 酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1 -
酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1基因过表达对泡沫细胞形成的影响
目的 研究在三种不同细胞中过表达酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1基因对泡沫细胞形成的影响.方法 构建携带酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1全长cDNA的pCDNA3.1质粒载体并稳定转染体外培养的人THP-1单核细胞、小鼠RAW264.7单核巨噬细胞和人胚肾293上皮细胞,以油红O染色法检测在乙酰化低密度脂蛋白作用下转染前后三种细胞形成泡沫细胞的情况.结果 在相同的脂质负荷条件下,转染酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1基因的THP-1单核细胞和RAW264.7巨噬细胞同未转染的细胞相比泡沫细胞的形成数量增加,而人胚肾293上皮细胞无论是否转染酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1基因均不易形成泡沫细胞.结论 单核巨噬细胞中过表达酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1基因可促进泡沫细胞的形成.
关键词： 病理学与病理生理学 酰基辅酶A胆固醇酰基转移酶1 巨噬细胞 单核细胞 泡沫细胞
