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hDaxx删除突变体文献资料
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hDaxx及其删除突变体在真核细胞中的表达与鉴定
目的构建N端融合有Gal4DBD的hDaxx及6种删除突变体(△hDaxx)真核细胞表达质粒,并在HT1080细胞中表达.方法将hDaxx及△hDaxx cDNA酶切片段连接到载体pM1或pM2相应位点,构建真核细胞表达质粒pM/hDaxx或pM/△hDaxx.用SuperFectTM脂转染试剂将质粒转染HT1080细胞,细胞裂解液经SDS-PAGE及转硝酸纤维素膜后作Western blot.结果构建的pM/hDaxx及6种pM/△hDaxx能在HT1080细胞中高度表达hDaxx或△hDaxx.结论 N端融合有Gal4DBD的hDaxx及6种△hDaxx在真核细胞中成功表达.
关键词： hDaxx hDaxx删除突变体 真核细胞 表达 -
hDaxx及其删除突变体在原核细胞中的表达与鉴定
目的将人Daxx(human Daxx,hDaxx)及其6种删除突变体(△hDaxx)在原核细胞大肠杆菌BL21(E.coli)中表达,以便在体外探索hDaxx的生物学活性.方法用PCR方法从Hela细胞cDNAs文库中扩增全序列hDaxx cDNA,利用载体pQE3x构建了hDaxx及其△hDaxx质粒,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导E.coli表达相应蛋白质,并将其纯化.结果 IPTG能诱导hDaxx及其△hDaxx在E.coli中表达,表达产物纯化率达85%以上.结论 hDaxx及其6种△hDaxx能在E.coli中表达.
关键词： hDaxx hDaxx删除突变体 原核细胞 表达
