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小鼠原始生殖细胞文献资料
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小鼠原始生殖细胞分离培养方式和生物特性研究
目的：探索一种简单高效的分离、培养小鼠原始生殖细胞（PGCs）的方法，为小鼠模型提供充足的PGCs来源。方法体外分离小鼠12.5 dpc胚胎生殖嵴，剪碎后用含血清、胰岛素-转铁蛋白-硒添加剂、卵泡刺激素、重组表皮生长因子的α-M EM培养基进行组织块贴壁培养；于倒置显微镜下观察细胞形态，采用流式细胞术检测阶段性特异性胚胎抗原，采用实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）、细胞免疫荧光等方法检测干细胞的多能性基因Oct4及减数分裂Ⅰ期的几个特异性基因的表达。结果体外分离培养的小鼠 PGCs具有良好的细胞形态、极强的增殖能力，SSEA-1表达阳性，SSEA-4表达阴性，同时检测到Oct4、Stra8、Vasa、SCP3、ZP3表达均为阳性。结论利用该实验方法能培养出高纯度、具有良好干性及极强增殖能力的小鼠PGCs ，并使该细胞进入减数分裂。
