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转化生长因子α对鼠视网膜M(u)aller细胞谷氨酸转运体调控作用的研究
目的 观察转化生长因子α(TGFα)对鼠视网膜M(u)ller细胞谷氨酸转运体(GLAST)mRNA、蛋白质表达及摄取活性的调控作用.方法 取出生后7～10 d的新生昆明小鼠视网膜组织,体外进行M(u)ller细胞的培养.同一原代细胞的第3～4代细胞培养后随机分为2组:①TGFα干预组:分别加入浓度为50、75、125、150 ng/ml的TGFα,每种浓度3孔;②对照组:仍用含20%胎牛血清的Dulbeccon改良Eagle培养基培养.采用L-3H-谷氨酸摄取分析方法观察不同浓度TGFα对M(u)ller细胞GLAST摄取活性的影响;逆转录聚合酶链反应方法分析M(u)ller细胞GLAST mRNA表达的差异;免疫组织化学染色方法检测M(u)ller细胞GLAST蛋白质表达的变化.结果 随着TGFα浓度的增加,L-3H-谷氨酸的摄取量及GLAST mRNA表达量均逐渐增加,TGFα浓度为125 ng/ml时,L-3H-谷氨酸的摄取量达到大值,为对照组的266%,同时GLAST mRNA表达量也达到大值,为对照组的近4倍.免疫组织化学染色显示当TGFα浓度为125 ng/ml时,干预组M(u)ller细胞内的GLAST蛋白表达量明显高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 TGFα可通过上调GLAST mRNA和蛋白质的表达增加视网膜M(u)ller细胞谷氨酸转运体GLAST的摄取活性.
关键词： 转化生长因子α/投药和剂量 谷氨酸/毒性 动物实验 Müller细胞 -
脑源性神经营养因子对小鼠视网膜Müller细胞谷氨酸转运体表达的调控
谷氨酸是视网膜主要的兴奋性神经递质,然而在病理性浓度升高时,对视网膜神经节细胞(RGC)具有兴奋毒性作用[1].L-谷氨酸/L-天门冬氨酸转运体(GLAST)是表达在视网膜Müller细胞上主要的谷氨酸转运体[5],在维持谷氨酸平衡和保护RGC免受谷氨酸兴奋毒性作用中发挥着重要作用[3].
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外源性谷氨酸对内耳毛细胞及听阈的影响
目的: 观察外源性谷氨酸对内耳毛细胞及听阈的影响. 方法: 将成年豚鼠随机分为3组,经耳蜗钻孔分别给予谷氨酸(Glu)(5, 10, 20 mmol/L). 左耳为给药耳,右耳为对照耳,采用听觉脑干诱发电位(ABR)、畸变产物耳声发射(DP-OAE)、耳蜗铺片、硝酸银染色及透射电镜技术,观察Glu处理前后不同时间的听力学、形态学改变. 结果: 术耳给药后,1 kHz ABR平均阈值分别为(25.0±3.4),(33.9±2.7),(32.2±4.2) dB,8 kHz分别为(28.9±3.7),(38.3±2.8),(37.8±3.8) dB,与对侧耳相比有显著差异(P<0.05). 耳声发射示: 给予低浓度Glu,图形在本底噪声之上. 随浓度的加大,耳声发射不能引出. 形态学改变: 耳蜗注入低浓度Glu时,外毛细胞(外3排)有轻微的错乱,内毛细胞较连贯. 随浓度的加大,外毛细胞三排都有较明显的改变,出现错乱、缺失. 内毛细胞出现缺失,形态改变. 与听力学变化一致.结论: Glu对豚鼠内耳毛细胞具有毒性作用.
