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濒危药用植物麻花秦艽和粗茎秦艽cpDNA提取研究
目的：对麻花秦艽和粗茎秦艽叶绿体基因组进行提取研究，为进一步研究秦艽叶绿体的基因组序列特征、遗传多样性以及资源保护研究奠定基础。方法：本文以麻花秦艽、粗茎秦艽为对象，采用改良的蔗糖密度梯度离心方法进行提取，优化纯化方法，分离得到秦艽叶绿体后测定cpDNA 浓度，检测其OD值并扩增ITS2序列验证其纯度。结果：获得高质量、高纯度的 cpDNA (0.1~0.4滋g/10 g)，扩增ITS2序列验证其无核污染，满足后续测序要求。结论：cpDNA 的纯度和质量对叶绿体基因组测序的正确率和可信度具有重要的影响。本文获得了高纯度、高质量的秦艽cpDNA，为秦艽叶绿体基因组全序列的获得提供保障。
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基于ITS及atpB-rbcL等多片段鉴定粗壮秦艽及其近缘种
传统藏药“解吉”主要基原植物之一粗壮秦艽Gentiana robusta分布区广,且与近缘种呈同域分布现象,遗传背景复杂.多居群平行取样,直接测定该物种及其近缘物种麻花艽G.straminea、粗茎秦艽G.crassicaulis、长梗秦艽G.waltonii,外类群椭圆叶花锚Halenia eUiptica的rDNA ITS区序列及叶绿体DNA的matK,rbcL,rpoC1,trnL (UAA),psbA-trnH,atpB-rbcL,trnS(GCU)-trnG(UCC),rpl20-rps12,trnL(UAA)-trnF(GAA)序列228条;TA克隆法测定粗壮秦艽ITS区序列120条.对粗壮秦艽进行基因分型,形态学及DNA分子证据显示其可能为一杂交物种;克隆序列中寻找稳定位点,多片段组合可鉴定粗壮秦艽及其近缘种.该文对遗传背景多样的药用植物鉴定研究具有重要参考价值.
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基于多基因组片段构建枸杞属药用植物DNA条形码
目的 采用核基因组核糖体DNA ITS区、叶绿体基因组9个DNA片段和线粒体基因组2个DNA片段构建国产枸杞属药用植物DNA条形码.方法 采集枸杞属黑果枸杞Lycium ruthenicum、黄果枸杞上.barbarum var.auranticarpum、宁夏枸杞L.barbarum、枸杞L.chinense和新疆枸杞L.dasystemum5个分类群标本及实验样品,测定各样品的核糖体ITS区,叶绿体matK、rbcL、rpoC1、trnL(UAA)intron、psbA-trnH、atpB-rbcL、trnS(GCU)-trnG(UCC)、rpl20-rps 12、trnL(UAA)-trnF(GAA)和线粒体nadl第2内含子、nad5第4内含子序列;以全萼秦艽Gentiana lhassica为外类群,进行系统学分析.结果 共获得108条序列,ITS区变异位点为丰富;筛选出6个叶绿体DNA片段;2个线粒体DNA片段可作为该属3个物种的条形码推荐序列;构建各物种多基因组多片段组合DNA条形码.结论 ITS区及筛选的6个叶绿体DNA片段均具有物种鉴别意义;2个线粒体DNA片段具有一定鉴别意义;为枸杞类物种鉴定及遗传背景分析提供基础资料.
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叶绿体DNA序列分析在药用植物鉴定中的应用
随着DNA测序技术的发展,叶绿体DNA序列分析被广泛应用于药用植物鉴定和品质研究等方面.本文介绍了近年来叶绿体DNA序列分析在植物系统学和药用植物研究中的应用,认为其在药用植物品种鉴定和伪品鉴别、保护种质资源以及扩大新药源等领域有广阔的应用前景.
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DNA条形码技术在中药鉴定中的应用、局限性与展望
中药品种繁多,来源多样,传统鉴定方法准确鉴别基原植物有其局限性.现代DNA分子鉴定技术具有准确、快速鉴定物种的特点,已广泛应用于中药材及其混伪品的鉴定研究当中.该文就DNA条形码鉴定序列的选择、各类DNA序列的特点、近年来DNA条形码在中药材鉴定中的应用研究、面临的问题以及DNA条形码技术进一步发展的前景进行回顾与展望.
