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应用非标记探针高分辨率熔解曲线技术检测人巨细胞病毒UL97基因H520Q突变
目的 建立非标记探针高分辨率熔解曲线分析技术(HRMA)检测人巨细胞病毒(HCMV) UL97基因H520Q突变.方法 构建HCMV UL97野生型以及H520Q突变质粒,非标记探针HRMA分型技术检测H520Q突变.结果 直接从PCR产物得到的熔解曲线峰形无法区分野生型及H520Q突变型,应用非标记探针HRMA技术可以明显增加实验的敏感性及准确性,可成功区分从野生型到含有不同量的H520Q突变的基因型.结论 非标记探针HRMA技术是一个敏感、经济的检测H520Q突变的基因分型方法.
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更昔洛韦防治移植后巨细胞病毒感染及耐药的研究进展
人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)是移植术后导致患者发病和死亡的主要病毒之一,因而对HCMV的预防和治疗就显得极其重要.目前通常应用更昔洛韦(ganci-clovir,GCV)防治HCMV感染.然而,长期应用GCV易导致耐药,其原因是由于HCMV UL97和/或UL54基因突变造成的.本文就近年来关于应用GCV防治HCMV及其耐药的情况作一综述.
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核酶M1GS-T6对HCMV UL97基因RNA片段体外切割作用
目的:研究M1GS核酶对HCMV UL97mRNA的体外切割作用.方法:针对HCMV UL97 mRNA T6位点设计与之互补的引导序列(Guide Sequence,GS),将其共价结合至大肠杆菌核酶P催化亚基(M1 RNA)的3'末端,构建M1GS-T6核酶,并用其对UL97基因亚克隆片段转录产物进行体外靶向切割实验.结果:核酶M1GS-T6具备特异性切割靶分子UL97 mRNA的能力.结论:核酶M1GS-T6具备特异性切割活性,为进一步研究HCMV病毒基因功能和治疗提供了新的途径.
关键词: 人巨细胞病毒(HCMV) UL97 核酶P M1GS-T6