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rv3407文献资料
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新型肺结核三抗原组分疫苗的开发和小鼠免疫原性研究
目的 构建高效表达结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB) ESAT6、rv3407、RpfB三个显性抗原基因(3 antigens,3Ag) 的重组人5型腺病毒(Adenovirus 5,Ad5) 载体疫苗,在小鼠模型中初步完成药效学研究.方法 用AdEasyTM XL腺病毒载体系统构建重组质粒pAd5-3Ag,经Pac I线性化后转染AD293细胞获得表达3Ag融合蛋白的Ad5-TPA-3Ag; 采用Western blot检测腺病毒载体中融合蛋白的表达; 将纯化的病毒颗粒以肌肉注射和滴鼻两种方式免疫小鼠,采用ELISA检测血清中抗体效价,对病毒的免疫剂量进行优化.结果 含3Ag基因的重组腺病毒载体构建成功.包装的病毒Ad5-TPA-3Ag以8 × 107 IFU的剂量免疫小鼠42d时各抗原的效价高,ESAT6肌肉注射和滴鼻的高效价分别为4. 54和4. 87; rv3407肌肉注射和滴鼻的高效价分别为3. 41和3. 60; RpfB肌肉注射和滴鼻的高效价为3. 63和2. 42.结论Ad5-TPA-3Ag在小鼠模型中可以诱导良好的免疫应答,可能成为一种新型的针对MTB潜伏感染的候选疫苗.
