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氨基酸顺序测定文献资料
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华支睾吸虫1 5/1 6 ku蛋白的纯化与部分氨基酸顺序测定
目的进一步证明华支睾吸虫成虫15/16 ku蛋白(Cs15/16)用于诊断的免疫活性,同时测定其部分氨基酸顺序,便于今后对此蛋白的人工合成等分子生物学研究及其相关免疫学研究.方法用高效液相色谱技术(HPLC)自华支睾吸虫粗抗原(Clonorchis sinensis adultworm antigens,CAA)中提纯15/16 ku蛋白,用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定其抗原活性,并使用蛋白质自动测序仪测定其N端部分氨基酸顺序.结果3个具有抗原活性的纯化样品(H3、H11及H13)中,H13的诊断效果接近CAA,敏感性达90%,特异性95%.分别测获3个纯样的N端15、14和20个氨基酸残基(aa),其中H11的N端14个aa与H13的前14个完全相同.结论进一步证明了Cs15/16为有效的诊断抗原,测获的部分氨基酸顺序可为更深入的研究提供参考.
关键词： 华支睾吸虫 15/16 ku纯化蛋白 抗原活性 氨基酸顺序测定
