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木霉属真菌拮抗金钗石斛病原菌的研究
目的:考察石斛属药用植物内生真菌拮抗软腐病的真菌。方法将179株内生真菌进行金钗石斛软腐病生物防治盆栽试验,以获得拮抗病原菌终极腐霉的内生真菌。将具有拮抗效果的真菌在 PDA培养基中与终极腐霉进行双重培养平皿对峙试验并对其显微形态进行观察,利用3,5-二硝基水杨酸法检测真菌的β-1,3和β-1,4葡聚糖酶活性。结果T. koningiopsis与T. rogersonii在盆栽试验和双重培养平皿对峙试验中对终极腐霉具有抑制作用。T. koningiopsis与T. rogersonii菌丝将终极腐霉菌丝包围并将其破坏;两者β-1,3和β-1,4葡聚糖酶活性在所测试的5种真菌中高。结论T. koningiopsis与T. rogersonii可有效抑制终极腐霉;由两者分泌的β-1,3和β-1,4葡聚糖酶可能在破坏终极腐霉细胞壁方面发挥作用。T. koningiopsis和T. rogersonii可作为潜在的生防菌发挥拮抗终极腐霉作用。
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rDNA ITS区间PCR-RFLP在腐霉属11菌株快速鉴别中的应用
目的:将灭蚊腐霉Pythium sp.与从猝倒、茎腐植株分离到的9个病原真菌相鉴别. 方法:以瓜果腐霉作阳性对照.以ITS1和ITS4为引物,采用PCR方法对待测菌株的rDNA ITS区进行了扩增,再用4种限制性内切酶(TaqI,HinfⅠ,Hin6Ⅰ,MboⅠ)进行酶切,经琼脂糖凝胶电泳后得到RFLP图谱,利用Nei et al的片段比较方法计算菌株间相似程度,NTSYS-PC软件包进行聚类分析.结果:对11个菌株进行了快速鉴别,证明从受感染的植物菌株上分离到的真菌主要是瓜果腐霉,与灭蚊腐霉Pythium sp.有明显区别.结论:rDNA ITS区的PCR-RFLP可用于真菌的快速鉴别.